导读:本文包含了体外药效学论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:黑木耳黑色素,酒精肝损伤,L02肝细胞,协同提取
体外药效学论文文献综述
侯若琳[1]（2019）在《黑木耳黑色素对酒精肝损伤的体内、体外药效学研究》一文中研究指出肝脏是酒精代谢的主要器官,酒精代谢过程中会产生大量有害物质,造成肝脏损伤。从食药用菌中寻找天然活性物质是预防和治疗酒精肝损伤的一个研究热点。黑木耳是我国传统的食药用菌,具有丰富的营养价值和多种生物活性。黑木耳中含有大量的黑色素,然而关于黑木耳黑色素的体内生物活性研究却鲜有报道,这在很大程度上限制了这种天然色素的应用。为促进黑木耳黑色素的开发利用,本文对黑木耳黑色素进行了鉴定并探究了其纤维素酶-超声波协同提取工艺,通过体外细胞实验和体内动物实验,探究了黑木耳黑色素对酒精肝损伤的干预作用及初步药理作用机制。本文具体研究内容及结果如下:(1)通过紫外-可见光谱、红外光谱、元素分析、凝胶渗透色谱、以及核磁共振氢谱对黑木耳黑色素进行结构表征,在此基础上,探究了黑木耳黑色素的纤维素酶-超声波协同提取工艺。结果表明,黑木耳黑色素属于真黑色素,平均分子量为48.99 kDa,最大吸收波长在215 nm,分子中具有吲哚结构,符合黑色素的典型特征。纤维素酶-超声波协同提取法可显着提高黑木耳黑色素提取率,在最优条件下,黑色素提取得率可达到10.48%,相比传统的浸提法提取率提高了46.98%。(2)在细胞水平上探究黑木耳黑色素对酒精肝损伤的干预作用,采用MTT法检测细胞活力,并通过测定细胞内活性氧(ROS)水平和GSH(还原型谷胱甘肽)/GSSG(氧化型谷胱甘肽)比值分析黑木耳黑色素对酒精引起的L02肝细胞氧化应激的影响。实验结果表明,黑木耳黑色素能显着提高酒精预处理的L02肝细胞的存活率(p<0.01),还能够改善细胞形态,降低细胞内ROS水平(p<0.01),提高GSH/GSSG比值(p<0.01)。(3)通过动物实验进一步对黑木耳黑色素干预酒精肝损伤的作用进行研究。采用灌胃的方式给予小鼠酒精,建立肝损伤模型,通过血清与肝功能指标的检测、病理切片的观察、以及测定相关抗氧化酶mRNA的表达来评价黑木耳黑色素对酒精肝损伤的治疗和预防效果。实验结果表明黑木耳黑色素对小鼠酒精肝损伤具有良好的预防和治疗作用,能够显着降低小鼠ALT、AST和MDA水平,提高ADH、SOD、CAT水平(p<0.01);黑木耳黑色素还能够明显改善酒精引起的小鼠肝组织的形态学改变;荧光定量PCR实验结果表明,黑木耳黑色素能够上调Nrf2及其下游的抗氧化酶mRNA的表达(p<0.01)。本文明确了黑木耳黑色素对小鼠酒精肝损伤的治疗与预防作用及其初步药理作用机制,丰富了黑木耳黑色素的药理药效,为其相关产品的开发提供了新思路,同时本研究还为黑木耳黑色素的高效提取提供了新方法。(本文来源于《福建农林大学》期刊2019-04-01）
田露露,包永睿,王帅,李天娇,刘金瑛[2]（2019）在《中药仙鹤草不同药用部位的体外药效学研究》一文中研究指出目的:研究仙鹤草药材不同药用部位的体外抗氧化、抗肿瘤、抗凝血活性,为生药不同部位的合理应用奠定实验基础。方法:采用HPLC色谱法建立仙鹤草不同药用部位的指纹图谱;采用MTT比色法研究仙鹤草不同药用部位对人肝癌细胞株HepG2细胞、人胃癌细胞株HGC-27细胞、人结肠癌细胞株Caco-2细胞增殖作用的影响;采用2,2'-联氮-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法、1,1-二苯基-2-叁硝基苯肼(DPPH)法检测仙鹤草不同药用部位的抗氧化能力;采用ELISA法测定仙鹤草不同药用部位对小鼠凝血酶原(PT)指标的影响。