导读:本文包含了沉默基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,沉默,干扰,霉菌,杆菌,产物,蛋白。
沉默基因论文文献综述
李善仁,郑永标,杜良成,黄建忠[1]（2019）在《溶杆菌中沉默基因簇的激活及其天然产物发现研究》一文中研究指出随着耐药菌的增加和新疾病的出现,寻找具有新结构和新作用机制的天然产物药物成为迫切需要。当今使用的抗生素主要来自于放线菌和真菌中的天然产物,由于筛选方法和培养技术的限制,获得具有新颖结构的天然产物越来越困难。基于新物种拥有新基因,新基因产生新结构代谢产物的指导思想,从尚未开发的微生物中发现新结构和新活性的天然产物药物具有较大的潜力。溶杆菌是一类具有滑行能力的杆状革兰氏阴性细菌,能分泌大量胞外酶和抗菌物质,对多种病原真菌、细菌及线虫等具有拮抗作用,是新型植物病害生防细菌。分析产酶溶杆菌OH11基因组发现15个可能的次级代谢产物基因簇,其中除了HSAF和WAP8294A2生物合成有比较深入的研究外,其他大部分基因簇都是沉默或低表达的,其编码的代谢产物未知。为了挖掘这些沉默基因簇表达的代谢产物,我们利用启动子置换的策略成功激活了其中一个沉默NRPS基因簇,分离得到3个新结构化合物pyrrolopyrazines,意外的发现其生物合成途径存在特殊的NRPS模块跳跃现象,丰富了我们对NRPS生物合成机制多样性的认识。除此之外,我们采用启动子置换的策略也激活了另一个trans ATPKS/NRPS杂合的基因簇,相关的代谢产物还在分离鉴定中,以上研究为微生物中新型天然产物药物的发现开辟了新途径。(本文来源于《华东六省一市生物化学与分子生物学会联盟2019年学术与教学交流会摘要集》期刊2019-07-12）
宋亚坤,张敏,王翘楚,彭玉荔,贾方兴[2]（2019）在《利用RNA干扰技术沉默基因表达在本科实验教学中的设计与实践》一文中研究指出RNA干扰是由双链小RNA介导的基因沉默现象,已成为一个被广泛应用的反向遗传学研究技术。为了让学生更好地理解该技术,本实验教学让学生自己选择靶基因,设计小干扰RNA和引物,然后检测小干扰RNA介导的基因沉默效果。以2018年第五组为例,该组挑选了小鼠长链脂酰辅酶A合成酶1 (acyl-CoA synthetase long-chain family member 1, Acsl1)为靶基因,设计了两对特异性靶向Acsl1 mRNA的小干扰RNA,通过电穿孔的方式将其转染到3T3-L1中,然后提取细胞总RNA和合成cDNA,最后用相对定量PCR检测mRNA的表达量。结果显示两对小干扰RNA都有60%以上的沉默效果。近3年内,大约83%的学生都能独立完成所有实验并最终成功筛选到至少一对有效的小干扰RNA。该教学实践增强了学生对RNA干扰原理和实验的理解,锻炼了学生的实验与科研能力。(本文来源于《遗传》期刊2019年07期）
钟磊,孙青枝,李博,尹楚洁,赵寿媛[3]（2019）在《不吸水链霉菌中沉默基因簇的激活和产物结构鉴定》一文中研究指出不吸水链霉菌S.ahygroscopicus S91(CGMCC4.7082)的次级代谢产物中含有多种抗真菌组分,目前已发现的组分有四霉素、制霉菌素、丰加霉素、白诺菌素和茴香霉素。通过生物信息学分析,不吸水链霉菌S91基因组中含有云南霉素和谷氏菌素的生物合成基因簇,但目前在该菌株发酵产物中并没有检测到这两种抗生素的存在。对四霉素、制霉菌素、丰加霉素生物合成阻断株Streptomyces ahygroscopicusΔttmS1ΔnysBΔtymH进行发酵培养,发现其发酵液中具有水溶性的抑制黑曲霉的活性组分。以抑菌活性跟踪目标未知抑菌化合物,发酵液经离心、草酸酸化后,上清液经大孔吸附树脂DM-2脱色,脱色液经732阳离子交换、中性氧化铝柱柱层析和Sephadex LH-20色谱分离,最终得到两个具有抗真菌的化合物A和B。化合物经紫外、质谱和核磁进行结构鉴定,化合物A为云南霉素,B为谷氏菌素或宁南霉素。生物信息学分析与分离纯化技术相结合,进一步证实该菌株具有产生云南霉素和谷氏菌素抗生素的能力。(本文来源于《中国抗生素杂志》期刊2019年05期）
