蓝舌病毒RT-PCR检测方法的建立及对云南省库蠓蓝舌病流行病学检测

蓝舌病毒RT-PCR检测方法的建立及对云南省库蠓蓝舌病流行病学检测

论文摘要

建立蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)RT-PCR检测方法,用于2018年云南省库蠓的蓝舌病(BT)流行病学检测。设计2对保守引物,优化RT-PCR方法的退火温度、循环次数、退火时间和延伸时间,并进行灵敏性和特异性评价。采集了昭通市3个县及普洱市澜沧县的BT传播媒介库蠓共25万余只,进行研磨后,用建立的RT-PCR方法检测样本。筛选出1对引物BTVS10-F和BTVS10-R作为蓝舌病毒RT-PCR检测引物,敏感度达到102.5TCID50/0.1 mL,通过对BTV16型的阳性病毒检测,证实该方法的可行性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 引物的设计与筛选
  •   1.2 RT-PCR条件优化
  •   1.3 特异性试验
  •   1.4 灵敏性试验
  •   1.5 蠓虫样品采集
  •   1.6 样品分装
  •   1.7 病毒RNA的提取及cDNA的合成
  •   1.8 RT-PCR扩增
  • 2 结果
  •   2.1 RT-PCR引物筛选及特异性试验
  •   2.2 RT-PCR优化结果
  •   2.3 灵敏性试验
  •   2.4 样品检测结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李成辉,肖朋朋,赵冠宇,张克龙,李卓昕,南福龙,陈竞,张涵,马彬尧,韩继成,金鑫,田明尧,鲁会军,金宁一

    关键词: 蓝舌病,库蠓,检测

    来源: 中国兽医学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 延边大学农学院,军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所,吉林大学动物医学学院,广西大学动物科学技术学院,扬州大学兽医学院

    基金: 国家重点研发计划资助项目(2017YFD0501803)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.05.02

    页码: 821-825

    总页数: 5

    文件大小: 774K

    下载量: 214

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