王大海[1]2004年在《西伯利亚蓼耐盐碱机制初步研究》文中提出土地盐碱化是影响农业生产和生态环境的严重问题。全世界约有20％的耕地和接近一半的灌溉农田产量严重受土壤高浓度盐分的影响，在中国，约有1亿多亩次生盐渍化农田，占耕地总面积的10％。如何切实改良和有效利用盐碱地，提高农林业生产的经济、社会和生态效益，是现代农林业所关注的重大问题。利用生物技术提高林木和农作物耐盐碱性，是行之有效的方法之一。而克隆耐盐碱相关基因，研究与耐盐碱性相互关系及表达机理，是通过基因工程提高林木与农作物耐盐性的基础。西伯利亚蓼是少数几个可以在碱斑土中央(pH=9.5)生存的物种之一，具有丰富的耐盐碱基因资源。本文对碳酸氢钠溶液处理后西伯利亚蓼的生理生化指标、蛋白表达图谱和EST数据进行研究和分析，探讨西伯利亚蓼耐盐碱机制，为从西伯利亚蓼中克隆耐盐碱相关基因、研究其表达机制提供依据。研究结果表明： 1 碳酸氢钠溶液(3％)处理后西伯利亚蓼不同部位对外界盐碱胁迫的反应存在多样性。 2 西伯利亚蓼茎部在碳酸氢钠溶液处理前后存在“K~+和Na~+库”的转变。 3 从碳酸氢钠溶液处理后不同部位K~+、Ca~(2+)、Na~+含量变化及随机测序后的EST数据分析表明，西伯利亚蓼叶组织可能具有与拟南芥SOS系统类似的以Ca~(2+)信号介导的细胞排Na~+途径。 4 SOD和POD水平与西伯利亚蓼对外界盐碱胁迫耐受性呈明显的正相关。 5 碳酸氢钠溶液处理后西伯利亚蓼体内脯氨酸的变化趋势及EST随机测序数据分析结果表明，脯氨酸在植株体内可能只是本底表达，对提高西伯利亚蓼植株的盐耐受性作用不大；植株体内甜菜碱含量则上升，说明甜菜碱在植株体内起到渗透调节和保护作用。 6 随机测序后的EST数据还存在与催化由山梨糖转化为山梨醇的山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase)基因一致性高的序列。认为山梨醇在植株体内有可能起到渗透调节作用。 7 用3％碳酸氢钠溶液处理后，西伯利亚蓼叶片叶绿素总含量上升，叶绿素a／b比值下降，光合作用加强。说明西伯利亚蓼适合在盐碱地生长，并且适当的盐碱环境更利于其生长。
刘关君[2]2007年在《EST技术分析西伯利亚蓼耐盐机制及耐盐相关基因克隆》文中指出西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum Laxm)为多年生草本植物，可在盐碱地碱斑上生长，为盐碱地的优势种，是研究植物耐盐碱胁迫的优良材料。在以往对西伯利亚蓼的研究基础上，本文从以下几个方面进行研究：1．通过对西伯利亚蓼NaHCO_3混合cDNA文库2575个EST的分析，拼接出1977个TUTs，其中包含206个重迭群(contig)和1771个单拷贝EST(singleton)。确定了高丰度表达、中丰度表达EST和低丰度表达EST；高丰度表达基因51个，占所有TUT的2.6％，代表457个EST，占总EST的17.77％，其中参与光合作用的EST占高丰度表达基因的54.92％。表明NaHCO_3胁迫条件下叶部的主要生理功能仍为光合作用；中丰度表达基因154个，占所有TUT的7.8％，代表342个EST，占总EST的13.30％。低丰度单拷贝的EST 1771个，占总EST的68.86％，说明文库的复杂性较好。利用BlastX对1977个TUT进行注释，其中720个TUTs有明确的功能注释，占总TUTs的36.42％；109个为未知蛋白，占总TUTs的5.51％，其余1238个则没有明显同源性而被鉴定为新基因，占总TUTs的62.62％。