导读:本文包含了肺间质巨噬细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:巨噬细胞,因子,间质,肾小管,转录,小鼠,抑制。
肺间质巨噬细胞论文文献综述
王倩[1]（2017）在《肾小管上皮细胞sEH介导IgA肾病肾间质巨噬细胞浸润及极化的机制研究》一文中研究指出背景和目的各种慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)常伴随不同程度的肾脏炎症。疾病早期,炎症发挥保护作用,但持续的炎症状态最终促进肾损伤,进而造成病理上的肾脏纤维化及临床上的终末期肾病(end stage renal disease,ESRD)。在细胞水平,炎细胞的招募及活化是核心。在浸润的多种炎症细胞中,巨噬细胞在调节肾脏炎症及纤维化中发挥重要作用。临床研究提示,CKD患者中,肾脏巨噬细胞浸润越多,预后越差。循环中的单核细胞在炎症信号的驱使下进入肾脏,经历不同途径分化为经典激活的M1型巨噬细胞或选择激活的M2型巨噬细胞。在持续损伤作用下,M1型巨噬细胞促进炎症,最终导致肾脏纤维化;M2型巨噬细胞发挥抗炎作用,最终修复肾脏损伤。环氧二十碳叁烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EETs)是花生四烯酸(arachidonic acid,AA)经细胞色素 P450(cytochrome P-450,CYP450)的代谢产物,在体内发挥舒张血管、促进血管再生、抗炎、抗氧化、抗血小板聚集及利钠等重要的生理学功能。EETs在可溶性表氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,sEH)作用下,降解为失活的脱氢二十碳叁烯酸(dihydroxyeicosatrienoic acids,DHETs)。因此,sEH是决定EETs生物学活性的关键分子。基因敲除或药理学阻断sEH,增加组织或血浆中EETs水平,可增加其生物学效应。研究提示,无论利用基因手段还是药理学干预sEH,增加EETs,均可发挥降压及抗炎作用,能够在糖尿病肾病、高血压肾病及单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)肾脏纤维化动物模型中预防纤维化的进展。sEH在肾间质炎细胞浸润的机制及途径尚不清楚。肾小管上皮细胞高表达sEH是否对巨噬细胞浸润及极化发挥作用,尚未见报道。在中国,IgA肾病是CKD最常见的病理类型,除了肾小球病变外,多表现为不同程度的肾小管间质炎细胞浸润。本研究将利用IgA肾病肾穿刺组织,分析sEH表达与临床及病理指标的相关性;通过体外细胞实验观察蛋白尿刺激及调控sEH表达对巨噬细胞极化的影响,探讨肾小管上皮细胞sEH表达与巨噬细胞极化的关系及其机制,为sEH抑制剂治疗肾脏慢性炎症状态及延缓纤维化进展提供干预的新靶点。研究共分两个部分:第一部分:IgA肾病肾小管sEH表达与临床及病理指标的相关性研究利用IgA肾病肾穿刺组织,进行sEH免疫组化染色,分析肾组织sEH表达与临床及病理指标的相关性;探讨肾小管上皮细胞sEH表达与巨噬细胞浸润及炎症因子分泌的相关性,为进一步探讨sEH与巨噬细胞浸润及极化作用提供临床证据。第二部分:肾小管上皮细胞sEH参与巨噬细胞极化的机制研究观察蛋白尿及调控sEH表达对肾小管上皮细胞分泌诱导巨噬细胞极化炎症因子表达的影响;用不同条件干预sEH活性的肾小管上皮细胞培养基孵育巨噬细胞,观察巨噬细胞极化的标志物及细胞转导通路关键蛋白的变化,探讨肾小管上皮细胞sEH参与巨噬细胞极化的作用及可能机制。第一部分IgA肾病肾小管sEH表达与临床及病理指标的相关性研究一、材料与方法收集我院肾内科经肾穿刺诊断为IgA肾病的肾穿刺组织标本、冰冻切片、尿液及临床病理资料共71例。冰冻切片进行sEH免疫组化染色,根据肾小管sEH染色阳性部位面积分为+～++++四组。1.收集临床数据:年龄、性别、平均动脉压、24小时尿蛋白定量及估算的肾小球滤过率(estimating glomerular filtration rate,eGFR);2.