青冈县妇幼保健院151600
[摘要]目的观察分析小儿肠道病毒（EV）中枢神经系统感染的临床特点。方法选取该院2016年2月—2017年2月70例无菌性中枢神经系统感染患儿，检测其脑脊液标本，分析其中49例肠道病毒中枢神经系统感染患儿临床特点。结果共检出EV感染49例（70.00%），17例脑炎，32例脑膜炎；脑炎患儿临床表现为发热、头痛、呕吐，3例柯萨奇病毒B3型脑炎患儿病情危重，治疗后1例康复，2例遗留后遗症；脑膜炎患儿主要表现为发热、呕吐、头痛、腹泻、畏光、乏力、肌痛，治疗后全部康复。结论小儿中枢神经系统感染常见病原体为肠道病毒，脑膜炎和脑炎症状较轻，预后良好，重症脑炎可遗留不同程度后遗症。
[关键词]中枢神经系统感染；肠道病毒；临床特点
ObjectiveToobserveandanalyzetheclinicalcharacteristicsofenterovirus(EV)infectioninthecentralnervoussysteminchildren.MethodsfromFebruary2016toFebruary2017,70casesofasepticcentralnervoussysteminfectionwereselectedtodetectthecerebrospinalfluid(CSF)specimensandanalyzetheclinicalcharacteristicsof49casesofenteroviruscentralnervoussysteminfectioninchildren.Results49casesofEVinfection(70%),17casesofencephalitisand32casesofmeningitisweredetected.Theclinicalmanifestationsofchildrenwithencephalitiswerefever,headacheandvomiting,3casesofcoxsackievirustypeB3encephalitiswerecriticallyill,1patientsrecoveredand2leftsequelae,andthechildrenwithmeningitisweremainlyfever,vomiting,headache,diarrheaandphotophobia.Fatigueandmyalgiawereallrecoveredaftertreatment.Conclusionthecommonpathogensofcentralnervoussysteminfectioninchildrenareenteroviruses,meningitisandencephalitisaremild,andtheprognosisisgood.Severeencephalitiscanremainthesequelaeofdifferentdegree.
Centralnervoussysteminfection;enterovirus;clinicalcharacteristics
儿童中枢神经系统病毒性感染临床常见，临床表现和脑脊液检查是主要的诊断依据。通常病毒分离技术难以从血液或脑脊液中检测到病毒，而对脑脊液中病毒核酸的聚合酶链反应检查已成为常用的诊断方法[1]。肠道病毒是导致小儿中枢神经系统感染的常见病原体之一，为减少和预防EV中枢神经系统感染，该院对2016年2月—2017年2月期间收治的70例无菌性中枢神经系统感染患儿进行分析，检测患儿脑脊液标本，并探讨EV中枢神经系统感染临床特点，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选取该院住院部收治的70例无菌性中枢神经系统感染患儿进行研究，该次研究已取得该院伦理委员会知情同意。其中男性27例，女性43例，年龄12d～11岁，平均年龄（5.12±1.17）岁。经实验室及影像学检查，符合无菌性中枢神经系统感染诊断标准[1]，排除流行性腮腺炎、水痘-带状疱疹等传染性疾病引起的中枢神经系统感染及患有癫痫、免疫缺陷和其他神经系统基础疾病的病儿。同时家属知晓研究内容，自愿签署知情同意书。
1.2方法
1.2.1收集标本收集患儿10mL脑脊液（CSF），分装后在零下70℃环境下保存。常规检查和细菌培养后，根据ECHO30、COXB3、EV71标准病毒株为阳性对照。选择26例脑外科手术患者CSF作为阴性对照。
1.2.2引物设计与合成引物包括分型、通用引物，均由上海生物公司自动合成仪合成。
1.2.3EVRNA提取和RT-PCR扩增采用经改良过后的酸性胍-酚-氯仿一步法，对肠道病毒中RNA进行提取。采用通用引物逆转录合成cDNA，应用常规方法进行PCR扩增。
1.2.4EV分型若通用引物PCR扩增结果呈阳性，根据肠道病毒VP1基因，采用分型引物进行RT-PCR，由上海博亚生物技术有限公司琼脂糖凝胶回收系统对产物进行回收、纯化，将产物构建载体连接入质粒后转染进入大肠杆菌，克隆测序，采用M13R（-48）、ABI3730型DNA序列自动分析仪（_3730型基因分析仪为48道毛细管基因分析仪，可以升级为96道毛细管的3730XL，它是高通量基因分析的首选技术平台），采用NCBI网站中BLAST程序翻译，GenBank输入，比较序列并分析结果，同源性最高序列则为相同型别[2]。