将720个TUT分成代谢、能量、光合作用、蛋白合成、转运组件、转录、信号传导、细胞救援与防御和其它等九类，其中代谢、能量和光合所占的比例最高，分别达到22.90％、12.25％和11.86％，而细胞救援与防御类所占比例较低，仅为1.24％，从而确定叶部虽然受到了NaHCO_3胁迫，但其主要功能如光合作用、代谢和能量仍处于主导地位，这也在一定程度上说明了西伯利亚蓼具有耐胁迫能力。2．以SMART策略构建了西伯利亚蓼NaHCO_3胁迫48h的叶部和茎部正反消减文库，随机挑取克隆测序，共获得了2282条有效序列，其中茎的正向消减文库中有598条，茎的负向消减文库中有490条，叶的负向消减文库中有567条，叶的正向消减文库中有627条。通过进行MIPs功能分类并对茎部与叶部正反消减文库比较，在盐胁迫条件下，发现茎部与叶部的胁迫反应有很大不同，茎部与叶部除细胞救援与防御、转运组件组中变化趋势相同外，在代谢、能量、光合作用、蛋白合成、转录、信号传导等方面均表现为相反的趋势，其中茎部表现为胁迫抑制的有转运组件、转录和蛋白质合成，而在叶部则表现为胁迫诱导。在茎部表现为胁迫诱导的光合作用、信号转导、能量以及代谢，在叶部则表现为胁迫抑制。说明叶部与茎部在NaHCO_3条件下具有两种不同应答机制和分工，结合以往的研究结果，确定茎部在西伯利亚蓼的个体植株水平耐盐机制中起到重要作用。3．利用RACE技术克隆了17个与胁迫有关的cDNA，并进行了生物信息学分析，确定17个胁迫相关基因为水通道蛋白基因、胚胎晚期富集蛋白基因、乙二醛酶Ⅱ基因、臭氧反应胁迫相关蛋白基因、谷氧还蛋白基因、超氧化物歧化酶(Mn)、超氧化物歧化酶(Cu-Zn)、广泛应激蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、铜伴侣、钙调蛋白、谷胱甘肽转硫酶、半胱氨酸合成酶、谷氨酰胺合成酶、金属硫蛋白、Aci-还原酮双加氧酶、泛素蛋白连接酶／锌结合蛋白，通过已有的研究结果表明其中胚胎晚期富集蛋白基因、乙二醛酶Ⅱ基因、超氧化物歧化酶(Mn)、超氧化物歧化酶(Cu-Zn)、谷氨酰胺合成酶、金属硫蛋白等基因具有潜在的耐盐碱功能，为耐盐基因工程育种的潜在基因资源。
郑磊[3]2007年在《西伯利亚蓼（Polygonum sibiricum）rd22基因的克隆、表达与功能验证》文中研究说明本研究利用RACE技术，从盐生植物——西伯利亚蓼中克隆了rd22基因(GenBank accession no．DQ836050)的cDNA序列，对该基因的生物信息学显示，rd22cDNA基因cDNA全长1302bp，其中开放读码框(ORF)为1218bp，编码405个氨基酸组成的蛋白。该蛋白是一个碱性的分泌蛋白，预测分子量为43.0kD，理论等电点为9.47。RD22蛋白序列N端前21个氨基酸具有较强的疏水性，被预测为信号肽结构，对rd22基因编码的氨基酸序列进行同源分析，发现序列的C端存在一个保守的结构域。rd22基因编码的蛋白属于BURP蛋白家族，其具有共同的结构特征：(1)N端疏水区；(2)短保守片段；(3)包含重复序列区域；(4)保守的BURP结构域。利用Northern杂交技术，对所克隆的rd22基因在盐胁迫下西伯利亚蓼各组织中的表达特性进行了研究。结果显示，西伯利亚蓼rd22基因在不同组织中表达模式具有时空多样性，在地下茎中不表达，在茎中大量表达但不受盐诱导，在叶中却受盐诱导。