病理学数据:系膜细胞增殖、毛细血管内细胞增生、节段性肾小球硬化、肾小管萎缩/间质纤维化、肾小管间质炎细胞浸润;3.肾组织标本进行Western blot检测sEH蛋白质水平表达;4.利用ELISA试剂盒检测尿液14,15-EET/14,15-DHET评估肾组织sEH活性;5.冰冻切片进行sEH及CD68免疫荧光双染色;6.肾组织标本进行Realtime-PCR检测MCP-1、IL-6、CSF-1、TNF-αmRNA水平表达。二、结果1.IgA肾病组肾组织sEH表达及活性明显增加。应用免疫组化染色半定量及Western blot结果提示,与正常对照组相比,IgA肾病组肾小管sEH蛋白质表达明显增加(P<0.05)。随着sEH在肾小管表达的增加,14,15-EET/14,15-DHET减小,sEH活性增加(P<0.05)。2.在sEH表达程度不同的IgA肾病组四组间,平均动脉压、蛋白尿、肾间质炎细胞浸润差异具有统计学意义(P<0.05)。随着sEH表达增加,平均动脉压、蛋白尿及肾间质炎细胞浸润程度逐渐加重。3.肾小管sEH表达与平均动脉压(r=0.408)、蛋白尿(r=0.452)、肾间质炎细胞浸润(r=0.247)呈正相关(均P<0.05)。4.免疫荧光染色结果提示sEH阳性的肾小管周围存在较多CD68阳性的巨噬细胞。5.Realtime-PCR结果提示sEH低表达IgA肾病组肾组织MCP-1、IL-6、CSF-1及TNF-α mRNA明显高于正常对照组(P<0.05),sEH高表达IgA肾病组上述指标明显高于sEH低表达IgA肾病组(P<0.05)。叁、结论在IgA肾病肾组织中,肾小管sEH表达及活性明显增加;肾小管sEH表达与平均动脉压、24小时尿蛋白定量及肾间质炎细胞浸润有关;肾小管sEH表达可能促进巨噬细胞极化细胞因子表达,参与巨噬细胞浸润及极化。第二部分肾小管上皮细胞sEH参与巨噬细胞极化的机制研究一、材料与方法以人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)及小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)为研究对象。应用蛋白尿、sEH抑制剂+蛋白尿、EET+蛋白尿及sEH过表达腺病毒处理HK-2细胞。用上述不同条件处理的HK-2细胞培养基,孵育RAW264.7细胞系,IFN-y及IL-4作为诱导M1型及M2型巨噬细胞的阳性对照。Western blot检测 sEH、p65、p-p65、Akt、p-Akt 蛋白表达,Realtime-PCR 检测 MCP-1、IL-6、CSF-1、TNF-α、iNOS、Arg-1、IL-10mRNA 表达。二、结果1.与正常对照组相比,尿蛋白组HK-2细胞sEH蛋白质水平及MCP-1、IL-6、CSF-1、TNF-αmRNA水平表达明显增加(均P<0.05)。与蛋白尿组相比,sEH抑制剂尿蛋白组上述炎症因子明显减少(均P<0.05),sEH蛋白质表达无明显变化。2.与蛋白尿组相比,EET尿蛋白组MCP-1、IL-6、CSF-1及TNF-α mRNAshu水平明显减少(均P<0.05),但sEH蛋白质表达无明显变化。3.与正常对照组及GFP腺病毒组相比,sEH过表达腺病毒组HK-2细胞sEH蛋白质水平及MCP-1、IL-6、CSF-1及TNF-α mRNA水平均明显增加(P<0.05)。4.与正常对照组HK-2培养基处理的巨噬细胞相比,尿蛋白、sEH过表达腺病毒HK-2培养基处理的巨噬细胞及正常对照HK-2培养基外源性加入IFN-γ组巨噬细胞IL-6、iNOSmRNA表达明显升高(P<0.05);与蛋白尿组HK-2培养基处理的巨噬细胞相比,sEH抑制剂+蛋白尿组、尿蛋白HK-2培养基外源性加入EET组及正常对照HK-2培养基外源性加入IL-4组巨噬细胞Arg-1、IL-10 mRNA水平明显增加(P<0.05)。5.