王德通[4]（2019）在《唤醒植物体内的沉默基因——记中国科学院昆明植物研究所研究员刘莉》一文中研究指出近百年来,地球气候经历了一次以全球变暖为主要特征的显着变化,并在近年来愈演愈烈。2018年,联合国政府间气候变化专门委员会发布了《IPCC全球升温1.5℃特别报告》再一次为全人类敲响了警钟:一旦全球平均气温较工业化前水平升高1.5℃甚至是2℃,那么将会为地球、人类以及动植物带来不可挽回的影响。(本文来源于《科学中国人》期刊2019年07期）
滕铁山,谢龙祥,谢建平[5]（2018）在《新型抗结核药物研发:微生物非常规培养与沉默基因激活策略》一文中研究指出由结核分枝杆菌感染引起的结核病是人类重要传染病之一。临床上结核菌耐药性日趋严重,不断出现的耐多药及广泛耐药结核病患者,使现有的一线至五线药物不能满足结核病防控需求。微生物来源的天然产物是药物先导化合物的重要来源。环境中存在大量常规培养条件下未培养微生物,同时微生物基因组中也存在大量未被表达的"沉默代谢途径"。运用各种方法对未培养微生物进行再培养,同时激活微生物的沉默代谢途径,进而获得潜在的新型抗生素药物已成为目前研究热点。文中系统阐述了近年来获取天然化合物所采用的微生物非常规培养技术及沉默代谢途径激活策略,同时总结了利用这两种方法获得的新型抗结核天然产物,并展望了这些方法在抗结核药物进一步研发中的应用前景。(本文来源于《生物工程学报》期刊2018年08期）
李向月[6]（2018）在《嗜酸乳杆菌NCFM沉默基因slpB的克隆表达及S-层蛋白结构与功能研究》一文中研究指出嗜酸乳杆菌是乳酸菌中重要成员之一,在粘附宿主肠道细胞、与致病菌竞争粘附位点、调节机体免疫功能上发挥着重要作用。作为粘附因子的S-层蛋白,受到越来越多学者的关注与研究。随着基因工程技术的飞速发展,研究者从S-层蛋白的蛋白分子层面深入研究到了基因分子层面。研究表明嗜酸乳杆菌还有另外一个S-层蛋白基因slpB,与slpA基因不同的地方slpB属于沉默基因,对于基因slpB研究报道很少,对于其是否具有粘附功能还需要进一步探索。本课题的主要研究方法与结果如下:1、以提取的嗜酸乳杆菌全基因组为模板成功克隆出slpB基因,条带大小接近1300 bp,与NCBI报道L.acidophilus NCFM基因库中slpB基因大小一致。构建了重组质粒pET-28a-slpB,经过双酶切验证,得到约1300 bp的目的片段和约5400 bp的载体片段,与预测值相符。测序结果与NCBI数据库比对结果正确。2、对构建的重组质粒pET-28a-slpB进行了表达,确定了目的蛋白上清表达高于沉淀表达。通过控制变量法得到了最佳的诱导表达条件:诱导温度37℃、IPTG终浓度1mM、诱导时间14h。通过目的蛋白上的His-tag标签进行纯化蛋白,经过Western-blot和SDS-PAGE检测分析得出His-slpB融合蛋白成功表达及纯化。后期对纯化的蛋白进行透析、浓缩,通过Bradford法检测得出蛋白浓度为0.6 mg/mL。3、将嗜酸乳杆菌正常表达的蛋白进行提取纯化,将从嗜酸乳杆菌表面提取的蛋白命名为SA,沉默基因slpB在大肠杆菌中表达的蛋白命名为SB。SA的β-折迭含量略高于SB,表明比SB结构稳定。通过二级结构表征两种蛋白两端氨基酸组成具有较高的一致性。两种蛋白均对胃蛋白酶具有良好的耐受能力,对胰蛋白酶耐受性较弱。更多的SB可以绑定到保加利亚乳杆菌和乳酸乳球菌的细胞壁上,在大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞绑定能力上,SB优于SA。在对Caco-2细胞粘附上SA优于SB。综上所述,本研究将沉默基因slpB进行了表达,对S-层蛋白结构与相关功能进行了测定分析,为S-层蛋白的开发与利用提供了一定的理论基础。(本文来源于《南京师范大学》期刊2018-03-07）
张平平,张瑜,王化敦,宋桂成,姚金保[7]（2018）在《小麦Glu-B1x7沉默基因序列分析及对加工品质的影响》一文中研究指出小麦籽粒高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)Glu-B1x7与加工品质密切相关。本研究创制了以宁麦9号为背景的Glu-B1x7亚基缺失系,克隆并分析Glu-B1x基因,评价该基因对弱筋小麦加工品质的影响。结果表明,该基因编码区第514位发生了C/G到T/A转换,相应的第514、第515和第516位碱基组成的叁联密码子由CAA替换为终止密码子TAA。与野生型宁麦9号相比,具有Glu-B1x7亚基缺失的品系籽粒硬度和蛋白质含量无显着变化,水溶剂保持力和乳酸溶剂保持力均降低,部分品系降低幅度达显着水平。HMW-GS总量和高分子量谷蛋白/低分子量谷蛋白比显着降低,和面仪和面时间显着降低,糖酥饼干直径显着增加。Glu-B1x7基因沉默在宁麦9号背景下可提高弱筋小麦加工品质,该等位变异可用于优质弱筋小麦培育。(本文来源于《核农学报》期刊2018年04期）