rd22基因编码的氨基酸序列中含有一个保守的BURP结构域，但其功能也是未知的。为验证rd22基因和编码BURP结构域的序列是否具有耐盐功能，将二者测序验证后连入植物表达载体pROKⅡ，构建了两个重组质粒pROK-rd22、pROK-burp。通过农杆菌介导法转化烟草，经卡那抗性筛选，共获得了84株抗性植株。选择部分转化株系进行PCR检测和Northern杂交分析，证明了外源基因已整合到烟草基因组中，除了一个株系外，都得到了转录水平的表达。分别选择4个转rd22烟草株系和4个转burp烟草株系进行耐盐碱试验，结果表明，200mmol·L~(-1)NaCl胁迫下转基因株系的根生长状况要好于非转基因株系；5mmol·L~(-1)NaHCO_3胁迫下，野生型烟草与转基因烟草生长状况差异不显着。因此，转基因烟草对中性盐的耐受力较好，强于碱性盐。对各株系进行了MDA含量及SOD、POD活性测定，200mmol·L~(-1)NaCl胁迫下转基因株系的MDA含量低于非转基因株系，POD活性高于非转基因株系，但SOD活性无显着差异；5mmol·L~(-1)NaHCO_3胁迫下，各转化株系的叁个生理指标与对照株系比未见显着差异。说明两个外源基因的转化使烟草的耐盐能力稍有提高，但增幅不显着；对耐碱能力没有太大增加。因此，西伯利亚蓼的rd22基因及编码其BURP结构域的序列对烟草的转化没能提高转基因烟草组培苗对盐碱的抗性。西伯利亚蓼的rd22基因及编码其BURP结构域的序列有可能不属于耐盐功能性基因和耐盐结构域，不直接参与植物对盐碱胁迫的响应。
刘昌财[4]2008年在《西伯利亚蓼抗病基因克隆、双价载体构建及遗传转化》文中进行了进一步梳理根据西伯利亚蓼抑制消减文库(SSH)中获得的硫堇基因(THI)、几丁质酶基因(CHI)和葡聚糖酶基因(GLUC)的部分序列,应用RACE技术同时克隆了THI、CHI和GLUC基因全长的cDNA序列,生物信息学分析表明,西伯利亚蓼THI(PsTHI1)与鼠尾草(Salvia miltiorrhiza)等植物THI有较高的同源性,具保守的植物THI标签,此成熟THI带正电荷,偏碱性,推定可能具有抗病原微生物活性,为一种新的植物THI;西伯利亚蓼CHI(PsCHI1)具保守的植物几丁质酶(CHI)家族19标签1序列特征,与植物classⅣCHI前体序列具有高度的同源性,推测为植物classⅣCHI,分泌到细胞外,无跨膜区,根据其它植物CHI的结构域,确定PsCHI1具有能够水解真菌细胞壁的结构,推测其可能有抗真菌病的功能;西伯利亚蓼GLUC(PsGLUC1)所编码的蛋白(PsGLUC1)呈酸性,带负电荷,该编码蛋白与水稻(Oryza sativa L.japonica)内切型1,3;1,4-β-D-葡聚糖酶(endo-1,3;1,4-beta-D-glucanase)有较高的同源性,故初步推断PsGLUC1属于葡聚糖酶家族。采用实时荧光定量PCR技术,研究了PsGLUC1和PsCHI1基因在西伯利亚蓼不同组织、不同时间的盐碱胁迫及去胁迫过程中表达特性。结果表明,PsCHI1基因表达具明显的组织特异性,无论在非胁迫、NaHCO_3胁迫还是去胁迫过程叶部的表达量明显高于茎部的表达量。PsGLUC1基因表达不具明显的组织特异性,在茎和叶中均有表达。在盐碱胁迫条件下,两个基因在茎和叶中均具有不同的表达模式。另外,无论在茎还是叶部,PsCHI1基因与PsGLUC1基因均受盐碱胁迫的影响。