导读:本文包含了重组表位疫苗论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:疫苗,蛋白,链球菌,尿素,结构,奶牛,乳房。
重组表位疫苗论文文献综述
郭珍珍,和春昊,李滨洲,楚红燕,张晨昕[1]（2019）在《粪肠球菌Ace抗原表位预测及重组表位疫苗载体构建与表达》一文中研究指出利用生物信息学软件预测抗原表位,然后将筛选出的6个抗原表位基因片段分别与铁蛋白H亚基基因片段连接,并克隆到p ET-32a表达载体中,构建能融合表达Ace抗原表位和铁蛋白H亚基的重组质粒p ET-32aace1、p ET-32a-ace2、p ET-32a-ace3、p ET-32a-ace4、p ET-32a-ace5、p ET-32a-ace6,并经测序验证;优化诱导条件获得原核表达的重组蛋白后,用SDS-PAGE和Western Blot验证其相对分子质量大小和免疫原性;将重组蛋白进行纯化超滤,然后进行透射电镜成像检查。结果显示,本研究成功构建了7种原核表达载体;在IPTG诱导下获得了5种可溶性表达的融合蛋白,且均有较强的免疫原性;重组融合蛋白Ace1-H、Ace3-H、Ace5-H和Ace6-H在透射电镜下观察到了具有与天然铁蛋白类似的特殊中空结构,且其直径与天然铁蛋白纳米笼类似;而带多表位的重组蛋白Ace-H虽然也能自组装成纳米级颗粒,但没有中空核心,其直径也比天然铁蛋白略大。(本文来源于《河南农业大学学报》期刊2019年03期）
林静,尚翠玲,李小慧,高珂珂,孟佳丽[2]（2018）在《3种常见致病菌重组表位疫苗设计及重组腺病毒载体的构建》一文中研究指出选取金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的Ebps和ClfA、大肠杆菌(Escherichia coli)的OmpA和OmpC、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的SIP和PGK 3种常见致病菌的特异性蛋白。通过分析3种致病菌的B/T细胞优势蛋白表位并预测和评价其抗原性,设计合成叁联重组表位序列(TRE)。应用腺病毒Ad-Max系统将合成后的重组表位序列连接到穿梭载体pDC315-MCS-EGFP上,与腺病毒大骨架pBHGloxE1、3Cre共转染HEK293细胞,1周后观察到转染细胞出现绿色荧光且细胞出现典型的CPE,证明穿梭质粒载体pDC315-MCS-EGFP和腺病毒大骨架pBHGloxE1、3Cre转染成功。RT-PCR、Western blot验证所获得的重组腺病毒Ad-TRE-EGFP,PCR鉴定P4代重组腺病毒,均得到目的条带。说明目的片段在HEK293细胞中稳定有效表达。为下一步3种常见致病菌重组表位疫苗的体内外试验奠定了工作基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年11期）
高雅倩[3]（2016）在《重组流感嵌合HAdV表位疫苗株构建及其免疫效果研究》一文中研究指出腺病毒是一种可侵犯人类呼吸道、消化道、眼结膜及淋巴结的双螺DNA病毒,是目前已知最大和最复杂的无包膜DNA病毒之一,在自然界分布十分广泛。基于我国流行病学调研得到的数据,腺病毒在以少年儿童为主体的易感人群中主要引起急性呼吸系统疾病。5岁以下儿童呼吸系统疾病中,约有5%是3型和7型腺病毒,且引起的疾病症状7型较3型更为严重。自腺病毒1953年被分离出以来,我国发生过多次腺病毒的暴发流行,2004-2005年间全国包括北京、江苏、湖北、广州等多地暴发过腺病毒感染;2009年陕西曾爆发过7型腺病毒感染。放眼全球范围内,多个国家和地区关于不同型别腺病毒引发的暴发及流行的报道数不胜数。腺病毒肆虐恒生,极大威胁着人类公共卫生安全。对于腺病毒,目前并没有特效药物及疗效显着的治疗方法,所以对腺病毒的预防尤为重要。疫苗是预防腺病毒最有效最重要的手段。然而,在腺病毒疫苗发展史上困难重重,几种腺病毒疫苗都未能得到大规模发展。如上世纪70年代美军中使用的口服腺病毒疫苗、随后的腺病毒灭活疫苗以及后来的腺病毒减毒活疫苗都因安全问题或有效性问题未能得到大规模发展。