结果:仙鹤草不同药用部位的指纹图谱之间存在明显差异,根、茎、叶、花均显示不同程度抗肿瘤、抗氧化、抗凝血药效,其中茎对HepG2、HGC-27、Caco-2叁种癌细胞株的增殖抑制作用强于根、叶、花;叶、花清除DPPH、ABTS自由基的能力强于根、茎;茎、叶降低小鼠血浆凝血酶原水平的能力强于根、花。结论:仙鹤草不同药用部位的抗氧化、抗肿瘤、抗凝血药效存在差异,为仙鹤草药材以药效为导向的不同药用部位的合理使用提供实验依据,为生药不同部位的精准应用奠定实验基础。(本文来源于《世界科学技术-中医药现代化》期刊2019年03期）
程平[3]（2018）在《黏菌素对猪源大肠杆菌野生型折点与体外药效学研究》一文中研究指出抗菌药物敏感性判定标准(折点)可为检测病原菌耐药性,确定耐药率、耐药水平提供关键的解释标准。折点包括:野生型折点(CO_(WT))、临床折点(CO_(CL))以及药代动力学/药效学折点(CO_(PD))。目前被广泛认可的制定折点的组织机构有:美国临床实验室标准化研究所(CLSI)和欧洲抗菌药物敏感性试验委员会(EUCAST)。我国尚未设立折点制定机构,因此在实际应用中只能参考国外制定的折点标准。实际上我国兽医临床的用药模式、细菌的耐药水平及耐药程度与国外的并不完全一致,因此,迫切需要建立符合我国自身情况的判定标准。大肠杆菌是黏菌素的靶细菌之一,而黏菌素对大肠杆菌的体外药效学数据相对比较匮乏,这些数据是制定黏菌素对大肠杆菌折点的重要依据。CO_(WT)或流行病学折点(Ecoff)作为细菌耐药性表型监测的判定标准,在最终折点没有建立之前,对细菌耐药性的发现和发展能起到预警作用。mcr-1是近年来发现的由质粒介导的编码黏菌素耐药性的基因,ISApl1序列的存在有利于mcr-1的转移及捕获其它可移动元件,因此,分析mcr-1在黏菌素耐药性中的作用对于进一步研究其分子耐药机制及其耐药性的防控有重要的意义。本研究通过采集我国主要省市规模化养猪场的猪肛门拭子,经实验室培养、分离、纯化和鉴定,最后成功分离出1222株猪源大肠杆菌。采用微量肉汤稀释法,测定黏菌素对猪源大肠杆菌临床分离株的最小抑菌浓度(MIC);采用体外药效学试验方法研究黏菌素对致病性猪源大肠杆菌的最小杀菌浓度(MBC)、抗菌后效应(PAE)、最小防突变浓度(MPC)和突变选择窗(MSW)。结果表明,黏菌素对猪源大肠杆菌为杀菌型抗菌药(MBC=1~4MIC),具有体外PAE,且MSW较宽。药敏结果表明,目前我国猪源大肠杆菌对黏菌素的敏感性偏低,耐药问题较严重,通过绘制黏菌素对这些菌株的MIC值分布直方图,运用统计学方法确定黏菌素对猪源大肠杆菌的CO_(WT)/Ecoff为16μg/mL。本研究选择从河南地区筛选出的56株黏菌素耐药菌株(MIC≥8μg/mL),对其耐药性产生与转移的可能性等进一步分析。首先采用PCR方法检测介导黏菌素耐药的mcr-1基因,其中有35株(62.50%)黏菌素耐药菌扩增出mcr-1基因。采用PCR-mapping方法对上述35株阳性菌mcr-1周围的环境进行分析,探讨其转移的能力及其捕获其它可移动元件的可能性。共检测出叁种不同的基因环境,20株大肠杆菌在mcr-1上下游均存在ISApl1序列,7株只在mcr-1的上游有ISApl1序列,8株在mcr-1周围未发现ISApl1序列。采用药敏纸片法检测mcr-1阳性大肠杆菌的耐药表型,结果表明,这些菌株耐药谱较广,同时我们还扩增出其他耐药基因,如:NDM-1、CTX-M-15、AAC(3)-IV、Ant(3″)-I和AAC(3)-II,与其耐药表型基本一致。综上所述,目前我国猪源大肠杆菌对黏菌素敏感率偏低,耐药问题较严重,在黏菌素耐药菌株中介导黏菌素耐药的mcr-1基因检出率较高,同时在mcr-1阳性菌株中还发现与其他耐药基因共存的现象,确定黏菌素对猪源大肠杆菌的CO_(WT)/Ecoff为16μg/mL。(本文来源于《东北农业大学》期刊2018-06-01）
