导读:本文包含了潮霉素抗性论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:霉素,抗性,基因,质体,水稻,磷酸,浓度。
潮霉素抗性论文文献综述
王桂英,刘晓杰,李珊珊,孙超,杨金库[1]（2015）在《巨霸杨组培再生体系的建立及潮霉素抗性试验》一文中研究指出以巨霸杨为试材,采用不同植物激素组合及潮霉素不同浓度梯度筛选法,研究了巨霸杨组培再生体系建立及潮霉素对叶片和茎尖苗生长分化的影响。结果表明:诱导叶片芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 0.25mg/L+IBA 0.1mg/L,再生芽在1/2MS+IBA 0.3mg/L上生根形成完整植株。通过对无菌苗叶片和茎尖材料不同浓度梯度潮霉素抗性筛选试验,发现潮霉素(Hygromycin)对巨霸杨产生了较为敏感的选择压力,随着培养天数的增加潮霉素的抑制作用越来越明显。同茎尖苗比,叶片对潮霉素更为敏感。叶片培养2d后即有明显受损表现,茎尖苗在培养4d后才出现损伤。14d后,在4mg/L潮霉素条件下只有个别叶片在叶柄基部有少量芽分化;6mg/L以上潮霉素条件下叶片及茎尖苗则全部失绿死亡。经过对比,确定巨霸杨的潮霉素筛选临界浓度范围为4~6mg/L。该研究为巨霸杨的基因转化奠定了技术基础。(本文来源于《北方园艺》期刊2015年13期）
张旻,姜绍通,郑娟,郑志,李兴江[2]（2015）在《潮霉素B抗性为选择标记的整合型表达载体的构建及在米根霉中的遗传转化》一文中研究指出为了建立适合米根霉的遗传转化体系,应用重迭延伸PCR的方法构建了以潮霉素B抗性为选择标记的单交换整合型表达载体p BS-hygro-ldh A;分别采用PEG/Ca Cl2介导的原生质体转化、原生质体电转化及萌发孢子电转化的方法将表达载体p BS-hygro-ldh A转化入米根霉AS 3.819菌株中,并研究了菌丝酶解时间、孢子萌发时间以及电转化电场强度对于转化效率的影响;通过荧光定量PCR(q PCR)对米根霉转化子基因组中质粒整合拷贝数进行了检测,并研究了其对米根霉转化子抗性稳定性的影响。实验结果表明成功获得整合了表达载体p BS-hygro-ldh A的米根霉转化子。菌丝酶解140 min产生的原生质体其再生率和转化率最高,原生质体电转化最佳电场强度为13 k V/cm,孢子萌发2.5 h转化率最高,萌发孢子电转化最佳电场强度为14 k V/cm。萌发孢子电转化方法转化率要高于原生质体转化的方法。荧光定量PCR检测结果表明,在一定范围内,高质粒整合拷贝数的米根霉转化子比较稳定。研究建立了用于工业米根霉菌株的遗传转化体系,为米根霉代谢调控研究以及菌种改造工作提供了基础与支持。(本文来源于《生物工程学报》期刊2015年08期）
徐义兵,刘娜,黄毓茂[3]（2012）在《潮霉素抗性基因筛选标记质粒的构建及LL37的表达》一文中研究指出为了实现以潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)为选择标记的质粒在毕赤酵母中高效表达抗菌肽LL37,在pGAPZαA质粒的基础上,通过EcoRⅤ、BamHⅠ双酶切将Zeocin抗性基因替换成潮霉素磷酸转移酶基因,获得的表达质粒命名为pGAPHαA。根据LL37氨基酸序列,通过毕赤酵母密码子偏嗜性改造,合成的LL37基因片段克隆到pGAPHαA质粒中,获得重组分泌型表达质粒pGAPHαA-LL37,线性化后电击转化毕赤酵母SMD1168,经潮霉素B筛选阳性转化子。72h表达上清LL37蛋白含量约为167μg/mL,表达产物耐热性好,对大肠杆菌DH5α、猪链球菌最小抑菌浓度分别为2.94、7.06μg/mL。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2012年04期）
