湿地藓LEAFY基因的克隆及原核表达分析

湿地藓LEAFY基因的克隆及原核表达分析

论文摘要

本研究通过克隆湿地藓(Hyophila javanica) LEAFY基因cDNA和开放阅读框(ORF)全长序列,诱导目的基因表达,旨在明确湿地藓LFY基因的结构特征。采用RT-PCR和RACE的技术克隆得到湿地藓FLORICAULA/LEAFY的同源基因。该基因c DNA全长为1 402 bp和1 219 bp (HjLFY1和HjLFY2)。其开放阅读框(ORF)为1 050 bp,编码349个氨基酸,预测其相对分子质量为40.39 kD。与其它物种的LFY基因氨基酸序列进行同源性比对并构建系统进化树,结果显示,湿地藓LFY基因与小立碗藓LFY基因的亲缘关系最近,同源性达95%。将LFY基因插入pThioHis A载体中,构建pThioHis A/LFY原核表达载体,获得了融合蛋白Trx-LFY,分子量约为53 kD。研究结果为深入探讨其基因结构与功能的关系提供帮助。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 湿地藓LFY基因的克隆与序列分析
  •   1.2 湿地藓LFY基因编码蛋白质的结构分析
  •   1.3 湿地藓LFY基因编码产物的系统进化分析
  •   1.4 重组表达质粒p Thio His A/LFY的构建
  •   1.5 湿地藓LFY基因的原核表达与SDS-PAGE分析
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 材料
  •   3.2 总DNA和总RNA的提取
  •   3.3 湿地藓LFY基因的同源片段的克隆
  •   3.4 湿地藓LFY基因c DNA末端扩增(5'RACE和3'RACE)
  •   3.5 湿地藓LFY基因原核表达载体的构建
  •   3.6 湿地藓LFY基因的表达及SDS-PAGE分析
  • 作者贡献
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王琦,李倩,阚诗卓,伍冉,李映,鄢波

    关键词: 湿地藓,基因,原核表达

    来源: 分子植物育种 2019年17期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 西南林业大学园林学院

    基金: 云南省高校园林植物与观赏园艺科技创新团队建设项目资助

    分类号: Q943.2

    DOI: 10.13271/j.mpb.017.005668

    页码: 5668-5673

    总页数: 6

    文件大小: 2766K

    下载量: 45

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