论文摘要
目的构建鼠源真核表达载体pEGFP-C1-跨膜蛋白88质粒（pEGFP-C1-TMEM88）,并观察其对RAW264.7细胞中炎症因子分泌的影响和对RAW264.7细胞增殖和凋亡的影响。方法在小鼠正常肝细胞株（AML-12）中提取RNA并且逆转录为cDNA,同时将引物稀释到10μmol/L,其余作为储备液。采用PCR技术扩增跨膜蛋白88（TMEM88）并鉴定,使用AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒进行PCR产物的纯化回收。再对PCR产物及载体进行酶切回收,酶切片段连接后,进行连接产物的转化、挑菌、摇菌、质粒抽提。酶切鉴定后,送至测序鉴定。将构建好的质粒转染至小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7细胞中,通过MTT实验和流式细胞术检测其对细胞增殖和凋亡的影响,并用ELISA技术检测炎症因子:白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在RAW264.7细胞中的表达。结果测序结果显示pEGFP-C1-TMEM88真核表达质粒构建成功;MTT实验结果显示:48 h后过表达TMEM88组细胞的增殖率为（0.71±0.04）,显著低于对照组（0.94±0.06）（F=21.55,P<0.01）;流式细胞术结果显示:过表达TMEM88组细胞的凋亡率为（11.52±1.43）%,显著高于对照组（7.78±1.67）%（F=10.07,P<0.05）;ELISA检测结果显示:转染pEGFP-C1-TMEM88质粒后的RAW264.7细胞中的IL-6、TNF-α表达较对照组升高。结论 TMEM88能够显著抑制RAW264.7细胞的增殖并促进其凋亡,TMEM88在RAW264.7细胞中炎症因子IL-6、TNF-α的表达升高,为进一步了解TMEM88的功能奠定了基础。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 李良云,潘林鑫,杨俊发,胡爽,张濛,李俊,徐涛
关键词: 细胞,增殖,凋亡,白细胞介素,肿瘤坏死因子
来源: 安徽医科大学学报 2019年12期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 基础医学
单位: 安徽医科大学药学院,安徽医科大学生命科学学院,92752部队卫生队
基金: 国家自然科学基金(编号:81700522),安徽省自然科学基金(编号:1808085MH235)
分类号: R346
DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.12.006
页码: 1865-1870
总页数: 6
文件大小: 1949K
下载量: 160
相关论文文献
- [1].G-star RAW&Dickies个性化追求[J]. 时尚北京 2017(05)
- [2].求证真相 向手机精美“样片”宣战 破解美颜、RAW两大功能[J]. 摄影之友 2014(03)
- [3].基于FPGA的RAW图像饱和校正的实现[J]. 计算机与数字工程 2017(03)
- [4].Ketamine Promotes Inflammation through Increasing TLR4 Expression in RAW264.7 Cells[J]. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2015(03)
- [5].RAW视频文件格式研究[J]. 电子测试 2018(01)
- [6].化繁为简之作:Sensei平民版——Sensei RAW鼠标评测[J]. 电子竞技 2012(17)
- [7].衢枳壳黄酮组分抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的作用机制研究[J]. 中国中医药科技 2019(04)
- [8].RAW照片孵化器[J]. 数码摄影 2008(03)
- [9].RAW格式图像处理技巧例解78 关注细节 获取至臻画面(1)[J]. 照相机 2018(06)
- [10].Tipe2调控RAW264.7细胞炎症作用的探讨[J]. 世界最新医学信息文摘 2017(86)
- [11].台北RAW餐厅 最难订位的米其林餐厅到底什么样[J]. 环球人文地理 2019(15)
- [12].RAW琐谈[J]. 人像摄影 2008(05)
- [13].我们为什么看重4K RAW 专访调色师李文涛[J]. 数码影像时代 2014(03)
- [14].试论数码照片档案建设中RAW格式的应用[J]. 兰台世界 2012(02)
- [15].固定化漆酶对弱酸性蓝RAW脱色降解的研究[J]. 染料与染色 2012(02)
- [16].蛇六谷葡苷露聚糖对小鼠巨噬RAW264.7细胞免疫调节作用及机制研究[J]. 中国药理学与毒理学杂志 2019(10)
- [17].BMD发布Blackmagic RAW编解码[J]. 影视制作 2018(10)
- [18].面向工业物联网的IEEE 802.11ah协议RAW在线式重分组方法[J]. 通信学报 2020(04)
- [19].共培养体系下小鼠巨噬细胞RAW264.7与骨骼肌细胞C2C12间的相互作用[J]. 第三军医大学学报 2019(20)
- [20].大疆创新INSPIRE 1 RAW测评 航拍新劲旅 秀出大舞台[J]. 数码影像时代 2016(07)
- [21].4K RAW外部录制单元集锦[J]. 数码影像时代 2014(03)
- [22].高品质数字影像利器 关于RAW的一切[J]. 数码摄影 2012(08)
- [23].RAW格式图像处理技巧例解96 RAW图像暗部层次的表现与细节改善[J]. 照相机 2019(12)
- [24].携带小鼠KLF4基因重组慢病毒的构建及对RAW264.7细胞增殖的影响[J]. 天津医药 2018(01)
- [25].RAW格式图像处理技巧例解62 巧妙使用径向滤镜,化平庸为神奇[J]. 照相机 2017(02)
- [26].4K是4K,RAW是RAW[J]. 数码影像时代 2014(03)
- [27].RAW格式图像处理技巧例解94 Lightroom Classic CC 2019 v8.3.10版新功能及其应用技巧[J]. 照相机 2019(10)
- [28].阿里红多糖组分对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响[J]. 食品安全质量检测学报 2017(12)
- [29].王者的荣耀!——赛睿Sensei RAW NaVi版游戏鼠标评测[J]. 电子竞技 2013(21)
- [30].时尚都市情景片 Camera RAW黑白调整法[J]. 人像摄影 2012(11)