以已构建的PsCHI1/pROKⅡ和PsGLUC1/pROKⅡ两个单价载体为基础,采用“中间载体pGEM-T easy更换酶切位点法”和“35S和Tnos引物PCR方法”,均成功构建35S-PsGLUC1-Tnos-35S-PsCHI1-Tnos/pROKⅡ植物双价表达载体。通过对两种方法的分析比较,结果表明“35S和Tnos引物PCR方法”能够快速高效构建具完整表达框的pROKⅡ植物双价表达载体。应用此法去除了中间载体更换酶切位点的繁琐过程,减少了连接、转化的次数,明显地提高了工作效率。构建了EHA105(PsCHI1/pROKⅡ)、EHA105(PsGLUC1/pROKⅡ)两个单价农杆菌工程菌株和EHA105(PsCHI1-PsGLUC1/pROKⅡ)一个植物双价农杆菌工程菌株。并应用此双价农杆菌工程菌株成功将均具完整表达框的35S-PsGLUC1-Tnos-35S-PsCHI1-Tnos双价基因同时导入烟草基因组中,获得卡那抗性植株17株,对6个转化株系进行PCR检测,结果全部为阳性。RT-PCR分析表明,转入的外源PsGLUC1基因和PsCHI1基因能够在转录水平上表达。
刘明坤[5]2009年在《西伯利亚蓼GST和CS基因双价载体构建及转酵母和烟草研究》文中研究表明本研究从盐胁迫下的西伯利亚蓼cDNA文库中获得的GST和CS两个基因,分别构建了GST单基因、CS单基因及GST+CS双基因酵母单价和双价表达载体和植物单价和双价表达载体,成功获得了转单双价基因酵母和烟草,并进行了相关的分子生物学鉴定,分析了转基因酵母和烟草的抗盐、重金属能力,以及转单双价基因酵母和烟草的比较及协同互做关系,主要研究成果如下:1、对西伯利亚蓼GST和CS基因进行了生物信息学分析,初步表明GST属于GST的Tau类家族,推测其在植物解除重金属和盐胁迫中起着重要作用。CS在信号肽引导下定位于细胞胞质,为胞质型蛋白。荧光定量RT-PCR分析显示,3%NaHCO_3胁迫处理西伯利亚蓼2d后,GST和CS基因在叶和地下茎中均达到最大表达量,在茎中CS的最大表达量也出现在第2d,而GST基因最大表达量出现在第3d。GST和CS基因在去胁迫过程中在地下茎中的表达均上调,而在叶和茎中的表达呈下调趋势。2、构建了GST基因的原核表达载体pET28a-GST并转入到大肠杆菌中,成功表达出分子量为26 kDa的特异蛋白。在3%NaHCO_3胁迫状态下,表达GST基因的大肠杆菌(BL21-pET28a-GST)的生长明显快于对照(BL21-pET28a),表明GST诱导的蛋白在3%NaHCO_3胁迫状态下的表达能够促进细菌的生长,初步证明GST基因具有抗盐特性。3、构建了CS基因的真核表达载体pYES2-CS并转化到酿酒酵母中。实验表明,在NaCl和NaHCO_3胁迫下,转基因酵母(CS~+)的存活率明显高于对照酵母(CS~-),并且转基因酵母菌体中GSH的含量和培养基中半胱氨酸含量均有增加,初步证明在酵母中过量表达CS基因能够提高酵母的耐盐性,证明CS基因具有抗盐特性。4、构建了酿酒酵母单价表达载体pYES2-GST、pYES2-CS和双价表达载体pYES2-GC,并转入到酿酒酵母中,分别命名为转基因酵母ty-gst、ty-cs和ty-gc。在1mol·L~(-1) NaHCO_3和5 mol·L~(-1) NaCl胁迫处理下,转基因酵母(ty-gst、ty-cs和ty-gc)的耐盐能力均高于野生型酵母(wy),而叁者之间并无显着差别。