因此,研发新的安全性及有效性都有保障的腺病毒疫苗成为当前疫苗研究的热点及难点。综上,研究安全有效的腺病毒疫苗迫在眉睫。同时,考虑到腺病毒的主要易感人群为婴幼儿,传统的注射接种不易被接受且不能激发黏膜免疫反应,这也促使我们在免疫途径上寻求新的思路,力图找到新的突破口。立足于新型喷鼻腺病毒疫苗研制,致力于解决腺病毒疫苗安全性、有效性的问题,本研究开展了以下两个部分研究内容。第一部分:流感嵌合腺病毒冷适应减毒活疫苗候选株rgFlu/HAdV-Ca的重配利用流感病毒载体具有安全性高、且易于大规模生产的优势,加之当今飞速发展的反向遗传学技术,我们重组构建了流感嵌合腺病毒冷适应、减毒活疫苗候选株,这为新型腺病毒疫苗的研究打下了基础。目的:以流感冷适应减毒活疫苗株为载体,拯救流感嵌合腺病毒多表位重复序列的冷适应减毒活疫苗候选株,为新型腺病毒疫苗的研制提供新的技术。方法:应用反向遗传学技术,以流感病毒冷适应减毒活疫苗株A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)的内部基因及季节性甲型流感A/California/07/2009株的表面基因HA分别克隆到双向转录表达载体上组成七质粒。将腺病毒六邻体蛋白的重复抗原表位序列插入NA基因中并同样克隆到双向转录表达载体上构建出重组质粒Hexon-NA-Hexon,组成八质粒。八质粒共转染COS-1/MDCK细胞,拯救嵌合腺病毒六邻体抗原表位重复序列的的冷适应减毒活疫苗候选株。经血凝实验(HA)、RT-PCR、WB、电镜、冷适应(ca)和温度敏感(ts)表型等对重配毒株进行筛选鉴定。结果:成功拯救流感嵌合腺病毒重复表位的候选疫苗株,RT-PCR测序证实与预期结果相符,WB实验证实腺病毒六邻体蛋白在重组毒株中可稳定表达,电镜下可见重组病毒形态大小与流感病毒颗粒相符。重组毒株可在鸡胚中稳定传代,体外复制情况符合流感冷适应减毒活疫苗的典型特征,其最适生长温度为33℃。将此冷适应减毒活疫苗候选株命名为rgFlu/HAdV-Ca。第二部分:流感嵌合腺病毒冷适应减毒活疫苗候选株rgFlu/HAdV-Ca免疫效果的初步评价目的:对冷适应减毒活疫苗候选株rgFlu/HAdV-Ca进行免疫原性及免疫保护性的初步评价,为新型腺病毒疫苗的研制提供数据支持。方法:对重组rgFlu/HAdV-Ca候选疫苗株进行浓缩纯化,滴鼻免疫BALB/c小鼠。应用微量中和法检测小鼠血清中HI及NT效价,用ELISA方法检测免疫后小鼠血清中IgG、IgGI及IgG2a效价及肺鼻灌洗液中sIgA的抗体效价,ELISPOT方法检测脾细胞IFN-γ及IL-4的分泌水平,进而对rgFlu/HAdV-Ca候选疫苗株的免疫原性进行评价;二免14天后,用3型和7型腺病毒野生毒株攻击小鼠,通过检测小鼠肺组织病理切片及肺组织病毒载量,评价重组rgFlu/HAdV-Ca候选疫苗株的免疫保护性。结果:动物实验证实重组rgFlu/HAdV-Ca候选疫苗株免疫小鼠后,血清中可检测到高滴度的针对流感病毒及腺病毒的中和抗体效价及高效价的IgG、IgG1及IgG2a抗体,同时肺鼻灌洗液中可检测到较高效价的sIgA抗体。脾细胞IFN-γ及IL-4等细胞因子的分泌水平也在较高水平。这表明重组rgFlu/HAdV-Ca候选疫苗株能够激发小鼠产生有效的体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫应答,证实重组rgFlu/HAdV-Ca候选疫苗株具有良好的免疫原性。攻毒后的小鼠,重组rgFlu/HAdV-Ca候选疫苗株免疫组小鼠较PBS对照组小鼠肺组织病变明显减轻,肺病毒载量明显降低,表明重组rgFlu/HAdV-Ca候选疫苗株具有较好的免疫保护效果。结论:采用反向遗传学技术拯救的重组流感嵌合腺病毒减毒活疫苗候选株rgFlu/HAdV-Ca,可激发小鼠针对3型和7型腺病毒野生毒株产生有效的体液免疫、细胞免疫及粘膜免疫应答。攻毒实验证实重组rgFlu/HAdV-Ca候选疫苗株能有效抵抗野生型3型和7型腺病毒株的攻击,具有一定的保护效果,有望为新型腺病毒疫苗研制提供新的研究策略。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2016-10-21）