李晓霞[8]（2017）在《生防链霉菌Act12中沉默基因簇的激活与产物鉴定》一文中研究指出生防链霉菌Act12是从自青藏高原分离获得的一株多效放线菌,前期的科学研究表明该菌株具有多种良好的生物活性,例如抑制病原真菌的生长,促进草莓、甜瓜和棉花等多种农作物的生长等。通过对该菌株进行全基因组测序并提交antiSMASH在线分析发现Act12基因组中可能含有丰富的次级代谢产物生物合成基因簇,然而,对实验室条件下Act12的发酵液进行检测发现该菌株含有的次级代谢产物的含量及种类都较少,这表明Act12中绝大多数基因簇是沉默的或低表达的。为了激活Act12中的沉默基因簇,挖掘该菌株中可能的活性产物资源,并进一步探究相关的活性机理,我们通过同源重组的方法构建了Act12的四株可稳定遗传的突变株,包括可能的LuxR家族调控因子SPA4754的缺失突变株Δspa4754、可能的TetR家族调控因子SPA0520的缺失突变株Δspa0520、全局性调控基因nsdA的缺失突变株ΔnsdA和全局性调控基因bldA的缺失突变株ΔbldA。通过病原微生物拮抗活性实验以及比较代谢图谱学分析后发现:缺失突变菌株Δspa0520对几类病原供试菌的抑制活性较野生型菌株Act12的活性显着增强。HPLC的代谢图谱学分析结果表明,突变株Δspa0520的发酵产物中较野生型Act12出现一显着差异峰。对突变株Δspa0520进行大量发酵,纯化显着差异峰所对应的化合物,通过高分辨质谱分析等手段对目的化合物进行初步的结构分析及鉴定,最终分析得出该化合物为寡霉素D。同时,对突变株Δspa0520进行遗传互补实验获得相应的遗传互补菌株Δspa0520C,并检测其对病原微生物拮抗活性以及比较代谢图谱学分析,结果发现:遗传互补菌株Δspa0520C对几类病原供试菌的抑制活性及其HPLC代谢图谱与野生型Act12保持一致。缺失突变菌株Δspa0520的相关实验结果表明spa0520(GenBank Accession No.KY368145)可能是寡霉素D生物合成途径中的负调控基因,也可能具有多效调控作用,这为研究有关链霉菌Act12的其它次级代谢产物的调控机理提供了帮助,同时采用敲除负调控基因的方法为激活相关的沉默基因簇提供了有益的借鉴。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2017-05-01）
黎俊鸿[9]（2017）在《siRNA沉默基因FLJ37396和TTC6对人肝癌细胞Huh7增殖及侵袭能力的影响》一文中研究指出目的通过对比原发性肝癌原发灶与门静脉癌栓样本的基因差异,筛选出癌栓中高表达的特异性基因,利用RNA干扰、CCK8、Transwell等技术进一步探讨筛选出的目的基因的生物学功能和在肝癌进展、转移中的作用机制。方法结合临床,利用早期收集的10例原发性肝癌伴门静脉癌栓样本,通过Illumina高通量测序技术,筛选出门静脉癌栓较原发灶中表达明显上调的基因,运用NCBI BLAST对比结果报告分析系统,根据Score、E Value、Identities等挑选出最具特异性的目的基因FLJ37396和TTC6。通过QPCR技术检测正常细胞L-O2(NC)和普通肝癌细胞hep G2、叁株高转移潜能的肝癌细胞huh7、MHCC97H、HCCLM3共五组细胞中两种目的基因的表达情况,分别设计合成靶基因的干扰RNA,转染至五组细胞样本,再用QPCR技术检测转染后细胞样本中靶基因的表达量,用CCK8检测细胞增殖情况,用Transwell检测细胞的迁移、侵袭情况,并与转染前作对比分析。结果1、10例肝癌伴门静脉癌栓样本经Illumina测序,筛选出10个在癌栓中表达较原发灶明显上调的特异性基因,其转录本ID分别是Novel Tr_536、Novel Tr_150、Novel Tr_1258、Novel Tr_1259、Novel Tr_1257、Novel Tr_298、Novel Tr_574、Novel Tr_590、Novel Tr_213、Novel Tr_1266。