脂多胺论文_沈盼

导读:本文包含了脂多胺论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:正电,阳离子,受体,细胞,脂质,论文,脂质体。

脂多胺论文文献综述

沈盼^[1]（2015）在《EGFR受体介导肺肿瘤靶向siRNA脂多胺修饰脂质体的体内动态与药效学评价》一文中研究指出目的：构建EGFR受体介导肺肿瘤靶向survivin siRNA和MRP1 siRNA共负载脂多胺修饰脂质体(EGFR-PEG-NCLs-siRNA),评价其制剂学性质、细胞内动态、体内组织分布以及与顺铂联合用药的抗肿瘤效果。方法：首先,通过置换和酰胺化反应合成类脂质阳离子载体材料N,N'-二油酰叁羟甲基氨基甲烷(2-氨基乙基)胺(N,N'-dioleoyl tris (2-aminoethyl) amine, NDOA),并合成聚乙二醇(PEG)马来酸嫁接二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DEPE)。通过硅胶薄层色谱法(TLC)、傅里叶红外光谱法(FT-IR)和核磁共振法(1H-NMR)等对上述合成产物进行结构验证。采用乙醇注入法制备阳离子脂质体,并测定其粒径,Zeta电位和FAM-siRNA的包封率。以人源非小细胞肺腺癌A549细胞和耐顺铂株A549/DDP细胞为模型,以MTT法考察空白长循环阳离子脂质体(PEG-NCLs)对A549与A549/DDP细胞的安全性。采用流式细胞仪(Flow Cytometry, FCM)和激光共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope, CLSM)考察A549/DDP细胞对EGFR-PEG-NCLs的摄取及其从A549/DDP细胞溶酶体中的逃逸。采用FCM考察EGFR-PEG-NCLs-survivin siRNA对A549/DDP细胞的凋亡。采用荧光实时定量PCR(RT-PCR)考察EGFR-PEG-NCLs-survivin/MRP1 siRNA对A549细胞的基因沉默。喷雾冷冻干燥法将脂质体制成微粉供肺部干粉吸入给药。以带绿色荧光的人源性肺腺癌细胞株Luc-A549建立裸鼠原位肺癌模型,用小动物活体成像仪考察负载siRNA的脂质体通过肺部吸入与尾静脉注射给药时在体内各组织器官分布情况；并考察负载survivin siRNA和MRP1 siRNA的脂质体与顺铂联用时抑制肿瘤生长的效果。最后,通过苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining, H&E)考察给药对各组织器官的影响。结果：经TLC,1H-NMR和FT-IR法验证了阳离子载体材料NDOA的成功制备,其纯度为87%；DSPE-PEG2000-Mal经TLC和1H-NMR法验证产物合成,其纯度为86.2%。PEG-NCLs的粒径为(193.2±3.4)nm,Zeta-电位为(7.9 ± 0.1)mV, FAM-siRNA的包封率为(91.9±0.8)%。TEM图结果显示,所制得脂质体粒度均匀,颗粒圆整,分散性良好。摄取结果表明,EGFR靶向可以明显提高A549/DDP细胞对PEG-NCLs的摄取能力,其摄取能力是未经EGFR修饰的1.4倍。CLSM结果显示,EGFR-PEG-NCLs-siRNA可从A549/DDP细胞的溶酶体中成功逃逸EGFR-PEG-NCLs-survivin siRNA组的凋亡率为(41.14±1.68)%,约为Lipofectamine-2000组(19.86±1.30)%的2倍。EGFR-PEG-NCLs-survivin siRNA的基因沉默率为(96.7±1.2)%,EGFR-PEG-NCLs-MRP1 siRNA的基因沉默率为(50.0±16.1)%,均有良好的基因沉默效果。此外,EGFR-PEG-NCLs-survivin siRNA和EGFR-PEG-NCLs-MRP1 siRNA转染进A549细胞后,A549细胞对顺铂的敏感性提高。体内组织分布结果显示,脂质体通过肺部吸入相对于尾静脉注射在肺部停留时间久,并且靶向性较好。抑瘤实验结果表明,顺铂(DDP)与EGFR-PEG-NCLs-survivin siRNA与EGFR-PEG-NCLs-MRP1 siRNA联合给药具有明显的抑制肿瘤生长的作用。H&E染色结果表明,DDP与EGFR-PEG-NCLs-survivin siRNA与EGFR-PEG-NCLs-MRP1 siRNA联合给药对肿瘤的杀伤能力最强,且不会对各组织器官造成损伤,安全性较好。结论：本文制备的EGFR受体介导肺肿瘤靶向siRNA脂多修饰脂质体(EGFR-PEG-NCLs-siRNA)粒径均一,颗粒圆整,分散性和稳定性较好,EGFR靶向显着提高细胞摄取率,并且可以成功的从溶酶体中逃逸出来。它能很好地转运siRNA,与顺铂联合用药可以发挥良好的体内外杀伤非小细胞肺癌A549细胞作用。(本文来源于《苏州大学》期刊2015-05-01）

