Smad2/3a对斑马鱼神经嵴细胞标记基因crestin表达的影响

Smad2/3a对斑马鱼神经嵴细胞标记基因crestin表达的影响

论文摘要

目的探讨Smad2/3a对脊椎动物神经嵴细胞发育的影响。方法通过在斑马鱼胚胎单细胞时期显微注射smad2/3吗啉环修饰的反义寡核苷酸的方法,特异性敲降smad2/3基因的表达,至胚胎发育至6体节,利用整胚原位杂交检测神经嵴细胞特异性标记基因snail1b,sox10,foxd3和crestin的表达情况;通过casmad2 mRNA和smad3a mRNA显微注射的方法过表达smad2和smad3a,同样利用整胚原位杂交检测神经嵴细胞特异性标记基因crestin的表达情况;通过过表达casmad2及smad3a对下调smad2和smad3a的胚胎进行挽救。结果 smad2/3a被敲低后,crestin的表达量显著降低,而snail1b,sox10和foxd3的表达量无明显变化。smad3b被敲低后,crestin,snail1b,sox10和foxd3的表达量均无明显变化;过表达casmad2和smad3a均可导致crestin的表达量增高;过表达casmad2和smad3a可挽救由于smad2/3a敲降所造成crestin的低表达量。结论 Smad2和Smad3a对神经嵴细胞标记基因crestin的表达具有重要作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 实验动物
  •     1.1.2 主要试剂和仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 反义寡核苷酸的设计与合成
  •     1.2.2 检测MO效率的引物设计
  •     1.2.3 胚胎总RNA的提取和cDNA的合成
  •     1.2.4 体外合成mRNA及纯化回收
  •     1.2.5 MO和mRNA的显微注射
  •     1.2.6 斑马鱼整胚原位杂交
  • 2 结果
  •   2.1 利用MO抑制smad2的表达
  •   2.2 p53 MO不会影响神经嵴细胞的发育
  •   2.3 敲低smad2/3对不同神经嵴细胞标记基因的影响
  •   2.4 敲低smad2/3a会特异抑制crestin表达
  •   2.5 过表达casmad2和smad3a可拯救smad2/3a敲降所导致crestin的低表达
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李丽芳,陈露西,贾顺姬,颜光玗

    关键词: 斑马鱼,神经嵴细胞

    来源: 中国实验动物学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学

    单位: 南方医科大学基础医学院发育生物学教研室,清华大学生命科学学院膜生物学国家重点实验室

    基金: 国家自然科学基金面上项目(31522035,31371460,31522031,31571526)~~

    分类号: Q75

    页码: 415-422

    总页数: 8

    文件大小: 688K

    下载量: 129

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