王申森[4]（2018）在《达氟沙星对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的体外药效学研究》一文中研究指出临床使用抗生素治疗畜禽细菌和支原体等感染疾病有良好的效果。但是随着抗生素使用范围的扩大,不合理和无节制的滥用抗生素而导致的抗生素耐药性问题也日益严重。不仅使微生物产生耐药性突变导致抗生素的治疗效果减弱,给养殖业带来损失,同时耐药性基因也可能通过接触和食品等途径传播,危害动物和人类健康。目前国内外已开展关于抗生素耐药性控制的研究,其中工作重点是进行抗生素体内外药效学、药动学研究,综合试验参数制定流行病学折点、PK/PD折点和临床折点。猪传染性胸膜肺炎在世界各地广泛分布,该病发病急、病程短、死亡率高,已经成为现代养猪业危害重大的呼吸道传染病之一。该病病原菌为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。传染性胸膜肺炎放线杆菌为放线杆菌属多形球杆菌,革兰氏染色呈阴性。有荚膜,有气囊,不能形成芽孢。有鞭毛,具有运动性。共有15种血清型,根据其生长时是否依赖氧化型辅酶Ⅰ,可分为生物Ⅰ型和生物Ⅱ型。达氟沙星是一种动物专用的氟喹诺酮类抗生素,具有较强的抗革兰氏阴性菌和阳性菌的作用,在低浓度也有较高的抗菌活性。因具有抗菌谱广、抗菌活性强、体内动力学性质优良等优点,在我国兽医临床应用广泛。已有药动学研究表明,动物使用达氟沙星后,药物在肺脏中富集浓度约为血液中的5~7倍,临床常用来治疗畜禽的呼吸道疾病。目前,国内外都未见达氟沙星对猪胸膜肺炎放线杆菌的折点值的报道。本论文对收集和分离到的48株猪胸膜肺炎放线杆菌,进行了达氟沙星体外敏感性测试,以制订流行病学折点,并为后期建立PK/PD折点,指导临床治疗用药,为该病的预防和控制提供理论依据。本论文主要展开以下几个方面的研究:1.猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定采集河南地区猪场疑似传染性胸膜肺炎猪病料进行病原菌分离,通过革兰氏染色、镜检、生化鉴定及PCR鉴定,分离出猪传染性胸膜肺炎放线杆菌20株。将纯化后的病原菌用8对不同引物进行PCR扩增进行血清型鉴定,确定血清1型12株,血清3型1株,血清5型4株,血清7型3株。分离鉴定方法与传统方法相比较,使用PCR鉴定方法可以提高分离速率,缩短鉴定周期,在疾病治疗时能有效减少经济损失。研究得知采集分离到的猪传染性肺炎放线杆菌血清型以血清1型为主(占60%)。在使用疫苗进行免疫猪传染性胸膜肺炎时,血清型鉴定分型对流行地区该病的防控具有重要意义。2.达氟沙星对传染性胸膜肺炎放线杆菌的体外药效学研究选择10株分离菌株进行初步药物敏感性测试,结果显示猪传染性胸膜肺炎放线杆菌对氨苄西林、磺胺异恶唑、头孢噻呋、大观霉素、黏菌素耐药率高,对阿莫西林/克拉维酸、复方新诺明、氟苯尼考、多西环素、庆大霉素、四环素、恩诺沙星、氧氟沙星、达氟沙星敏感。进一步测定48株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌对达氟沙星的药物敏感性,得到达氟沙星MIC值为0.0039μg/mL,MBC值为0.0039μg/mL。选取其中一株传染性胸膜肺炎放线杆菌(MIC值和MBC值均为0.0078μg/mL)进行生长曲线和杀菌曲线研究。结果表明,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌对达氟沙星有较强敏感性。