与正常对照组HK-2培养基处理的巨噬细胞相比,尿蛋白、sEH过表达腺病毒HK-2培养基处理的巨噬细胞及正常对照HK-2培养基外源性加入IFN-γ组巨噬细胞p-p65蛋白表达明显升高(P<0.05);与蛋白尿组HK-2培养基处理的巨噬细胞相比,sEH抑制剂+蛋白尿组及尿蛋白HK-2培养基外源性加入EET组明显抑制蛋白尿对p-p65上调,促进p-Akt表达(P<0.05)。叁、结论上调肾小管上皮细胞sEH,促进诱导M1型巨噬细胞极化的细胞因子表达;肾小管上皮细胞sEH通过细胞因子及EETs的旁分泌作用,激活NF-κB-p65途径促进巨噬细胞向M1型极化,抑制PI3K-Akt途径抑制M2型巨噬细胞极化。抑制sEH后可逆转上述作用。(本文来源于《郑州大学》期刊2017-12-01）
龙艳君,查艳,袁静,杨霞,田茂露[2]（2017）在《氯沙坦对慢性进展性肾炎大鼠肾小管间质巨噬细胞趋化抑制因子及核转录因子κB/P65表达的影响》一文中研究指出目的:观察不同剂量的血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)氯沙坦治疗前后巨噬细胞趋化抑制因子(MIF)及核转录因子κB/P65(NF-κB/P65)在慢性进展性肾炎大鼠肾小管间质中的表达,探讨氯沙坦在肾小管间质炎症反应中发挥作用的可能机制。方法:采用切除右肾后第1周、2周分别尾静脉注射抗Thy1.1抗体建立慢性进展性肾炎模型。将雄性成年SD大鼠按随机数字表分为假手术组(n=9)、模型组(n=9)、低剂量氯沙坦组(20mg/kg.d,n=9)和高剂量氯沙坦组(80mg/kg.d,n=9)。氯沙坦组在注射抗Thy1.1抗体后1 d开始给药,假手术组和模型组仅予等量生理盐水灌胃。观察各组大鼠的24小时尿蛋白定量、鼠尾收缩期血压(SBP)、血肌酐(Scr)、肾组织病理变化以及单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)在肾小管间质中的表达,采用免疫组化、Real-time PCR和Western blot分别检测MIF及NF-κB/P65在肾小管间质中的表达。结果:与假手术组相比,模型组24小时尿蛋白定量、Scr、SBP及肾小管间质中ED-1均显着升高(P<0.01),肾组织MIF、NF-κB/P65的mRNA及蛋白表达亦显着增加(P<0.01),且NF-κB/P65核阳性肾小管上皮细胞明显增加(P<0.01)。应用氯沙坦干预后,大鼠肾组织病理学变化得到一定程度的改善,并呈剂量依赖性;24小时尿蛋白定量、肾小管间质NF-κB/P65及ED-1的表达明显减少(P<0.01 VS模型组),其中高剂量组降低更为显着(P<0.05 VS低剂量组);血肌酐、MIF的表达亦明显减少,其中高剂量组降低较为明显,但与低剂量组相比较无统计学差异。结论:慢性进展性肾炎大鼠肾间质MIF和NF-κB/P65的表达明显增加,氯沙坦可能通过下调MIF和NF-κB/P65的表达来改善肾小管间质的炎症反应。(本文来源于《第十二届全国免疫学学术大会壁报交流集》期刊2017-10-26）
黄新莉[3]（2015）在《氢对脂多糖刺激的大鼠肺间质巨噬细胞的影响》一文中研究指出目的:观察氢饱和盐水对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)分泌促炎细胞因子的影响。方法:应用胶原酶消化法结合肺泡耗竭灌洗和肺循环灌洗技术分离纯化SD大鼠PIMs,在用常规RPMI-1640培养基或含氢RPMI-1640培养基的情况下,用LPS(1 mg/L)刺激细胞一定时间,ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α和IL-1β的含量,用RT-PCR技术分析细胞(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2015年10期）
