TGF-β1、bFGF在兔眼PRK术后角膜伤口愈合过程中的表达和意义

TGF-β1、bFGF在兔眼PRK术后角膜伤口愈合过程中的表达和意义

宿蕾艳[1]2004年在《TGF-β1、bFGF在兔眼PRK术后角膜伤口愈合过程中的表达和意义》文中指出目的:本实验拟研究细胞因子TGF-β1和bFGF在PRK术后角膜伤口愈合过程中的表达变化,探讨两种细胞因子在PRK术后角膜愈合过程中及角膜雾状混浊(Haze)形成过程中的作用;对照观察酒精去上皮法和机械去上皮法PRK术后角膜伤口愈合过程,探讨酒精对角膜基质愈合的影响。 方法:将24只健康大耳白兔(48只眼)按左右眼分为两组,每只兔一眼行酒精去上皮法PRK,另一眼行机械去上皮法PRK,分别于术后1天、1周、1月、3月随机处死6只兔(每组6只眼);设立正常对照组3只兔(6只眼)。裂隙灯显微镜下观察角膜Haze及角膜上皮愈合、水肿消退的情况;光镜下观察角膜组织病理学变化并计数不同时间点角膜基质浅层角膜细胞数量的变化;用逆转录-PCR法及免疫组化法检测正常对照组及PRK手术组术后1天、1周、1月、3月不同时点角膜TGF—β1和bFGF的表达情况。 结果: 1.酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后1周,可见1~2级haze形成,机械去上皮组haze程度较酒精去上皮组轻(P<0.01);术后1个月haze形成最明显,可达2~3级,未见4级,酒精去上皮组与机械去上皮组相比差异无统计学意义(P>0.05)。;术后3个月,haze明显减轻,酒精去上皮组与机械去上皮组相比差异无统计学意义(P>0.05)。 2.免疫组织化学检查发现:酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后不同时间角膜细胞均有TGF-β1、bFGF表达。术后1个月时,基质内角膜细胞胞浆TGF-β1、bFGF表达明显增加。 3.逆转录—PCR检查发现:术后1天时,酒精去上皮组和机械去上皮组兔角膜的TGFβ1和bFGFRT-PCR产物电泳条带光密度值下降;术后1周时,两组TGF-β1、bFGFRT-PCR产物电泳条带光密度值较正常对照组升高 天津医科大学硕士学位论文 (P<0 .01),且酒精去上皮组高于机械去上皮组(P<0 .01);术后1个月,两 组TGF一pl、bFGFRT-PCR产物电泳条带光密度值最强(P<0.01),但酒精 去上皮组与机械去上皮组相比差异无显着意义(P>.05);术后3个月,TGF- pl、bFGFRI’- PCR产物电泳条带光密度值明显下降,与正常对照组相比差 异无显着性,酒精去上皮组与机械去上皮组相比差异无显着意义(P>0.05)。4.酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后1天,角膜浅层基质均出现“无 细胞带”,浅层基质内角膜细胞数量减少,且酒精去上皮组较机械去上皮组 明显(P<0.01);术后1周基质内角膜细胞活化增生,浅层基质内角膜细胞 数量明显增加,且酒精去上皮组较机械去上皮组明显(P<0 .01);术后1个 月浅层基质内角膜细胞数量达高峰,但酒精去上皮组与机械去上皮组相比 差异无显着意义(P>0 .05);3个月时下降,但仍多于正常对照组,酒精去上 皮组与机械去上皮组相比差异无显着意义(P>0 .05)。5.酒精去上皮法与机械去上皮法PRK术后TGF一pl、bFGFmRNA的表达变 化与其术后角膜浅层基质内活化增生的角膜细胞均存在正相关关系,相关 系数分别为:酒精去上皮组术后浅层基质内角膜细胞数量与TGF一pl的相 关系数。0.744、与bFGF产0.738;机械去上皮组术后浅层基质内角膜细胞 数量与TGF一p 1 r=0.664、与bFGF厂 0.785。结论:1.酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后均出现角膜上皮下混浊(haze),术 后1个月时达高峰,之后逐渐下降。术中低浓度、短时间酒精的应用,虽然 由于酒精的化学毒性作用,术后1周时酒精去上皮组haze程度较机械去上 皮组重,但术后1个月、3个月时,两者差别没有显着意义。2.PRK术后基质内角膜细胞经历“减少一活化一增生”的过程。活化增生的角 膜细胞转化为成纤维母细胞,分泌细胞外基质(EcM),影响胶原纤维排列 及角膜透明性,酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后haze形成最明显时 角膜基质内活化增生的角膜细胞最多。天津医科大学硕士学位论文3.PRK术后TGF一pl、bFGFmRNA呈动态表达变化,变化规律与haze形成有关, 与术后基质内角膜细胞的活化、增生成正相关关系,术后1个月时TGF一旦1 及bFGFInl浏A表达达高峰,此时两组术后角膜haze也最明显,它们通过刺 激角膜基质细胞增生、分化,促进角膜基质内ECM的形成,影响haZe的 形成。