林莹^[2]（2014）在《EGFR受体介导肺肿瘤靶向siRNA脂多胺修饰脂质体的制备与评价》一文中研究指出目的：旨在构建EGFR靶向负载Survivin-siRNA的Staramine修饰的阳离子脂质体(EGFR-PEG-SCLs-siRNA)，对其进行制剂学评价，考察其细胞毒性、靶向性、体外摄取、摄取机制以及体外药效学评价，并筛选出沉默效率最高的siRNA链等前期工作，为后续制成干粉吸入剂用于肺部给药、发挥药效提供实验依据。方法：本文通过油酰氯成酯后，发生酰胺反应得到类脂质载体Staramine。另外，在纳米载体外，进行PEG修饰，最后通过TLC、1H-NMR、 FT-IR等手段对各产物进行结构表征。Western blot法筛选出最高沉默效率的Survivin-siRNA链。采用乙醇注入法制备脂质体，静电吸附负载siRNA。通过对其粒径、Zeta电位、包封率、抗RNase酶稳定性的评价对脂质体进行表征和评价。体外评价以高表达Survivin的人源性肺腺癌耐顺铂株A549/DDP细胞为模型，以MTT法评价载体安全性，原子力显微镜观察细胞对脂质体的摄取作用。以市售制剂Lipofectamine-2000作为阳性对照，采用流式细胞仪考察脂质体的摄取，摄取机制，以及细胞凋亡实验用于评价体外药效。结果：类脂质载体Staramine经TLC、FT-IR、1H-NMR等手段验证产物合成，经1H-NMR计算纯度为87%，DSPE-PEG2000-Mal经TLC和1H-NMR手段验证产物合成，经1H-NMR计算纯度为86.2%。Western blot法筛选出最高沉默效率为38.40%的Survivin-siRNA链的。所制备的Staramine修饰的阳离子脂质体平均粒径为(172.7±6.6)nm、Zeta-电位为(+7.78±0.5) mV、包封率为（90.8±0.8）%，粒度均一，且对RNase酶有较好的保护作用。原子力显微镜观察A549/DDP细胞通过内吞作用摄取脂质体，流式细胞仪结果表明，EGFR靶向显着性（p＜0.05）提高细胞摄取，其平均荧光强度是EGFR未修饰的1.4倍。摄取机制结果表明，细胞摄取脂质体是一个能量依赖的过程，主要通过网格蛋白以及小窝蛋白介导的内吞。细胞凋亡的实验结果表明，EGFR-PEG-SCLs-siRNA组的凋亡率为（41.19±1.83）%，明显高于Lipofectamine-2000组的（21.03±1.37）%。结论：本文制备的EGFR靶向负载Survivin-siRNA的Staramine修饰的阳离子脂质体(EGFR-PEG-SCLs-siRNA)粒径均一稳定，EGFR靶向显着提高细胞摄取率。网格蛋白和小窝蛋白介导的内吞为主要内吞途径。它能很好地转运siRNA,发挥Survivin-siRNA的体外促凋亡作用。(本文来源于《苏州大学》期刊2014-05-01）

脂多胺论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

目的：旨在构建EGFR靶向负载Survivin-siRNA的Staramine修饰的阳离子脂质体(EGFR-PEG-SCLs-siRNA)，对其进行制剂学评价，考察其细胞毒性、靶向性、体外摄取、摄取机制以及体外药效学评价，并筛选出沉默效率最高的siRNA链等前期工作，为后续制成干粉吸入剂用于肺部给药、发挥药效提供实验依据。方法：本文通过油酰氯成酯后，发生酰胺反应得到类脂质载体Staramine。另外，在纳米载体外，进行PEG修饰，最后通过TLC、1H-NMR、 FT-IR等手段对各产物进行结构表征。Western blot法筛选出最高沉默效率的Survivin-siRNA链。采用乙醇注入法制备脂质体，静电吸附负载siRNA。通过对其粒径、Zeta电位、包封率、抗RNase酶稳定性的评价对脂质体进行表征和评价。体外评价以高表达Survivin的人源性肺腺癌耐顺铂株A549/DDP细胞为模型，以MTT法评价载体安全性，原子力显微镜观察细胞对脂质体的摄取作用。以市售制剂Lipofectamine-2000作为阳性对照，采用流式细胞仪考察脂质体的摄取，摄取机制，以及细胞凋亡实验用于评价体外药效。结果：类脂质载体Staramine经TLC、FT-IR、1H-NMR等手段验证产物合成，经1H-NMR计算纯度为87%，DSPE-PEG2000-Mal经TLC和1H-NMR手段验证产物合成，经1H-NMR计算纯度为86.2%。Western blot法筛选出最高沉默效率为38.40%的Survivin-siRNA链的。所制备的Staramine修饰的阳离子脂质体平均粒径为(172.7±6.6)nm、Zeta-电位为(+7.78±0.5) mV、包封率为（90.8±0.8）%，粒度均一，且对RNase酶有较好的保护作用。原子力显微镜观察A549/DDP细胞通过内吞作用摄取脂质体，流式细胞仪结果表明，EGFR靶向显着性（p＜0.05）提高细胞摄取，其平均荧光强度是EGFR未修饰的1.4倍。摄取机制结果表明，细胞摄取脂质体是一个能量依赖的过程，主要通过网格蛋白以及小窝蛋白介导的内吞。细胞凋亡的实验结果表明，EGFR-PEG-SCLs-siRNA组的凋亡率为（41.19±1.83）%，明显高于Lipofectamine-2000组的（21.03±1.37）%。结论：本文制备的EGFR靶向负载Survivin-siRNA的Staramine修饰的阳离子脂质体(EGFR-PEG-SCLs-siRNA)粒径均一稳定，EGFR靶向显着提高细胞摄取率。网格蛋白和小窝蛋白介导的内吞为主要内吞途径。它能很好地转运siRNA,发挥Survivin-siRNA的体外促凋亡作用。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。