耿杰杰[4]（2014）在《小鼠肺间质纤维化中,CD147促进M1型巨噬细胞亚型诱导Th17细胞分化》一文中研究指出研究背景:肺间质纤维化是一种慢性的、渐进的肺间质疾病,其特点是大量积累细胞外基质,重塑肺结构,并伴随着严重的关节炎等并发症。在肺间质纤维化发生发展过程中,巨噬细胞、Th17细胞及一些其他淋巴细胞都起到非常关键的作用。研究表明,在人或鼠的肺纤维化过程中,CD147的表达会上升,但是CD147在肺纤维化中的具体作用机制还不清楚。目的:本课题旨在阐明肺间质纤维化中CD147的作用机制,并对巨噬细胞亚型诱导Th17细胞的分化情况进行研究。方法:建立C57BL/6肺间质纤维化小鼠模型,并用HAb18G/CD147抗体治疗,观察肺间质纤维化的进展情况及小鼠体内巨噬细胞亚型和Th17细胞的数量变化;从肺间质纤维化小鼠的肺组织中分离M1、M2型巨噬细胞和CD4+T细胞共培养,并用HAb18G/CD147抗体封闭和慢病毒干涉CD147,观察Th17细胞的分化情况;用Real-time PCR及Bio-p1ex技术阐明肺间质纤维化中M1、M2型巨噬细胞与Th17细胞分化之间的关系及机制,并研究清楚CD147在其中的作用。结果:HAb18G/CD147抗体治疗后,小鼠肺间质纤维化程度有所改善,并且M1型巨噬细胞和Th17细胞的数量有所下降;在小鼠肺间质纤维化中,CD147能促进M1型巨噬细胞能诱导Th17细胞分化;CD147通过调节促Th17细胞分化的细胞因子,TGF-β、IL-6和IL-1β等,促进M1型巨噬细胞亚型诱导Th17细胞的分化。结论:本实验发现CD147抗体对小鼠肺间质纤维化进程有缓解作用,并且M1型巨噬细胞对Th17细胞的分化有正向促进作用,并且CD147通过调节促Th17细胞分化的细胞因子,TGF-β、IL-6和IL-1β,促进该过程的发生。因此,我们可以推断CD147可能是通过促进M1型巨噬细胞亚型诱导Th17细胞分化来改善肺间质纤维化的。但是,肺间质纤维化是一个复杂的过程,涉及到多种不同的细胞和细胞因子,以后的实验将会对CD147在肺间质纤维化的作用机制进行进一步研究。(本文来源于《第九届全国免疫学学术大会论文集》期刊2014-10-18）
张葵,耿杰杰,陈丽娜,缪金林,孟瑶[5]（2014）在《巨噬细胞M1亚类的CD147分子诱导肺间质纤维化过程中Th17细胞的分化》一文中研究指出背景:肺间质纤维化属于慢性肺病,目前尚没有明确有效的治疗措施可以阻止或是逆转病情进展。研究中发现在肺间质纤维化发生过程中,Th17细胞起到重要作用,而巨噬细胞在Th17细胞的分化过程中具有调节功能,肺间质纤维化病灶局部的巨噬细胞所表达的CD147分子明显增多。然而,CD147分子在肺间质纤维化过程中的作用还不明确,并且通过降低或干扰CD147分子的功能是否可以缓解动物模型肺间质纤维化的进程也不清楚。目的:本研究拟揭示在小鼠肺间质纤维化过程中,针对CD147分子的抗体是否具有治疗作用,并且在这一(本文来源于《第九届全国免疫学学术大会论文集》期刊2014-10-18）
龙艳君,杨小翠,杨霞,达静静,袁静[6]（2014）在《1,25-(OH)_2-D_3对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质巨噬细胞趋化抑制因子及核转录因子κB/P65表达的影响》一文中研究指出目的观察巨噬细胞趋化抑制因子(MIF)及核转录因子κB/P65(NF-κB/P65)在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质中的表达及1,25-(OH)2-D3对其的影响。方法采用单侧输尿管结扎手术建立单侧输尿管梗阻模型。将健康成年的雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组:假手术组(n=10)、模型组(n=10)和VD组(n=10)。VD组采用6ng/(100 g·d)的1,25-(OH)2-D3干预治疗,假手术组和模型组仅给予等量生理盐水灌胃8周。观察3组大鼠第8周肾功能、肾组织病理学改变,免疫组化法检测单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)、NF-κB/P65、MIF在肾组织中的表达。