2、10个转录本分别通过NCBI BLAST对比结果报告分析系统比对(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PROGRAM=blastn&PAGE_TYPE=Blast Se arch&LINK_LOC=blasthome),转录本对应所翻译的蛋白质名称分别为:(1)Novel Tr_536 Transmembrane protein FLJ37396 isoform X11(2)Novel Tr_150 Homo sapiens uncharacterized LOC105369364(LOC105369364)(3)Novel Tr_1258 Homo sapiens chromosome X open reading frame 49-like(LOC101059915)(4)Homo sapiens chromosome X open reading frame 49-like(LOC101059915)(5)Novel Tr_1257 Homo sapiens chromosome X open reading frame 49-like(LOC101059915)(6)Novel Tr_298 Homo sapiens neurofibromin 1(NF1)(7)Novel Tr_574 Homo sapiens gamma-aminobutyric acid type B receptor subunit 1(GABBR1)(8)Novel Tr_590 Homo sapiens chromosome 3,GRCh38.p7 Primary Assembly(9)Novel Tr_213 Homo sapiens tetratricopeptide repeat domain 6(TTC6)(10)Novel Tr_1266 Homo sapiens glycerol kinase(GK)。3、根据转录本的编码能力分值(大于9.5)、长度(1000-2500bp)、翻译产物等条件筛选,排除Novel_Tr150(非编码转录本)、Novel_Tr1258(长度4476bp)、Novel_Tr1259(长度4204bp)、Novel_Tr1257(长度4721bp)、Novel_Tr590(长度8031)、Novel_Tr298(翻译产物为神经纤维瘤相关蛋白)、Novel_Tr574(翻译产物为γ-氨基丁酸B1型受体)、Novel_Tr1266(翻译产物为甘油激酶)。Novel_Tr536编码能力分值14.09,长度1567bp,翻译产物跨膜蛋白FLJ37396,Novel_Tr214编码能力分值9.65,长度1057bp,翻译产物TTC6。两者均符合条件,并具有未明确的生物学功能,且存在潜在影响细胞增殖、迁移、侵袭的能力,因此选取二者作进一步实验探讨。4、对L-O2、hep G2、huh7、MHCC97H、HCCLM3五组细胞样本进行QPCR检测,设定正常肝细胞组L-O2中基因FLJ37396表达量为1,则肝癌细胞组hep G2表达量为1.74,高转移潜能的肝癌细胞huh7、MHCC97H、HCCLM3表达量分别为55.38、9.32、4.31;设定正常肝细胞组L-O2中基因TTC6表达量为1,则hep G2中表达量为1.36,而huh7、MHCC97H、HCCLM3中表达量分别为36.43、5.11、3.85。两者表达量均在huh7细胞株中升高最为明显,因此选取huh7细胞株进行后续RNA干扰实验。5、对NC细胞、空细胞huh7、叁株转染后huh7细胞组si RNA-1、si RNA-2、si RNA-3共五组细胞样本进行QPCR检测,并设定NC细胞对照组中基因FLJ37396表达量为1,则空细胞对照组中目的基因表达量为1.04,叁株转染si RNA细胞实验组si RNA-1、si RNA-2、si RNA-3目的基因表达量分别为1.92、0.35、0.043。