闵勇,吴顺清,朱海云,方北松,万中义[4]（2010）在《潮霉素B抗性基因在木醋杆菌中的整合表达》一文中研究指出以质粒pSET152为出发载体,构建潮霉素B抗性基因的表达载体pSET152-HYG,通过大肠杆菌-木醋杆菌的属间接合转移将pSET152-HYG导入木醋杆菌,在位点特异性重组酶作用下潮霉素抗性基因B整合到木醋杆菌的染色体上。与出发菌株相比,重组菌株传代稳定,潮霉素抗性有了较大的提高,从100μg/mL提高到了400μg/mL以上,而产纤维素能力只略有下降。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2010年12期）
郭丽宏,周波,鲁国东[5]（2010）在《以潮霉素B抗性基因为选择标记的水稻立枯丝核菌遗传转化体系的构建》一文中研究指出使用含裂解酶(来自Trichoderma harzianum)10mg/ml的0.8MNaCl(Ph5.8),28℃下,处理水稻立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)菌丝8小时,获得其原生质体。采用PEG介导的方法,将含有潮霉素B抗性标记的质粒pSM565转入水稻立枯丝核菌的原生质体,并在潮霉素B浓度为30μg/ml的选择性培养基上筛选转化子,获得了5-6个转化子/μgDNA的转化频率。随机挑选8个转化子,通过PCR方法检测到其中存在潮霉素抗性基因。(本文来源于《吉林农业》期刊2010年09期）
姚丽,吴才文,曾千春[6]（2010）在《甘蔗遗传转化中不同阶段潮霉素抗性筛选》一文中研究指出以新台糖22的胚性愈伤组织为材料,在诱导培养基、分化培养基及生根培养基中,分别添加不同浓度的潮霉素(Hyg)为选择性试剂,以确定甘蔗遗传转化时的最佳筛选浓度。结果表明:潮霉素对不同阶段培养基的敏感性存在一定差异,在甘蔗遗传转化时3种培养基的抗性筛选浓度分别以50、30、30mg/L为佳;在分化培养基内的毒性作用比在诱导培养基内更快、效果更好,故遗传转化时可直接将Hyg用于分化培养基进行抗性芽筛选试验。(本文来源于《中国糖料》期刊2010年02期）
殷奎德,张兴梅,郑桂萍,戴凌燕,宁德利[7]（2010）在《一种快速检测转基因水稻潮霉素抗性标记的方法》一文中研究指出潮霉素磷酸转移酶基因(Hygromycin B phosphotransferase gene,HPT或HPH)是一个十分有效的用于植物的选择标记基因,水稻的转基因研究一般都以该基因为标记及检测基因。本研究以转基因水稻的T2代为材料,研究了苗期、分蘖期的完全伸展叶和乳熟期不同部位的离体叶片对潮霉素的抗性反应,同步提取相应叶片的DNA与RNA进行HPT基因的PCR、RTPCR与Northern blot鉴定,结果表明两者符合率达到97.46%,可见利用检测离体叶片对潮霉素敏感性的方法来筛选转基因水稻具有一定的快捷性与可靠性。(本文来源于《黑龙江八一农垦大学学报》期刊2010年01期）
何余勇,周惠萍,久保康之,吴兴兴,吴毅歆[8]（2009）在《以潮霉素抗性为选择标记的瘟病菌遗传转化》一文中研究指出稻瘟菌与水稻的互作符合基因对基因关系,由于其经济重要性和遗传可操作性,现已被作为研究植物病原真菌和寄主植物互作的模式系统之一。2005年稻瘟病菌全基因组测序完成,而稻瘟病菌(本文来源于《中国植物病理学会2009年学术年会论文集》期刊2009-08-07）
王哲,孙敬克,王世翔,肖婧婧[9]（2009）在《烟草潮霉素抗性浓度的筛选与研究》一文中研究指出潮霉素是植物基因工程研究中使用较为广泛的转化体筛选抗生素,本文对烟草种子萌发及叶片外植体组织再生进行潮霉素抗性浓度筛选与研究。实验结果表明,培养基是否添加潮霉素及潮霉素浓度的大小对烟草的种子萌发率没有影响,但对种苗发育和烟草叶片组织的分化具有明显的抑制作用。烟草K326种苗的筛选浓度极限为20mg/L,而其叶片直接诱导分化再生苗的潮霉素筛选浓度最高也可达20mg/L。(本文来源于《河南城建学院学报》期刊2009年04期）