结果与假手术组相比,模型组血肌酐增高(P<0.01),肾间质面积/统计场面积增加(P<0.01),肾组织ED-1阳性细胞明显增加(P<0.01),肾组织MIF的表达显着升高(P<0.01),NF-κB/P65核阳性细胞明显增加(P<0.01)。与模型组比较,VD组大鼠肾组织病理学变化得到一定程度的改善,肾组织ED-1、MIF的表达及NF-κB/P65核阳性细胞明显减少(P<0.01)。结论单侧输尿管梗阻大鼠肾间质MIF的表达和NF-κB/P65的活性明显增加,1,25-(OH)2-D3可能通过下调MIF的表达,抑制NF-κB/P65的活性来减轻肾小管间质的炎症反应,改善肾脏纤维化。(本文来源于《中国当代医药》期刊2014年26期）
李芳林,张凝宇,钦卓辉,李辉,李智民[7]（2014）在《血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂减轻糖尿病肾间质巨噬细胞的浸润》一文中研究指出目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对糖尿病肾脏的保护作用。方法 STZ尾静脉注射建立大鼠糖尿病模型。用免疫组化方法检测大鼠肾脏巨噬细胞的表达。比较血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂治疗组与非治疗组肾脏CD68+巨噬细胞的表达。结果糖尿病成模后,巨噬细胞在肾间质的表达明显增加。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂治疗组较非治疗组肾间质巨噬细胞的浸润减少加(P<0.01),伴随蛋白尿的减轻。结论血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂可减轻糖尿病大鼠肾脏炎症浸润。(本文来源于《中国医药指南》期刊2014年18期）
刘敏,聂汉祥,杨巧玉,何青,张固琴[8]（2014）在《哮喘小鼠肺间质巨噬细胞的表型特征分析》一文中研究指出目的:观察哮喘小鼠肺间质巨噬细胞的表型特征。方法:12只BALB/c小鼠随机分为哮喘组和正常组,每组6只。哮喘组和正常组分别采用卵清白蛋白和PBS致敏和激发。流式细胞仪检测肺间质巨噬细胞和M2型肺间质巨噬细胞的数量;RT-PCR检测肺间质巨噬细胞精氨酸酶1(Arg1)、转谷氨酰胺酶2(TG2)、白细胞介素(IL)-10和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平;ELISA法检测肺间质巨噬细胞体外培养上清液IL-10和IL-12水平。结果:哮喘组小鼠肺间质巨噬细胞占肺单个核细胞的百分数和M2型肺间质巨噬细胞占肺间质巨噬细胞的百分数明显高于正常组(均P<0.01)。哮喘组小鼠肺间质巨噬细胞Arg1和TG2mRNA表达水平明显高于正常组(均P<0.01),IL-10mRNA表达水平明显低于正常组(P<0.01),iNOS mRNA表达水平与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘组小鼠肺间质巨噬细胞体外培养上清液IL-10水平明显低于正常组(P<0.01),IL-12水平与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:哮喘肺间质巨噬细胞表现为替代活化巨噬细胞的表型特征,并高表达TG2。(本文来源于《武汉大学学报(医学版)》期刊2014年03期）