在重金属胁迫处理后,转基因酵母菌(ty-gst、ty-cs和ty-gc)的耐重金属CdSO_4和CuSO_4能力均远高于野生型酵母(wy),其中转基因酵母ty-gc的耐受CdSO_4的能力最高,转基因酵母菌ty-cs和ty-gc的耐重金属CuSO_4能力高于转基因酵母ty-gst,说明GST和CS基因均具有耐受CuSO_4的能力。而转双价酵母菌中CS基因可能协助GST基因提高转基因酵母耐受CuSO_4的作用。5、构建了植物单价表达载体pROKⅡ-GST、pROKⅡ-CS和双价表达载体pROKⅡ-GC,并转入到烟草中,分别命名为转基因烟草TY-GST、TY-CS和TY-GC。耐盐性实验显示,TY-GST、TY-CS和TY-GC烟草的SOD和POD活性均高于野生型烟草对照(WY)。TY-GC和TY-GST、TY-CS之间的POD活性存在显着差异,TY-GC烟草的POD活性均高于任何一个单价烟草的POD活性。转基因植株的耐重金属实验证实,野生型烟草叶盘(WY)在重金属胁迫下很快就出现了衰老、失绿的症状,而转基因烟草(TY-GST、TY-CS和TY-GC)在重金属胁迫下,衰老、失绿的症状均比对照要迟缓的多,但3个转基因烟草之间并无显着差异。
刘春[6]2011年在《西柏利亚蓼PsGSTU1、PsCSase1、PsnsLTP基因的抗逆功能分析》文中提出本文将对转单价基因烟草(PsGSTU1和PsCSasel)和转双价基因烟草(PsGST+PsCSase)在抗非生物胁迫方面进行研究,同时观察双价基因间是否具有协同性和迭加性：将从西伯利亚蓼中克隆得到的基因PsnsLTP构建植物表达载体和酵母表达载体,成功得到了转基因烟草和转基因酵母,并对其进行生物学方面的鉴定,分析了转基因烟草耐生物和非生物胁迫方面的功能,转基因酵母耐非生物胁迫方面的功能,结果如下：1、对转PsGST基因、PsCSas基因和双价基因GC(PsGST+PsCSase)烟草进行如下几种不同非生物胁迫实验：种子萌发实验(0.9%,1.2%NaCl；10mM,20 mM NaHC03; 20%PEG6000；200μM CdCl2；UV-B:90μW/cm2紫外线)；组培苗胁迫实验(0.6%、0.9%.1.2%NaCl；400μM CdCl2);在室温内胁迫条件下的生理生化指标测定实验(分别对NaCl.CdCl2.PEG6000和紫外线胁迫下烟草SOD.POD.MDA和可溶性蛋白的测定)。无论从种子萌发比较、组培苗肋、迫后表型比较还是胁迫后烟草生理生化指标的测定比较,结果都显示转PsGST基因、PsCSase基因和双价基因GC(PsGST+PsCSase)烟草抗NaCl.NaHC03.PEG6000.CdCl2和紫外线的能力高于对照,但并没有表现出双价基因的协同性,反而转PsCSase基因烟草耐逆境胁迫能力最高。2、利用农杆菌介导法将外源基因PsnsLTP转入烟草中,经PCR和RT-PCR检测基因已经成功转入烟草基因组中并能正常转录。对转基因烟草进行如下实验：叶盘耐盐耐重金属实验(3 mM,5 mM CuS04；200μM,400μM NiCl；100μM.200μM ZnCl2;3 mM,8 mM CdS04；400μM,800μM CdCl2;100μM,200μM AlCl3;1.2%NaCl;15 mM NaHC03)；种子萌发实验(O.9%,1.2%NaCl；00 mM,20 mM NaHC03；200μM CdCl2: UV-B:90μW/cm2紫外线)；组培苗胁迫实验(0.6%,1.2%,1.5%NaCl；100μM.200μM CdCl2；7.5％PEG6000)；室温内植株肋、迫条件下生理生化指标测定实验(分别对NaCl.CdCl2.PEG6000和紫外线胁迫下烟草SOD.POD.MDA和可溶性蛋白的测定),所有实验结果显示转基因烟草抗盐碱、重金属和紫外线的能力明显高于对照。