根据转染后基因表达量的结果说明,si RNA-1组目的基因表达量较转染前明显升高,干扰效果不理想,考虑靶点1未能有效敲减目的基因表达,可能与靶点1处于非编码区或si RNA-1设计不佳等相关;而si RNA-2、si RNA-3两组目的基因表达量均较转染前明显下降,分别为转染前0.35倍和0.043倍,达到预期干扰效果,其中靶点3干扰效果最佳,可以有效地敲减huh7细胞中FLJ37396的表达,效率达95%以上,因此选取靶点3进行后续对比实验。6、对NC细胞、空细胞huh7、叁株转染后huh7细胞组si RNA-1、si RNA-2、si RNA-3共五组细胞样本进行QPCR检测,设定NC细胞对照组中基因TTC6表达量为1,则空细胞对照组目的基因表达量为0.65,叁株转染si RNA细胞实验组si RNA-1、si RNA-2、si RNA-3目的基因表达量分别为1.29、0.12、1.23。根据转染后基因表达量的结果可以说明,si RNA-1、si RNA-3两组目的基因表达量较转染前稍有升高,干扰效果不理想,靶点1和靶点3未能有效敲减目的基因表达,可能与靶点处于非编码区或si RNA设计不佳等相关;而si RNA-2组目的基因表达量较转染前明显下降,为转染前0.12倍,可以有效地敲减huh7细胞中TTC6的表达,效率达85%以上,因此选取靶点2进行后续对比实验。7、对照组huh7和叁组转染实验组si RNA-NC、si RNA-FLJ37396、si RNA-TTC6分别进行CCK-8实验,酶标仪读取待测样品和空白对照在450nm处的OD值。第一天,空白对照组、si RNA-NC、si RNA-FLJ37396、si RNA-TTC6的OD值分别是0.147、0.133、0.142、0.145,第二天各组OD值分别是0.434、0.391、0.487、0.280,第叁天各组的OD值分别是0.630、0.602、0.733、0.434。根据OD值结果显示,干扰基因TTC6的表达明显抑制了huh7细胞的增殖,而干扰基因FLJ37396的表达反而促进huh7细胞的增殖。8、对照组huh7和叁组转染实验组si RNA-NC、si RNA-FLJ37396、si RNA-TTC6分别进行Transwell迁移和侵袭实验,酶标仪读取待测样品和空白对照在570nm处的吸光值,然后根据OD值计算细胞的迁移和侵袭能力。Transwell迁移实验中,空白对照组、si RNA-NC、si RNA-FLJ37396、si RNA-TTC6的OD值分别是0.260、0.235、0.173、0.153;Transwell侵袭实验中,空白对照组、si RNA-NC、si RNA-FLJ37396、si RNA-TTC6的OD值分别是0.221、0.206、0.170、0.151。根据OD值结果显示,干扰基因TTC6的表达抑制了huh7细胞的迁移和侵袭,干扰基因FLJ37396的表达同样能抑制huh7细胞的迁移和侵袭。结论1、根据10例临床肝癌伴门静脉癌栓样本筛选出10个在癌栓中表达较原发灶明显上调的特异性基因,其中2个基因的转录本Novel_Tr536、Novel_Tr214编码能力分值较高,长度适中,翻译蛋白产物FLJ37396、TTC6具有未明确的生物学功能,且存在潜在影响细胞增殖、迁移、侵袭的能力,具有较高的深入研究价值。2、FLJ37396是一种跨膜蛋白,其中多种FLJ结构蛋白已证实对不同肿瘤细胞的生长有影响,因此推断FLJ37396很可能与肝癌的转移等相关,但该蛋白的编码序列在官方没有明确的信息,即编码的蛋白在人的转录基因组中没有存在定论,也就是说现在还没有确认此基因编码的蛋白在人基因组中的完整序列。3、TTC6即叁四氨基酸重复域6基序,包含TPR结构,TPR结构域是一种独特的、完全由螺旋结构组成的结构域。在高等生物基因组中,TPR结构蛋白是蛋白与蛋白间相互作用的常见媒介,是一类重要的分子伴侣。另外,热休克蛋白(heat shock protein)是另一类重要的分子伴侣,大量研究表明TPR蛋白能与HSP70/90等热休克蛋白结合,调节蛋白质构象、活性、胞内定位、水解等涉及细胞生长、分化的过程,从而实现对细胞周期、细胞凋亡、细胞活力的影响,因此TTC6很可能与肝癌的发展、转移相关联。4、根据五组细胞样本QPCR检测实验结果显示,FLJ37396和TTC6在普通肝癌细胞组hep G2中的表达量相对正常肝细胞组L-O2的表达量相差不大,而在MHCC97H,huh7以及HCCLM3叁株高转移潜能的肝癌细胞株中的表达量有显着升高,提示FLJ37396和TTC6可能与肝癌的进展、转移以及门静脉癌栓的形成呈正相关。