由杀菌曲线可知,达氟沙星对胸膜肺炎放线杆菌的作用为浓度依赖型,在MIC及以上浓度时,随浓度增加杀菌效果逐渐增强。低于MIC浓度时,在一段时间内可以维持对细菌的抑制作用。临床分离得到病原菌对比之前年代菌株,对达氟沙星的药物敏感性有所下降,应加强对达氟沙星临床合理使用的规范管理和指导,延长其临床使用寿命。体外药效学数据对临床给药剂量的确定具有指导意义,同时也是折点制定的数据基础。3.达氟沙星在猪血浆中检测方法的建立使用高效液相色谱法对血浆中添加的达氟沙星含量进行测定。优化样品处理方法,建立达氟沙星在猪血浆中的工作曲线和标准曲线。高效液相色谱法定量准确,紫外检测器不仅普及率高,灵敏度也可达到检测要求。该方法可在后期进行达氟沙星在猪体内药动学的试验研究时使用。(本文来源于《中国兽医药品监察所》期刊2018-06-01）
张晓雨,唐克,郭家梅,陈勍,郭颖[5]（2018）在《沙粒病毒进入抑制剂体外药效学评价模型的建立》一文中研究指出沙粒病毒是一类有囊膜的RNA病毒。以哺乳动物为宿主的沙粒病毒(mammarenavirus)中,有9种可致人疾病,其中8种可致人出血热。拉沙病毒(Lassa virus,LASV)感染人所致拉沙出血热(Lassa hemorrhagic fever)流行范围广,有引发疾病大流行的可能,因此拉沙病毒被列为第一类病原微生物。目前针对沙粒病毒的疫苗和药物极为有限。本研究应用重组病毒技术,以HIV-1为核心,共构建了以9种沙粒病毒外壳蛋白包裹的重组病毒(arenavirus-GP/HIV-luc),在考察了它们对17株人、猴、鼠及蝙蝠的不同组织来源细胞进入水平的基础上,建立了沙粒病毒进入抑制剂药理活性评价模型,并用工具药验证。本研究建立的重组沙粒病毒进入抑制剂体外药效学评价模型特异性好,安全性高,可在生物安全二级(BSL-2)实验室进行实验,可为抗沙粒病毒药物和疫苗的活性评价提供技术平台,促进针对沙粒病毒出血热的药物及疫苗的研发。(本文来源于《药学学报》期刊2018年05期）
吴平[6]（2018）在《川乌提取物对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的体外药效学研究》一文中研究指出类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种发生在全球范围的全身性疾病,其发病率很高,难以治愈,给人类生活健康带来极大的痛苦和经济上的困难。开发类风湿关节炎的治疗药物一直是相关科研工作者和制药企业的追逐目标。目前,用于治疗类风湿关节炎的药物主要有抗炎药、抗风湿药、激素类药物、生物制剂、中药及其复方等。随着生物科技的发展,以分子靶向治疗的生物制剂成为治疗类风湿关节炎的风向标,靶向治疗也是目前众多治疗方案中效果最为显着的一种方法。本研究正是通过在体外对中药川乌的提取分离物进行一种以细胞为基础的药效学实验,可在药物开发最前期探索和发现类风湿关节炎新药物的潜在物质,尤其在分子靶向治疗方面对其进行重点考量。本论文对川乌进行超声波辅助乙醇浸渍提取川乌成分,应用单因素分析和正交实验对提取工艺进行优化,得到最优的提取方法。针对提取获得的川乌成分,采用柱层析分析技术,利用快速分离装置对川乌进行有效成分分离,获得6种不同成分。研究从川乌中探索鉴定治疗类风湿关节炎的药效成分,以风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(Rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,FLS-RA;Fibroblast-like synoviocytes,FLS)为基础,以细胞增殖和因子及蛋白表达为指标,于体外对类风湿关节炎药物进行药效学研究。此方法针对特定靶点给药,对复杂药物进行前期药效研究,既可为后续动物实验做铺垫,也为将来药物开发奠定基础。本实验以细胞增殖和细胞因子及蛋白表达为检测指标,对川乌提取分离的6种成分进行细胞药效学实验。最后得到了不同成分作用FLS-RA的不同效果,其中不乏有效果很好的药效成分,可作为药物开发的前期材料。(本文来源于《合肥工业大学》期刊2018-03-01）