刘祥,孔智翔,殷书平,殴莎莎,刘成艳[4]（2016）在《奶牛乳房炎重要候选疫苗蛋白的抗原表位分析及叁联重组表位疫苗的氨基酸序列设计》一文中研究指出为设计奶牛乳房炎叁联重组表位多肽疫苗,选取奶牛乳房炎3种主要感染菌的候选疫苗蛋白:金黄色葡萄球菌的Ebps与Clf A,大肠埃希菌的Omp A与Omp C,链球菌的SIP与PGK,通过ABCpred和Bepi Pred方案,预测获得每种蛋白各有2个优势B细胞表位;利用神经网络与量化矩阵法预测蛋白的CTL表位。结果显示,SIP蛋白无CTL表位,其余蛋白均存在1个CTL细胞表位;采用MHC-Ⅱ类分子结合肽在线程序预测蛋白的Th表位,结果发现每种蛋白各有1个Th细胞表位。使用DNASTAR软件分析6个蛋白的二级结构,结果发现,预测获得的B/T细胞表位大多处于蛋白易于产生表位的暴露表面、无规则卷曲与转角等位置。再通过Protean程序重组拼接获得的B/T细胞抗原表位,最终设计获得抗原性较好的叁联表位疫苗氨基酸序列。为新型奶牛乳房炎叁联表位疫苗的研制奠定基础。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2016年09期）
孔智翔,刘祥,殴莎莎,刘成艳,同韩虎[5]（2016）在《奶牛乳房炎链球菌GapC蛋白的生物信息学分析与重组表位疫苗设计》一文中研究指出为设计奶牛乳房炎链球菌GapC蛋白的多表位串联疫苗,进一步提高GapC蛋白的免疫效果,采用DNAMAN、MEGA软件分析GapC的同源性与系统发生,结果显示,不同种类链球菌亲缘关系均较近,尤其是与奶牛乳房炎有关的链球菌亲缘关系更近。利用在线软件预测GapC为亲水性蛋白,存在多个酶切位点;采用Signal P 4.1与TMHMM Server v.2.0软件预测GapC无信号肽和跨膜结构,定位于细胞表面;SOPMA服务器预测GapC二级结构中含无规则卷曲30.36%,α-螺旋33.93%,β-转角12.50%,β-片层23.21%。采用Swiss-Model预测的GapC叁级结构与二级结构相符。利用ABCpred和Bepi Pred方案,预测GapC存在5个B细胞表位。运用神经网络与量化矩阵法预测GapC具有1个CTL表位。使用MHC-Ⅱ类分子结合肽在线程序预测显示GapC具有1个Th表位。采用DNASTAR Protean软件重组GapC抗原表位,设计获得抗原性较好的GapC重组表位多肽。(本文来源于《江苏农业学报》期刊2016年04期）
刘祥[6]（2016）在《福氏志贺菌2a型外膜蛋白A的生物信息学分析与重组表位疫苗分子的设计》一文中研究指出福氏志贺菌外膜蛋白OmpA(outer membrane protein A)具有较强的免疫原性,在疫苗上有应用前景。采用MEGA(molecular evolutionary genetics analysis)软件对OmpA的系统发生分析显示,福氏志贺菌与肠道细菌间亲缘关系较其它菌属更近。利用在线软件预测OmpA为亲水的分泌型蛋白,存在多个酶切位点;采用TMHMM(transmembrane hidden markov models)Server v.2.0程序预测OmpA无跨膜结构并定位于细胞膜外;SOPMA(self-optimized prediction method with alignment)服务器预测OmpA二级结构中含无规则卷曲41.09%,α-螺旋26.44%,β-转角10.06%,β-片层22.41%。通过Signal P 4.1软件分析显示,OmpA的1~21位氨基酸为信号肽序列。采用SwissModel程序预测的叁维模型显示OmpA为桶装结构。利用ABCpred(artificial neural network based B-cell epitope prediction)和Bepi Pred(B-cell epitopes prediction)方案,预测OmpA存在3个B细胞表位。运用神经网络与量化矩阵法预测OmpA具有1个CTL表位。使用MHC-Ⅱ类分子结合肽在线程序预测显示OmpA具有1个Th表位。设计获得抗原性较好的OmpA蛋白重组表位多肽。为OmpA多表位串联疫苗的研究奠定基础。(本文来源于《生物学杂志》期刊2016年03期）