侯宁,王剑,孙彦洵,滕艳,孟凡伟[10]（2008）在《潮霉素抗性的小鼠胚胎干细胞滋养层的制备》一文中研究指出目的:获得潮霉素抗性的小鼠胚胎干细胞滋养层。方法:利用基因组整合了潮霉素B磷酸转移酶基因的小鼠品系Smad4hygro+/-,从受精14d的小鼠胚胎中制备原代胚胎成纤维细胞;鉴定基因型后,挑选一株潮霉素B磷酸转移酶基因杂合型胚胎成纤维细胞,用丝裂霉素C处理,以获得潮霉素抗性的滋养层细胞。结果:经潮霉素B加压处理后,杂合型滋养层细胞可存活2周左右,并可维持胚胎干细胞的生长。结论:制备的滋养层细胞可用于潮霉素抗性胚胎干细胞的筛选。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2008年06期）
潮霉素抗性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了建立适合米根霉的遗传转化体系,应用重迭延伸PCR的方法构建了以潮霉素B抗性为选择标记的单交换整合型表达载体p BS-hygro-ldh A;分别采用PEG/Ca Cl2介导的原生质体转化、原生质体电转化及萌发孢子电转化的方法将表达载体p BS-hygro-ldh A转化入米根霉AS 3.819菌株中,并研究了菌丝酶解时间、孢子萌发时间以及电转化电场强度对于转化效率的影响;通过荧光定量PCR(q PCR)对米根霉转化子基因组中质粒整合拷贝数进行了检测,并研究了其对米根霉转化子抗性稳定性的影响。实验结果表明成功获得整合了表达载体p BS-hygro-ldh A的米根霉转化子。菌丝酶解140 min产生的原生质体其再生率和转化率最高,原生质体电转化最佳电场强度为13 k V/cm,孢子萌发2.5 h转化率最高,萌发孢子电转化最佳电场强度为14 k V/cm。萌发孢子电转化方法转化率要高于原生质体转化的方法。荧光定量PCR检测结果表明,在一定范围内,高质粒整合拷贝数的米根霉转化子比较稳定。研究建立了用于工业米根霉菌株的遗传转化体系,为米根霉代谢调控研究以及菌种改造工作提供了基础与支持。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
潮霉素抗性论文参考文献
[1].王桂英,刘晓杰,李珊珊,孙超,杨金库.巨霸杨组培再生体系的建立及潮霉素抗性试验[J].北方园艺.2015
[2].张旻,姜绍通,郑娟,郑志,李兴江.潮霉素B抗性为选择标记的整合型表达载体的构建及在米根霉中的遗传转化[J].生物工程学报.2015
[3].徐义兵,刘娜,黄毓茂.潮霉素抗性基因筛选标记质粒的构建及LL37的表达[J].中国畜牧兽医.2012
[4].闵勇,吴顺清,朱海云,方北松,万中义.潮霉素B抗性基因在木醋杆菌中的整合表达[J].湖北农业科学.2010
[5].郭丽宏,周波,鲁国东.以潮霉素B抗性基因为选择标记的水稻立枯丝核菌遗传转化体系的构建[J].吉林农业.2010
[6].姚丽,吴才文,曾千春.甘蔗遗传转化中不同阶段潮霉素抗性筛选[J].中国糖料.2010
[7].殷奎德,张兴梅,郑桂萍,戴凌燕,宁德利.一种快速检测转基因水稻潮霉素抗性标记的方法[J].黑龙江八一农垦大学学报.2010
[8].何余勇,周惠萍,久保康之,吴兴兴,吴毅歆.以潮霉素抗性为选择标记的瘟病菌遗传转化[C].中国植物病理学会2009年学术年会论文集.2009
[9].王哲,孙敬克,王世翔,肖婧婧.烟草潮霉素抗性浓度的筛选与研究[J].河南城建学院学报.2009
[10].侯宁,王剑,孙彦洵,滕艳,孟凡伟.潮霉素抗性的小鼠胚胎干细胞滋养层的制备[J].生物技术通讯.2008
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