杨海跃,余越,林兵,孙欣荣,刘志宏[7]（2017）在《难溶性中药增溶方法对体外药效学影响的研究进展》一文中研究指出中药是我国传统医学的重要组成部分,但部分中药存在成分复杂、水溶性差等问题,给临床前研究,尤其是体外药效学研究带来困扰。本文就目前体外药效学研究中难溶性中药或中药成分增溶方法或技术进行综述,探讨其可行性及对中药药效行为的影响。(本文来源于《中成药》期刊2017年06期）
覃乙芯[8]（2017）在《cRGD-siVEGFR2分子抑制血管生成的体外药效学研究》一文中研究指出肿瘤生长依赖于新血管生成,当肿瘤组织拥有独立的血管供应,肿瘤细胞就获得了转移扩散的能力。RNA干扰(RNA interference,RNAi)作为一项新兴技术,被广泛应用于恶性肿瘤的基因治疗研究领域。本课题设计合成cRGD-siVEGFR2分子,考察分子体外生物学功能,探讨其抑制血管生成的作用效果及作为肿瘤靶向治疗药物的可能性。方法1、原代人脐静脉内皮细胞模型的建立胶原酶消化法分离提取细胞,免疫荧光检测Ⅷ因子进行细胞鉴定,流式细胞术检测CD31含量进行纯度检测,并探索最佳的血清饥饿条件。2、cRGD-siRNA分子的合成cRGD通过linker与siRNA正义链5'端共价偶联得cRGD-siRNA分子,分别用液相色谱-质谱联用技术和反相高效液相色谱进行结构鉴定和纯度检测。3、cRGD-siVEGFR2分子体外功能研究(1)血清稳定性研究:siVEGFR2、cRGD-siVEGFR2、cRGD-siNC 分别与鼠血清混匀孵育,琼脂糖凝胶电泳后观察条带完整性。(2)细胞毒性研究:1000nM、2000nM、3000nMRPM 或 cRGD-siNC 分子转染细胞,CCK8测定细胞活力。(3)靶向沉默功能研究:100nM、500nM、800nM、1000nM cRGD-siVEGFR2、阳性对照 Lipo/siVEGFR2(100nM)、Lipo/cRGD-siVEGFR2(100nM)、阴性对照cRGD-siNC(1000nM)转染细胞,RT-PCR法和western-blot法检测分子靶向沉默效果。(4)对细胞增殖迁移的影响:100nM、500nM、800nM、1000nM cRGD-siVEGFR2、Lipo/siVEGFR2、cRGD-siNC 转染细胞,CCK8 法和 EdU 法测定细胞增殖活力,划痕实验和transwell实验测定细胞迁移能力。(5)对细胞体外成管的影响:1000nM cRGD-siVEGFR2、Lipo/siVEGFR2、cRGD-siNC转染细胞后接种于基质胶上进行细胞分化实验,观察小管形成情况。结果1、原代人脐静脉内皮细胞提取成功,细胞呈多边形,铺卵石状排列。Ⅷ因子呈阳性表达,CD31含量高为99.67%。不同血清浓度培养基饥饿培养细胞6h可得到70%左右G0/G1期细胞;12h可得80%～90%;18h、24h可得95%左右。2、cRGD-siRNA分子合成成功,其实测分子质量与理论分子质量基本一致,纯度约为80%。3、cRGD-siVEGFR2分子体外功能研究(1)血清稳定性:siVEGFR2分子24h几乎完全降解,而cRGD-siVEGFR2与cRGD-siNC分子72h仅有部分降解。(2)细胞毒性:RPM分子组O.D.