王雁, 赵堪兴, 宿蕾艳, 王乐今, 耿维莉[2]2005年在《准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术后转化生长因子β1、碱性成纤维细胞生长因子的表达及20%乙醇对兔角膜愈合的影响》文中研究说明目的探讨准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(LASEK)中乙醇对角膜伤口愈合过程的影响。方法24只健康白兔(48只眼)分为两组,一只眼行机械去上皮法,另一只眼应用20%乙醇30s去除角膜上皮,行相同方案的准分子激光切削,同时设立正常对照组。观察角膜基质浅层角膜细胞数量和形态变化;RTPCR法及免疫组化法检测正常对照组及手术组术后1d、1周、1个月、3个月转化生长因子β1(TGFβ1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况并做分析。结果术后1d,乙醇组和机械组兔角膜TGFβ1和bFGFRTPCR表达较正常对照组下降;1周两组较正常对照组升高(P<0.01),乙醇组高于机械组(P<0.01);术后1个月达高峰(P<0.01),但乙醇组与机械组比较差异无统计学意义(P>0.05);术后3个月,TGFβ1、bFGFRTPCR产物明显下降,两组之间比较或与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。浅层基质内角膜细胞数量乙醇组与TGFβ1和bFGF的相关系数分别为0.744,0.738;机械组分别为0.664和0.785。结论TGFβ1、bFGF在伤口愈合过程中的表达呈现“减少增多正常”动态过程;20%乙醇在LASEK早期对角膜伤口愈合存在一定影响,但极其短暂。手术中应用是相对安全的。

邰鹏超[3]2010年在《积雪草提取物溶液治疗兔眼角膜瘢痕的实验研究》文中提出目的:本项研究旨在通过动物实验观察积雪草提取物溶液在兔眼角膜瘢痕治疗中的作用,为积雪草在眼科临床应用提供实验依据。材料与方法:取30只兔(60只眼),用烧灼法制作角膜瘢痕的动物模型,随机分为3组:A组生理盐液对照组(20只眼);B组1%积雪草提取物溶液治疗组(20只眼);C组0.2%透明质酸钠溶液对照组(20只眼)。60天后随机数字表法,分别观察兔眼角膜瘢痕的变化,并结合病理学和光镜结构变化。结果:1.积雪草提取物溶液组治疗后,角膜瘢痕面积、厚度与透明质酸钠溶液对照组及生理盐液对照组相比较明显减小,有显着性差异(P<0.05)。2.组织病理学显示积雪草提取物溶液组角膜基质层成纤维母细胞排列较透明质酸钠溶液对照组及生理盐液对照组规则。结论:1.积雪草提取物溶液对减少兔眼角膜瘢痕疗效显着。2.积雪草提取物溶液能有效抑制胶原形成细胞的增殖及胶原的合成,是一种有效的治疗角膜瘢痕的药物。

参考文献:

[1]. TGF-β1、bFGF在兔眼PRK术后角膜伤口愈合过程中的表达和意义[D]. 宿蕾艳. 天津医科大学. 2004

[2]. 准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术后转化生长因子β1、碱性成纤维细胞生长因子的表达及20%乙醇对兔角膜愈合的影响[J]. 王雁, 赵堪兴, 宿蕾艳, 王乐今, 耿维莉. 中华眼科杂志. 2005

[3]. 积雪草提取物溶液治疗兔眼角膜瘢痕的实验研究[D]. 邰鹏超. 辽宁中医药大学. 2010

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