耿杰杰[9]（2013）在《小鼠肺间质纤维化中巨噬细胞亚型诱导Th17细胞分化及CD147在其中的作用》一文中研究指出背景肺间质纤维化是一种慢性的、渐进的肺间质疾病，其特点是大量积累细胞外基质，重塑肺结构，并伴随着严重的关节炎等并发症。它是由多种原因引起的肺间质的炎症性疾病，病变主要累及肺间质，也可累及肺泡上皮细胞及肺血管。肺间质纤维化中一部分患者继发于系统性硬化症、类风湿关节炎、多肌炎/皮肌炎、系统性红斑狼疮、强直性脊柱炎及混合结缔组织病，临床上也很常见。大部分患肺纤维化的病人将会在3-8年内死于呼吸衰竭。尽管肺间质纤维化的患者死亡率很高，但是目前还没有治疗该疾病的有效方法，此病的发病机制及发展进程也不清楚。因此，加深对肺间质纤维化机制，尤其是对其病程早期阶段的认识，是该病发病机制和治疗研究亟待解决的问题。辅助性T细胞17(Th17)是一种能够分泌白介素17(IL-17)的T细胞亚群，在机体防御反应和自身免疫性疾病中具有重要的意义。它是由Th0细胞在TGF-β、IL-1β、IL-6和IL-23的刺激下分化而成的辅助性T细胞，主要分泌IL-17、IL-22等促炎症因子，RORγ是其重要的转入因子。Th17细胞在多种免疫相关疾病的发病机制中起非常重要的作用，如银屑病、类风湿性关节炎、多发性硬化、炎性肠病和支气管哮喘，近几年来发现Th17细胞在肺间质纤维化中也有非常重要的作用。单核吞噬细胞前体经微环境中某些微生物产物和细胞因子的诱导能够发生分化，并且因诱导因素不同而表现出不同表型和功能特点。它大体可分为两种不同的亚型，即M1和M2型巨噬细胞，各亚型的功能差异很大。虽然国内外已有很多文献报道巨噬细胞能够促进Th17细胞的分化，但是各亚型对Th17细胞的分化的作用还不是很明确。在肺间质纤维化中，某些细胞特别是巨噬细胞和中性粒细胞上的CD147高表达，并且CD147可能促进肺纤维化的进程。已有文献报道，CD147与细胞因子TGF-β、IL-6等也有一定关系，因此我们推断CD147与Th17的分化也是有关系的。本课题旨在将肺间质纤维化、巨噬细胞亚型、Th17细胞和CD147分子联系起来，阐明肺间质纤维化中M1、M2型巨噬细胞与Th17细胞分化之间的关系及机制，并研究清楚CD147在其中的作用。这将对炎症的研究及治疗起到一定的推动作用。目的建立肺间质纤维化小鼠模型，并用HAb18G/CD147抗体治疗，观察小鼠体内巨噬细胞亚型和Th17细胞的数量变化；从肺间质纤维化小鼠的肺组织中分离M1、M2型巨噬细胞和CD4+T细胞共培养，并用HAb18G/CD147抗体封闭和慢病毒干涉CD147，观察Th17细胞的分化情况，阐明肺间质纤维化中M1、M2型巨噬细胞与Th17细胞分化之间的关系及机制，并研究清楚CD147在其中的作用。方法和结果1HAb18G/CD147抗体治疗肺间质纤维化小鼠及Th17细胞、M1、M2型巨噬细胞数量的变化1.1肺间质纤维化小鼠模型的建立及HAb18G/CD147抗体治疗9～11周龄的雌性C57BL/6小鼠随机分为3组：模型组（BLM组）24只、HAb18抗体治疗组和治疗对照组，每组各6只。用气管滴注法建立肺间质纤维化小鼠模型，于造模次日起腹腔注射给药，治疗组用HAb18G/CD147抗体（10mg/kg），治疗对照组予同体积的生理盐水，每日1次。BLM组不予治疗。1.2检测及研究模型组于注射博来霉素后第4d、7d、14d、28d分批取材，每次每组6只，3只用于肺组织切片，3只用于研磨提取淋巴细胞。治疗组和治疗对照组于连续给药后第14天取材。将小鼠组织块置4%多聚甲醛/0.1PBS固定24h，经脱水、石蜡包埋后，制作石蜡切片（切片厚度3μm），HE染色观察肺组织炎症改变，Masson染色观察肺组织纤维化情况。取小鼠肺组织研磨消化后，加入5mL红细胞裂解液，冰上裂解10min，然后轻轻加到5mL小鼠淋巴细胞分离液（购于Mediatech）上层，2000rmp离心20min，吸取中间层的单核、淋巴细胞，用于流式分析。提取模型组和HAb18G/CD147抗体治疗组的小鼠肺组织淋巴细胞的mRNA，进行Real-time PCR检测。1.3结果1.3.1治疗前及治疗后小鼠肺组织病理观察第4d开始BLM组的肺泡间隔逐渐增宽，有少量淋巴细胞浸润，也可见少量的、散在的中性粒细胞、单核-巨噬细胞浸润；第7d，肺间隔增宽明显，炎症反应加重，有大量淋巴细胞、少量单核-巨噬细胞浸润，胶原纤维沉积增多，第14d，见肺组织结构破坏，瘢痕形成。对HAb18G/CD147抗体治疗小鼠第14d时的肺组织进行切片，HE染色和Masson染色发现HAb18G/CD147抗体治疗后，小鼠肺间质炎症明显减轻，间质内及小支气管周围胶原纤维沉积减少。BLM组与治疗对照组间相比均未见明显差异。