胡迎春, 欧阳静萍[1]2004年在《苦参碱对醛固酮诱导新生大鼠心肌成纤维细胞胶原代谢的影响》文中研究指明目的:研究苦参碱(Mat)对醛固酮(Ald)诱导新生大鼠心肌成纤维细胞(CFs)胶原代谢的影响,探讨其抑制心肌纤维化的机制。方法:利用体外细胞培养技术,差速贴壁法分离纯化CFs,体外常规培养。用Ald诱导CFs增殖,然后加处理因素。具体分
周艳芳, 胡迎春, 杨海鹭, 徐怡, 欧阳静萍[2]2010年在《苦参碱对心肌成纤维细胞增殖、胶原代谢及转化生长因子-β_1蛋白表达的影响》文中认为目的探讨苦参碱对醛固酮诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞增殖、胶原代谢的影响,并探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)信号转导通路在苦参碱抗心肌纤维化中的作用机制。方法体外差速贴壁法分离纯化培养心肌成纤维细胞,试验分为对照组、醛固酮(1.0×10-7mol/L)组和醛固酮+不同浓度(0.125,0.25,0.5mmol/L)苦参碱组5组。作用24h后,倒置显微镜观察细胞生长状态;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测心肌成纤维细胞增殖;流式细胞分析仪分析细胞周期;分光光度法检测细胞上清羟脯氨酸含量;细胞免疫荧光染色及流式细胞仪检测TGF-β1蛋白表达。结果与对照组比较,醛固酮可显着提高心肌成纤维细胞MTT-OD值,使S期细胞比率增加,G0/G1期细胞比率下降;羟脯氨酸含量、TGF-β1的蛋白表达均显着高于对照组(P<0.01)。苦参碱干预24h后,MTT-OD值、S期的细胞百分比、羟脯氨酸含量、TGF-β1的蛋白表达均显着低于醛固酮组(P<0.01),且苦参碱的效应呈浓度依赖性。结论苦参碱可抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成,其抗纤维化作用可能与直接下调TGF-β1蛋白表达有关。
胡迎春[3]2004年在《苦参碱对醛固酮诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原代谢的影响》文中研究说明目的：研究苦参碱(Matrine，Mat)对醛固酮(aldosterone，Ald)诱导新生大鼠心肌成纤维细胞(Cardiac Fibroblasts，CFs)增殖及胶原代谢的影响，探讨其抑制心肌纤维化的机制。 方法：利用体外细胞培养技术，差速贴壁法分离纯化CFs，体外常规培养。用Ald诱导CFs增殖，然后加处理因素。具体分组为：A组：对照组；B组：Ald(1.0×10~(-7)mol／L)组；C组：Ald+螺旋内酯(Spi)组；D组：Ald+洛沙坦(losartan)组；E组：Ald+Mat(0.125mmol／L)组；F组：Ald+Mat(0.25mmoI／L)组；G组：Ald+Mat(0.5mmol／L)组。作用24小时后，使用MTT法检测CFs增殖；考马斯亮兰法测定细胞总蛋白含量；流式细胞分析仪分析细胞周期；流式细胞分析仪及细胞免疫荧光染色方法测定增殖细胞核抗原(PCNA)的表达；分光光度法检测细胞上清羟脯氨酸含量；细胞免疫荧光染色方法检测纤维连接蛋白(Fibronectin，FN)表达；SDS-PAGE胶原电泳方法检测CFs胶原合成中Ⅰ型和Ⅲ型胶原比值；酶谱法检测胶原酶活性；RT-PCR检测基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的mRNA表达；细胞免疫荧光染色、流式细胞分析仪、蛋白印迹检测转化生长因子β-1(TGFβ-1)的蛋白表达；RT-PCR检测smad7的mRNA表达。 结果： (1)Ald的作用：Ald作用后MTF、细胞总蛋白含量、PCNA的表达均显着高于对照组(p＜0.01)，细胞周期分析，G_0-G_1期细胞数量明显少于对照组(p＜0.01)，而G_2-M期、S期显着高于对照组(p＜0.01)；胶原合成量、FN的表达、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的比值均显着高于对照组(p＜0.01)。 (2)Ald的作用机制：Ald受体拮抗剂Spi作用后，MTF、细胞总蛋白含量、PCNA的表达、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的比值均显着低于Ald组(p＜0.01)，细胞周期分析显示G_0-G_1期细胞数量明显高于Ald组(p＜0.01)，G_2-M期和S期明显低于Ald组(p＜0.01)；胶原合成量、FN的表达、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的比值也明显低于Ald组(p＜0.05)，显示Spi几乎抑制了Ald的大部分作用。而AT1受体拮抗losartan却仅抑制Ald的部分作用，Ml，1，、细胞总蛋白含量的表达、轻脯氨酸含量、I型和m型胶原的比值低于Ald组(p<0.05)，而PCNA、S期细胞数量、FN的表达和Ald组无显着性差异(p>.05)。这些结果提示，Ald的促增殖作用可以通过膜受体转导信号，也可以通过核受体转导信号，但以后者为主。 (3) Mat的作用及其机制:Mat作用后，Ml，T、细胞总蛋白含量、PCNA的表达、经脯氨酸含量、FN的表达、皿MP-1的表达、I型和111型胶原的比值、细胞周期分析显示q一M期和s期的细胞百分比均显着低于Ald组(p<0.01)，TG邓一1表达低于Ald组(p<0.01)。胶原酶活性、smad7基因表达显着高于Ald组(p<0.01)，显示Mat能抑制Ald诱导的细胞增殖和分泌能力增强，并与浓度呈剂量效应关系。当Mat浓度大于0.5~。呱时，其作用强于sPi组和losartan组，具有较强抗心肌纤维化作用。上述实验结果表明，Mat的抗纤维化可能与直接上调smad7基因，下调TGFB一1表达有关。 结论: (1) Ald可导致CFs增殖，胶原和FN合成增加，胶原降解降低;其机制主要是通过核受体发挥作用的; (2)Spi、losartan和Mat能抑制川d诱导的eFs增殖和胶原合成，Mat的作用强于sPi和105斌an，且呈剂量依赖效应; (3) Mat抗纤维化的作用机制可能与直接下调TG邓一1表达、上调smad7表达有关。
张婵娟, 石雅宁, 廖端芳, 杜可, 覃丽[4]2019年在《高血压病血管重塑的分子机制及中医药干预》文中研究表明血管重塑是高血压病的一种显着性病理特征,在发展过程中受到复杂的调控网络调控。血管重塑早期是一种适应性的过程,但最终变为适应不良和失代偿,损害心、脑、肾等重要靶器官,引发高血压并发症。本文就目前报道的血管重塑在高血压病及并发症病程进展中的作用和机制研究进展作一综述,并阐述了中医药干预血管重塑的基础及临床研究依据。深入阐明高血压病血管重塑的分子机制、治疗靶点及活性物质筛选将有助于提供有效的血管保护方法。
参考文献：
[1]. 苦参碱对醛固酮诱导新生大鼠心肌成纤维细胞胶原代谢的影响[C]. 胡迎春, 欧阳静萍. 国际心脏研究会中国分会第八届学术会议暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十一届学术会议论文摘要集. 2004
[2]. 苦参碱对心肌成纤维细胞增殖、胶原代谢及转化生长因子-β_1蛋白表达的影响[J]. 周艳芳, 胡迎春, 杨海鹭, 徐怡, 欧阳静萍. 中国药业. 2010
[3]. 苦参碱对醛固酮诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原代谢的影响[D]. 胡迎春. 武汉大学. 2004
[4]. 高血压病血管重塑的分子机制及中医药干预[J]. 张婵娟, 石雅宁, 廖端芳, 杜可, 覃丽. 生理学报. 2019
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