刘祥[7]（2016）在《猪链球菌Lmb、Sao、ZnuA蛋白的抗原表位、二级结构分析及重组表位疫苗分子的设计》一文中研究指出[目的]利用生物信息学方法设计猪链球菌候选疫苗蛋白Lmb、Sao、Znu A的重组表位多肽分子。[方法]通过ABCpred和Bepi Pred方案,预测猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的B细胞表位。运用神经网络与量化矩阵法预测蛋白的CTL表位。使用MHC-Ⅱ类分子结合肽预测蛋白的Th表位。采用DNASTAR软件与SOPMA服务器预测蛋白二级结构,进而验证获得的B/T细胞表位的准确性。通过DNASTAR Protean软件重组拼接获得的B/T细胞抗原表位,设计抗原性较好的猪链球菌重组表位多肽。[结果]猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的优势B细胞表位数分别为4个、4个和3个;CTL表位数各为1个;Th表位数分别为2个、1个和1个。二级结构预测显示这些表位大多处于蛋白易于产生表位的暴露表面、无规则卷曲与转角等位置。并设计获得抗原性较好的重组表位多肽。[结论]设计了抗原性较好的猪链球菌Lmb、Sao、Znu A蛋白的重组表位多肽。(本文来源于《生物技术》期刊2016年02期）
王保宁,潘兴,黄筱钧,周永君,祝捷[8]（2015）在《重组幽门螺杆菌多表位疫苗工程菌株的构建及其微生物学特性研究》一文中研究指出目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(ureI、ureB)及霍乱毒素B亚单位(ctB)融合片段的多表位疫苗工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选出T细胞和B细胞优势表位,通过柔性Linker相连,并在其N端加入分子内佐剂序列ctB,按照大肠杆菌BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化,即为BIB序列。人工合成之后,插入原核表达质粒pET28a(+)中,构建pET28a(+)/ctB-ureI-ureB〔pET28a(+)/BIB〕重组质粒。经限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序鉴定正确后,将质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。BIB工程菌经乳糖诱导表达后,SDS-PAGE检测重组蛋白BIB的表达情况,并对其N端氨基酸序列和相对分子质量进行测定,Western blot对其进行抗原性鉴定。结果原核表达质粒pET28a(+)/BIB经双酶切和测序鉴定构建正确,SDS-PAGE电泳显示在相对分子质量33×103处有一条明显条带,其N端氨基酸序列和相对分子质量与设计序列100%一致,Western blot结果显示BIB可以与抗幽门螺杆菌悉尼株(SS1株)小鼠血清及鼠抗CTB单抗产生特异性反应。结论成功构建了幽门螺杆菌多表位重组原核表达工程菌,该工程菌表达的BIB蛋白抗原性良好。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2015年03期）
苏春霞,段相国,陈溥言[9]（2014）在《重组白介素-2增强口蹄疫病毒多表位疫苗免疫效果研究》一文中研究指出通过研究重组白细胞介素-2(IL-2)对口蹄疫病毒(FMDV)多表位疫苗免疫效果的增强作用,为IL-2作为FMDV表位疫苗佐剂应用提供实验依据。6周龄雌性Balb/c小鼠,分为4组,第1组联合免疫表达猪IL-2的重组腺病毒(rAd5poIL-2)和串联表达FMDV多表位基因的重组腺病毒(rAd5EGS),第2、3和4组分别注射rAd5EGS、灭活疫苗和PBS,间隔2周免疫1次,共免疫3次。首免后每周采血分离小鼠血清,通过ELISA检测血清中特异性IgG;首免后6周检测血清中抗体亚型IgG1、IgG2a及细胞因子IL-4和IFN-γ的表达水平,同时分离脾细胞,MTT法检测淋巴细胞增殖指数。