埃博拉病毒糖蛋白GP1亚基融合蛋白的真核表达与纯化

论文摘要

埃博拉病毒糖蛋白与病毒黏附、入侵宿主细胞等过程密切相关,为了更好地研究该糖蛋白与宿主细胞的相互作用,拟通过哺乳动物细胞表达系统,构建GP1亚基Fc标签融合蛋白。经鉴定,成功构建了埃博拉病毒糖蛋白GP1亚基的真核表达载体pFUSE-GP1-hIgG1-Fc2,并利用该载体及293T细胞构建了表达GP1亚基融合蛋白的哺乳动物细胞系。该融合蛋白N端带有IL2分泌信号肽,C端带有人IgG1-Fc2标签,可在293T细胞以分泌表达的方式存在于细胞培养上清中,而后利用Protein A亲和层析进行融合蛋白纯化。经Western Blots鉴定,成功制备GP1-Fc融合蛋白。这不仅为埃博拉病毒糖蛋白的研究提供了技术支撑,也为其他种类蛋白的哺乳动物细胞真核表达纯化提供了新思路。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王中一,李佳明,付莹莹,郭振东,陆兵,钱军,刘林娜

关键词: 埃博拉病毒病,糖蛋白,真核表达,亲和层析

来源: 吉林农业大学学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 军事科学院军事医学研究院,吉林农业大学动物科学技术学院

基金: 国家重点研发计划专项(2016YFC1202604),国家自然科学基金项目(31502077)

分类号: R373

DOI: 10.13327/j.jjlau.2018.3987

页码: 92-96

总页数: 5

文件大小: 731K

下载量: 150

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