1.3.2流式检测治疗前后M1、M2型巨噬细胞和Th17细胞的数量变化流式检测注射博来霉素后第4d、7d、14d、28d的小鼠肺组织中Th17细胞、M1、M2型巨噬细胞的数量变化，发现随着小鼠肺组织病变的增加，其Th17细胞、M1、M2型巨噬细胞的数量逐渐增加，在第14天时，达到最大值，第28天时，叁种细胞的数量都有下降，其中Th17细胞和M1型巨噬细胞下降的较多。流式检测模型组和HAb18G/CD147抗体治疗组的小鼠肺组织中M1、M2型巨噬细胞和Th17细胞的数量变化，发现经过治疗后的小鼠，M1型巨噬细胞略有下降，2.70%±0.45%~1.97%±0.36%；M2型巨噬细胞变化不明显，4.80%±0.54%~4.94%±0.23%；Th17细胞明显下降，3.24%±0.38%~1.50%±0.54%。1.3.3Real-time PCR检测治疗前后小鼠肺组织淋巴细胞中的细胞因子提取模型组和HAb18G/CD147抗体治疗组的小鼠肺组织淋巴细胞的mRNA，进行Real-time PCR，发现经过抗体治疗后的小鼠TGF-β、IL-6、IL-1β都明显下降，其中TGF-β下降将近一倍。2肺间质纤维化中M1、M2型巨噬细胞对Th17细胞的诱导作用2.1M1、M2型巨噬细胞及CD4+T细胞的分离取小鼠肺组织研磨消化后，加入5mL红细胞裂解液，冰上裂解10min，然后轻轻加到5mL小鼠淋巴细胞分离液（购于Mediatech）上层，2000rmp离心20min，吸取中间层的单核、淋巴细胞，用于流式分析和分选。流式分选：将收取的单核、淋巴细胞用FITC-CD16/32，PE-CD206和PerCP-CD4标记，室温放置30min，用MOFLO流式分选仪分选。2.2检测及研究分选之后的M1、M2型巨噬细胞分别与CD4T细胞共培养，并加入5ug/mlanti-CD3和10ug/ml anti-CD28刺激，叁天后收集CD4T细胞用于流式分析。流式分析：将共培养之后的CD4T细胞分离出来，在1uM莫能菌素条件下培养4小时，然后用PE-CCR6标记胞外抗原，室温放置30min；用BD Cytofix/Cytoperm和BD Perm/Wash kit固定破膜，FITC-IFNγ，PE-IL-17和PerCP-RORγt标记胞内抗原，4℃放置半小时，PBS洗叁遍，流式上机分析。2.3结果2.3.1M1、M2型巨噬细胞对Th17细胞分化的诱导作用流式分析发现，在与M1共培养的CD4T细胞中，诱导成的CCR6、IL-17和RORγt分别是与M2共培养的CD4T细胞的~5(4.96%±0.46%to1.22%±0.21%),~3(3.87%±0.32%to1.24%±0.23%)和~4(2.54%±0.28%to0.60%±0.15%)。2.3.2CD147在M1型巨噬细胞对Th17细胞分化的诱导中的作用在M1型巨噬细胞与CD4T细胞共培养体系中，加入2ug/ml CD147/HAb18抗体封闭CD147,3天后，分离出CD4T细胞，进行CCR6染色，标记出Th17细胞。发现CCR6的表达水平在CD147/HAb18抗体封闭组中要低（1.84%±0.45%），而在未加抗体组中的表达水平要高（4.15%±0.68%）。同样的结果，将用慢病毒干涉掉CD147的M1型巨噬细胞与CD4T细胞共培养，发现CCR6的表达水平在慢病毒干涉组中要低（2.06%±0.48%），而在未干涉组中的表达水平要高（4.84%±0.72%）。结论本实验发现M1型巨噬细胞对Th17细胞的分化有正向促进作用，并且CD147通过调节促Th17细胞分化的细胞因子，TGF-β、IL-6和IL-1β，促进该过程的发生。但是，Th17细胞分化是一个复杂的过程，涉及到多种不同的细胞和细胞因子，以后的实验将会对CD147促进Th17细胞分化的机制进行进一步研究。(本文来源于《第四军医大学》期刊2013-05-01）