值保持在1.0左右;cRGD-siNC组O.D.值保持在0.85以上,1000nM时O.D.值在1.0左右。(3)靶向沉默功能:cRGD-siVEGFR2分子可以下调VEGFR2mRNA和蛋白的表达,且其作用呈浓度依赖。(4)对细胞增殖迁移的影响:cRGD-siVEGFR2分子可呈时间和浓度依赖的抑制细胞增殖迁移。(5)对细胞体外成管的影响:HUVECs在基质胶上生长6h可形成条索状结构,生成分支,并闭合成管。cRGD-siVEGFR2分子可以有效减少管状结构形成。结论1、胶原酶消化法可收获高质量的HUVECs,无血清培养12h为最佳饥饿条件。2、cRGD通过linker与siRNA正义链5'端共价偶联,可得到纯度高、稳定性好、基本无毒的cRGD-siRNA分子。3、cRGD-siVEGFR2分子可以靶向沉默目的基因mRNA及蛋白的表达,有效抑制HUVECs的细胞增殖迁移及体外成管。(本文来源于《南方医科大学》期刊2017-05-01）
韩丽[9]（2017）在《新疆维药芹菜根抗高脂血症活性部位的制备和体外药效学研究》一文中研究指出目的:优化维药芹菜根活性部位总黄酮提取纯化工艺,对芹菜根提取物进行质量研究,通过体外药效学研究筛选抗HLP活性成分。方法:采用紫外-可见分光光度计法,以总黄酮含量为指标,优化芹菜根活性部位提取纯化工艺;采用理化鉴别方法鉴定活性部位可能含有的化学成分,应用TLC及HPLC定性定量分析芹菜根活性部位化学成分;建立体外L02和HepG2肝细胞脂肪堆积模型筛选芹菜根活性部位抗HLP的活性成分。结果:建立了以芹菜素为参照的紫外-可见分光光度计法,检测波长395nm,回收率99%~104%,确定了芹菜根活性部位提取方法为萃取法;筛选出XDA-1和D101大孔吸附树脂富集纯化芹菜根乙酸乙酯和正丁醇部位中总黄酮;理化鉴别结果表明芹菜根活性部位可能含有有机酸、皂苷、黄酮类及强心苷类化合物;TLC定性研究表明芹菜根乙酸乙酯部位中含有芹菜素、芹菜苷、3’-甲氧基芹菜苷、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,正丁醇部位中含有芹菜素、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷;HPLC测定3批芹菜根活性部位黄酮成分含量结果表明乙酸乙酯部位含量较高,不同批次芹菜根总黄酮含量具有一定差异性;体外药效学研究结果表明芹菜素、芹菜苷、3’-甲氧基芹菜苷、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对L02细胞的LD50分别为49.899、541.938、224.359、896.000μg/m L,最佳作用浓度分别为20.919、168.811、51.515、361.00μg/m L,HepG2细胞的LD50分别为64.521、430.226、302.677、961.000μg/m L;最佳作用浓度分别为12.300、139.016、94.607、377.00μg/m L。结论:芹菜根活性部位提取工艺优化及大孔吸附树脂富集纯化工艺研究能够提高总黄酮含量,建立以芹菜素测定总黄酮含量的方法准确度高,重现性好;TLC和HPLC定性定量研究可为芹菜根的质量标准研究提供参考;体外药效学研究结果初步推断芹菜素、芹菜苷、3’-甲氧基芹菜苷、芹菜根乙酸乙酯部位精制物均具明确降低肝细胞TG含量的作用,为后期的调脂机制研究提供实验依据。(本文来源于《新疆医科大学》期刊2017-03-01）