5、Huh7细胞在不同的si RNA终浓度条件下转染率各有不同,经不同浓度转染探索后,得出转染效率最高的终浓度为30n M,转染率达95%以上。6、基因FLJ37396和TTC6分别有多个不同的RNA干扰靶点,两者均能找到有效干扰靶点,经干扰后基因表达量敲减均达90%以上;另一方面,部分靶点经干扰后基因表达量反而明显增加,可能与靶点处于非编码区或si RNA-1设计不佳等相关。这表明RNA干扰的多变性和基因沉默机制的复杂性。7、CCK-8实验结果显示,干扰基因TTC6的表达明显抑制huh7细胞的增殖,这进一步表明基因TTC6能促进肝癌细胞的增殖;而干扰基因FLJ37396的表达反而促进huh7细胞的增殖,因此基因FLJ37396可能抑制肝癌细胞的增殖,也可能通过其他途径增强肝癌细胞的转移、侵袭能力。8、Transwell迁移实验和侵袭实验结果显示,干扰基因TTC6和基因FLJ37396均能抑制huh7细胞的迁移和侵袭,这进一步表明了两个靶基因促进了肝癌细胞的转移、侵袭能力。总之,本实验收集了10个门静脉癌栓及肝细胞癌原发灶临床标本,采用Illumina高通量测序技术,筛选出了癌栓较肝癌中10个明显上调的基因,根据NCBI的BLAST系统,挑选出了其中两个符合相关要求的特异性基因FLJ37396和TTC6。通过QPCR,检测正常肝细胞、肝癌细胞、包括huh7在内的叁株高转移潜能的肝癌细胞中的两种基因表达,结果均在huh7细胞中表达最高。以huh7细胞为载体,通过si RNA分别沉默两种基因以干扰它们的表达,并通过CCK-8实验检测基因沉默细胞的增殖、Transwell实验检测该细胞的迁移和侵袭能力。结果证明,基因TTC6能促进肝癌细胞的增殖、TTC6和FLJ37396能促进肝癌细胞的迁移和侵袭。提示,此两种基因与肝癌转移有关,抑制相应基因或蛋白表达可能为肝癌转移的有效防治提供新的靶点。(本文来源于《广州医科大学》期刊2017-05-01）
唐琳[10]（2017）在《轻轻一喷,沉默基因!》一文中研究指出不喜欢院子里玫瑰花的颜色?一种即将上市的"神奇喷剂"能通过基因沉默技术改变花朵的颜色,带给你意想不到的惊喜。觉得院子里玫瑰花的颜色不称心吗?重新栽种未免太过"劳民伤财"。或许有一天你能够在市场上买到一种喷剂,只需对着花朵轻轻一喷,就可以通过使特定的基因沉默继而改变花朵的颜色。这种神奇的喷剂对于农民来说才可谓是"福音"。通过使用类似的(本文来源于《科学新闻》期刊2017年03期）
沉默基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
RNA干扰是由双链小RNA介导的基因沉默现象,已成为一个被广泛应用的反向遗传学研究技术。为了让学生更好地理解该技术,本实验教学让学生自己选择靶基因,设计小干扰RNA和引物,然后检测小干扰RNA介导的基因沉默效果。以2018年第五组为例,该组挑选了小鼠长链脂酰辅酶A合成酶1 (acyl-CoA synthetase long-chain family member 1, Acsl1)为靶基因,设计了两对特异性靶向Acsl1 mRNA的小干扰RNA,通过电穿孔的方式将其转染到3T3-L1中,然后提取细胞总RNA和合成cDNA,最后用相对定量PCR检测mRNA的表达量。结果显示两对小干扰RNA都有60%以上的沉默效果。近3年内,大约83%的学生都能独立完成所有实验并最终成功筛选到至少一对有效的小干扰RNA。该教学实践增强了学生对RNA干扰原理和实验的理解,锻炼了学生的实验与科研能力。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
沉默基因论文参考文献
[1].李善仁,郑永标,杜良成,黄建忠.溶杆菌中沉默基因簇的激活及其天然产物发现研究[C].华东六省一市生物化学与分子生物学会联盟2019年学术与教学交流会摘要集.2019
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[9].黎俊鸿.siRNA沉默基因FLJ37396和TTC6对人肝癌细胞Huh7增殖及侵袭能力的影响[D].广州医科大学.2017
[10].唐琳.轻轻一喷,沉默基因![J].科学新闻.2017
论文知识图