陈晓玲,马韬,杨彦,陈仁清[10]（2008）在《川芎嗪对糖尿病肾病大鼠肾间质巨噬细胞浸润及IL-6、TNF-α表达的影响》一文中研究指出目的观察川芎嗪(TMP)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾间质巨噬细胞浸润及白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:选用SD大鼠,采用单侧肾切除,链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病大鼠动物模型。成模后随机分为5组,每组12只,分别为模型组、正常组(单侧肾切除手术组)、贝那普利(Lotensin)组、川芎嗪高、低剂量组,除正常组和模型组外,其余各组按组别分别予贝那普利1.7mg/(kg·d)、川芎嗪150mg(kg·d)、川芎嗪50mg/(kg·d)灌胃治疗,共12周。实验第4周、第8周和第12周,测定24h尿蛋白含量;治疗12周后,免疫荧光检测肾间质巨噬细胞(ED-1)、IL-6及TNF-α表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠24h尿蛋白定量明显升高(P<0.05),肾小管间质中ED- 1、IL-6及TNF-α表达明显增加[p<0.01]。川芎嗪高剂量组大鼠24h尿蛋白定量增加程度明显降低,肾小管间质组织ED-1、IL-6及TNF-α表达减少,与模型组比较均有显着性差异(P<0.05)。结论:川芎嗪能减轻DN大鼠肾小管间质巨噬细胞浸润,减少炎症介质IL-6及TNF-α等的表达,减轻小管间质病变。(本文来源于《中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编》期刊2008-05-01）
肺间质巨噬细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:观察不同剂量的血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)氯沙坦治疗前后巨噬细胞趋化抑制因子(MIF)及核转录因子κB/P65(NF-κB/P65)在慢性进展性肾炎大鼠肾小管间质中的表达,探讨氯沙坦在肾小管间质炎症反应中发挥作用的可能机制。方法:采用切除右肾后第1周、2周分别尾静脉注射抗Thy1.1抗体建立慢性进展性肾炎模型。将雄性成年SD大鼠按随机数字表分为假手术组(n=9)、模型组(n=9)、低剂量氯沙坦组(20mg/kg.d,n=9)和高剂量氯沙坦组(80mg/kg.d,n=9)。氯沙坦组在注射抗Thy1.1抗体后1 d开始给药,假手术组和模型组仅予等量生理盐水灌胃。观察各组大鼠的24小时尿蛋白定量、鼠尾收缩期血压(SBP)、血肌酐(Scr)、肾组织病理变化以及单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)在肾小管间质中的表达,采用免疫组化、Real-time PCR和Western blot分别检测MIF及NF-κB/P65在肾小管间质中的表达。结果:与假手术组相比,模型组24小时尿蛋白定量、Scr、SBP及肾小管间质中ED-1均显着升高(P<0.01),肾组织MIF、NF-κB/P65的mRNA及蛋白表达亦显着增加(P<0.01),且NF-κB/P65核阳性肾小管上皮细胞明显增加(P<0.01)。应用氯沙坦干预后,大鼠肾组织病理学变化得到一定程度的改善,并呈剂量依赖性;24小时尿蛋白定量、肾小管间质NF-κB/P65及ED-1的表达明显减少(P<0.01 VS模型组),其中高剂量组降低更为显着(P<0.05 VS低剂量组);血肌酐、MIF的表达亦明显减少,其中高剂量组降低较为明显,但与低剂量组相比较无统计学差异。结论:慢性进展性肾炎大鼠肾间质MIF和NF-κB/P65的表达明显增加,氯沙坦可能通过下调MIF和NF-κB/P65的表达来改善肾小管间质的炎症反应。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肺间质巨噬细胞论文参考文献
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