刘长青,张雄,樊宏伟[10]（2017）在《九味通窍汤对人脑胶质瘤的体外药效学研究及组方分析》一文中研究指出目的:对九味通窍汤进行组方拆分,并对各组进行体外抗脑胶质瘤药效学分析,对其体外药效学可能的作用机制进行探索,为探究全方起效的物质基础提供实验依据。方法:根据君臣佐使组合原理将九味通窍汤拆分成7个组方,选用人源脑神经胶质瘤U251细胞进行体外药效筛选,采用噻唑蓝(MTT)法测定各个组方对细胞活力的影响;采用流式细胞术比较所得体外药效最佳组方Ⅳ与全方(10,4,1 g·L~(-1))作用U251细胞24 h对细胞的凋亡影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测全方及组方Ⅳ对凋亡蛋白p53和抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)表达影响;组方Ⅳ的醇提物用石油醚、叁氯甲烷、乙酸乙酯及水饱和正丁醇梯度萃取,采用MTT法测定各萃取部位对U251细胞增殖的抑制作用。结果:组方Ⅳ对细胞的抑制作用最为明显,且具有浓度依赖性;细胞经10,4,1 g·L~(-1)组方Ⅳ,全方处理24 h后凋亡率显着高于空白组(P<0.01);细胞经4 g·L~(-1)组方Ⅳ,全方处理后Bcl-2蛋白表达水平较空白组显着降低(P<0.01),p53蛋白表达较空白组显着提高(P<0.01);组方Ⅳ梯度萃取后部位Ⅲ对细胞活力的抑制作用最为明显,且具有浓度依赖性。结论:组方Ⅳ细胞活力抑制作用明显,诱导细胞凋亡明显,并可以降低Bcl-2,并提高p53蛋白的表达;部位Ⅲ抑制脑胶质瘤细胞活力明显。(本文来源于《中国实验方剂学杂志》期刊2017年07期）
体外药效学论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:研究仙鹤草药材不同药用部位的体外抗氧化、抗肿瘤、抗凝血活性,为生药不同部位的合理应用奠定实验基础。方法:采用HPLC色谱法建立仙鹤草不同药用部位的指纹图谱;采用MTT比色法研究仙鹤草不同药用部位对人肝癌细胞株HepG2细胞、人胃癌细胞株HGC-27细胞、人结肠癌细胞株Caco-2细胞增殖作用的影响;采用2,2'-联氮-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法、1,1-二苯基-2-叁硝基苯肼(DPPH)法检测仙鹤草不同药用部位的抗氧化能力;采用ELISA法测定仙鹤草不同药用部位对小鼠凝血酶原(PT)指标的影响。结果:仙鹤草不同药用部位的指纹图谱之间存在明显差异,根、茎、叶、花均显示不同程度抗肿瘤、抗氧化、抗凝血药效,其中茎对HepG2、HGC-27、Caco-2叁种癌细胞株的增殖抑制作用强于根、叶、花;叶、花清除DPPH、ABTS自由基的能力强于根、茎;茎、叶降低小鼠血浆凝血酶原水平的能力强于根、花。结论:仙鹤草不同药用部位的抗氧化、抗肿瘤、抗凝血药效存在差异,为仙鹤草药材以药效为导向的不同药用部位的合理使用提供实验依据,为生药不同部位的精准应用奠定实验基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体外药效学论文参考文献
[1].侯若琳.黑木耳黑色素对酒精肝损伤的体内、体外药效学研究[D].福建农林大学.2019
[2].田露露,包永睿,王帅,李天娇,刘金瑛.中药仙鹤草不同药用部位的体外药效学研究[J].世界科学技术-中医药现代化.2019
[3].程平.黏菌素对猪源大肠杆菌野生型折点与体外药效学研究[D].东北农业大学.2018
[4].王申森.达氟沙星对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的体外药效学研究[D].中国兽医药品监察所.2018
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