结果显示,联合免疫rAd5poIL-2和rAd5EGS既能增强rAd5EGS诱导小鼠特异性IgG、IgG1和IgG2a的分泌,又能增强其诱导淋巴细胞增殖能力,且免疫效果强于灭活疫苗;细胞因子检测结果显示,联合免疫rAd5poIL-2后能增强rAd5EGS诱导小鼠IL-4和IFN-γ的分泌,且其诱导IL-4和IFN-γ分泌能力也强于灭活疫苗。说明重组IL-2能有效增强FMDV多表位疫苗诱导抗体分泌能力和细胞免疫应答,rAd5poIL-2有望作为FMDV表位疫苗的候选佐剂。(本文来源于《动物医学进展》期刊2014年12期）
张文慧,钱爱东[10]（2011）在《禽流感基因重组活载体疫苗和表位疫苗的研究进展》一文中研究指出为了解禽流感新型疫苗的研究现状,从载体选择和候选基因等方面论述了基因重组活载体疫苗和表位疫苗的研究进展,并对这两种疫苗的发展前景进行了展望,以期为禽流感新型疫苗的研究提供参考。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2011年10期）
重组表位疫苗论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
选取金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的Ebps和ClfA、大肠杆菌(Escherichia coli)的OmpA和OmpC、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的SIP和PGK 3种常见致病菌的特异性蛋白。通过分析3种致病菌的B/T细胞优势蛋白表位并预测和评价其抗原性,设计合成叁联重组表位序列(TRE)。应用腺病毒Ad-Max系统将合成后的重组表位序列连接到穿梭载体pDC315-MCS-EGFP上,与腺病毒大骨架pBHGloxE1、3Cre共转染HEK293细胞,1周后观察到转染细胞出现绿色荧光且细胞出现典型的CPE,证明穿梭质粒载体pDC315-MCS-EGFP和腺病毒大骨架pBHGloxE1、3Cre转染成功。RT-PCR、Western blot验证所获得的重组腺病毒Ad-TRE-EGFP,PCR鉴定P4代重组腺病毒,均得到目的条带。说明目的片段在HEK293细胞中稳定有效表达。为下一步3种常见致病菌重组表位疫苗的体内外试验奠定了工作基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组表位疫苗论文参考文献
[1].郭珍珍,和春昊,李滨洲,楚红燕,张晨昕.粪肠球菌Ace抗原表位预测及重组表位疫苗载体构建与表达[J].河南农业大学学报.2019
[2].林静,尚翠玲,李小慧,高珂珂,孟佳丽.3种常见致病菌重组表位疫苗设计及重组腺病毒载体的构建[J].中国兽医学报.2018
[3].高雅倩.重组流感嵌合HAdV表位疫苗株构建及其免疫效果研究[D].安徽医科大学.2016
[4].刘祥,孔智翔,殷书平,殴莎莎,刘成艳.奶牛乳房炎重要候选疫苗蛋白的抗原表位分析及叁联重组表位疫苗的氨基酸序列设计[J].浙江农业学报.2016
[5].孔智翔,刘祥,殴莎莎,刘成艳,同韩虎.奶牛乳房炎链球菌GapC蛋白的生物信息学分析与重组表位疫苗设计[J].江苏农业学报.2016
[6].刘祥.福氏志贺菌2a型外膜蛋白A的生物信息学分析与重组表位疫苗分子的设计[J].生物学杂志.2016
[7].刘祥.猪链球菌Lmb、Sao、ZnuA蛋白的抗原表位、二级结构分析及重组表位疫苗分子的设计[J].生物技术.2016
[8].王保宁,潘兴,黄筱钧,周永君,祝捷.重组幽门螺杆菌多表位疫苗工程菌株的构建及其微生物学特性研究[J].四川大学学报(医学版).2015
[9].苏春霞,段相国,陈溥言.重组白介素-2增强口蹄疫病毒多表位疫苗免疫效果研究[J].动物医学进展.2014
[10].张文慧,钱爱东.禽流感基因重组活载体疫苗和表位疫苗的研究进展[J].中国兽医科学.2011
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