2结果
2.1RT-PCR检测
该组70例患儿CSF标本经PCR检测，获得阳性结果49例，占70.00%，其中32例脑膜炎，占65.31%，17例脑炎，占34.69%。对脑炎患儿CSF标本2次PCR扩增，14例阳性结果，占82.35%，其中埃可病毒12型7例，埃可病毒7型1例，柯萨奇病毒B5型1例，柯萨奇病毒B3型4例，柯萨奇病毒A9型1例。4例柯萨奇病毒B3型中，3例为重症脑炎，7例埃可病毒12型患者病情较轻，其他病情均较轻。
2.2EV脑炎临床表现
年龄<5岁者13例（76.47%），年龄≥5岁者4例（23.53%）。在发病早期，发热16例，呕吐17例，14例头痛，且症状迅速加重。根据症状可分为精神障碍型1例，脑干脑炎型1例，小脑炎型1例，癫痫型2例，昏迷型2例，混合型10例。治疗后，大多数完全恢复，3例柯萨奇病毒B3型脑炎患儿病情危重，昏迷评分<7分，经综合治疗后，1例完全康复，1例遗留运动障碍，康复训练后生活自理，1例癫痫，需长期服药。
2.3EV脑膜炎临床表现
年龄<5岁者21例（65.62%），年龄≥5岁者11例（34.38%）。发热28例，呕吐16例，头痛28例，腹泻7例，乏力15例，畏光9例，肌痛4例（12.50%），脑膜刺激征阳性14例。针对性治疗后，全部康复。
3讨论
目前，临床发现肠道病毒（EV）高达近70个血清型[3]，包括柯萨奇病毒（CVs）、脊髓灰质炎病毒（PVs）、埃可病毒（Echos）、新型肠道病毒等，肠道病毒感染引起的疾病临床多表现为乏力、低热、倦怠，严重者全身感染，对患者脑、心、脊髓、肝等器官造成严重的损伤，甚至危及患者生命安全。人是肠道病毒唯一寄主，可通过餐具、食物、手指、飞沫等传播，感染风险较大。肠道病毒疾病分布于世界各地，温带以夏季较为常见，热带、亚热带全年均有，尤其是在卫生条件差、潮湿、人群拥挤地区，发病率相对较高。肠道病毒常寄生于肠道，少数可进入血流、神经组织，以隐性感染较为常见[4]。EV是导致病毒性中枢神经系统感染的病原体之一，该院从70例无菌性中枢神经系统感染中检出EV基因49例，比例为70.00%，其中17例脑炎，32例脑膜炎，两种疾病发病年龄多<5岁，李鹏等[5]报道显示，EV脑膜炎40例患儿中，26例在5岁以内，5岁以上14例；EV脑炎患儿，21例EV脑炎患儿，16例5岁以内，5例5岁以上。该文研究结果比李鹏等[5]报道的EV71中枢神经系统感染爆发流行患儿年龄偏高。EV脑膜炎临床症状较轻，多表现为头痛、呕吐、发热、乏力等，部分伴有肌痛、畏光，婴儿可伴有皮疹、腹泻。该组结果显示，<5岁患儿脑膜炎发病率高于≥5岁患儿，这可能与患儿年龄小、机体器官发育不成熟有关。多数病毒引起脑炎为急性发病，损伤程度根据病毒种类、机体情况、感染条件等因素判断[6]。肠道病毒导致的脑炎患者，多数病情较轻，也有脑实质局灶性、弥漫性损害所致的意识障碍、持续惊厥、局灶性神经体质报道。该次研究中，17例脑炎患儿发病早期发现为呕吐、头痛、发热等，急性期表现为精神障碍、语言障碍、吞咽困难、抽搐、昏迷等，积极治疗后可完全恢复。该组有3例柯萨奇病毒B3型患儿病情严重，昏迷评分在7分以下，治疗后1例康复，2例遗留功能障碍，被药物控制。该组3例柯萨奇病毒B3型脑炎为重症的原因尚未清楚，可能与以下因素有关[7-8]：①EV基因变异诱导T细胞活化异常，引起淋巴细胞增殖、炎性递质释放，进一步损害神经元功能；②肠道病毒程度决定簇基因变化，使病毒毒力变化；③温度、湿度、气候影响EV基因突变，影响毒力；④免疫功能、抵抗能力低下。
综上所述，小儿中枢神经系统感染常见病原体为肠道病毒，重症脑炎会遗留后遗症，轻度症状者预后良好。该组研究样本量较少，还需引入大量样本，进一步探讨确切机制，更加准确地了解小儿肠道病毒感染特点，掌握其导致小儿中枢感染发病机制提供新思路，为临床疾病诊断、治疗、预防提供科学的参考依据。
[参考文献]
[1]郑雪，黄巧冰.肠道病毒71型感染致中枢神经系统损伤的发病机制研究进展[J].中华神经医学杂志，2014，13（5）：534-536.
[2]陈冉冉，何颜霞.肠道病毒71型感染致中枢神经系统损害预后的研究进展[J].中华实用儿科临床杂志，2015，30（4）：318-320.
[3]薛清彬，吴泽彬，黄海川，等.乳酸脱氢酶、降钙素原、C-反应蛋白检测在小儿中枢神经系统感染的价值[J].河北医药，2014（12）：1806-1807.
[4]余向文，蓝锋，候萍萍，等.乳酸脱氢酶、降钙素原及C反应蛋白检测在小儿中枢神经系统感染的价值研究[J].现代诊断与治疗，2014（18）：4292-4293.
[5]李鹏，陈宗波.小儿肠道病毒中枢神经系统感染的临床特点[J].齐鲁医学杂志，2011，26（1）：28-30.
[6]李杰.小儿中枢神经系统感染并发神经性肺水肿临床情况研究[J].医学信息，2012，25（12）：86.
[7]周小桢，陈平洋.血清降钙素原、C-反应蛋白及脑脊液乳酸脱氢酶检测在小儿中枢神经系统感染的价值[J].中外医疗，2015（12）：184-185，188.
[8]郝立成，彭建霞，张双，等.乳酸脱氢酶、降钙素原及C反应蛋白检测在小儿中枢神经系统感染的价值[J].现代预防医学，2014，41（4）：644-646.