3、对转PsnsLTP基因烟草进行生物胁迫实验,离体接菌法将烟草炭疽病病菌和猝倒病病菌分别接菌到转基因烟草和对照烟草叶片上,对照烟草叶片出现明显的炭疽病症状,而转基因烟草苗与对照相比症状较轻；在猝倒病上,也出现了相似的效果,说明外源基因PsnsLTP转入烟草中提高了其对炭疽病和猝倒病的抗性,初步验证了该基因在抗病原菌方面的功能。4、构建外源基因PsnsLTP酵母表达载体pYES2-nsLTP,PCR及RT-PCR证明了外源基因已成功转入INVScl中并能正常转录,5 M NaCl；1 M NaHC03,1 M Na2CO3；400μM CdCl2；3 mM,5 mM,8 mM CdSO4和1 mM,3 mM,5 mM CuSO4的胁迫下,随着肋、迫时间及胁迫溶液浓度的增加,转基因酵母存活率始终高于对照,而且差别愈加明显,说明在半乳糖的诱导下,外源nsLTP基因可以提高转基因酵母INVScl-pYES2-nsLTP抗盐碱、抗镉和铜的能力,实验结果与转nsLTP基因烟草实验相吻合,进一步说明了nsLTP基因可以赋予植物一定的抗逆能力。
刘关君, 刘明坤, 许志茹, 阎秀峰, 朱翔[7]2008年在《盐胁迫下西伯利亚蓼6个时期混合叶cDNA文库的构建和初步分析》文中认为以3%NaHCO_3胁迫处理西伯利亚蓼2 h、6 h、12 h、1 d、2 d和3 d共6个时期混合叶为材料,提取总RNA。根据Stratagene公司cDNA建库试剂盒构建了西伯利亚蓼混合叶cDNA文库。原始文库滴度为2.0×10~6pfu·mL~(-1),扩增后文库滴度为4.5×10~9pfu·mL~(-1),重组率为95.9%,插入片段大小在0.3～1.5 kb之间,平均长度为0.45 kb左右。经测序获得2575个EST序列,拼接出1977个假定独立转录本(TUTs),其中文库中含有大量低丰度表达基因,约占TUTs总数的89.58%。BlastX分析表明,1977个TUTs中共有720个TUTs有明确功能注释,其中参与胁迫过程中代谢、能量、光合作用和蛋白合成基因表达量较高,而涉及转录、信号转导、细胞防御和救援基因表达量较低。
王垠, 刘关君, 阎秀峰, 杨传平, 刘明坤[8]2008年在《西伯利亚蓼PsPIP1基因的克隆及其在NaHCO_3胁迫下的表达》文中提出应用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从西伯利亚蓼叶cDNA文库中克隆了质膜内在蛋白基因(PsPIP1)的完整编码区cDNA序列(GenBank accession No.EU626398),长度为1004bp,编码285个氨基酸。基于和其他植物水通道蛋白的氨基酸序列、推测的叁维结构的比较以及系统进化分析结果,初步确定此基因为水通道蛋白基因家族中的PIP1亚族成员。RT-PCR结果显示,PsPIP1在西伯利亚蓼的地下茎、茎、叶中均有表达,叶中表达量最高,地下茎次之,茎中最低。在NaHCO3胁迫与去胁迫的过程中,此基因在地下茎、茎、叶中的表达模式也有较明显的差异。
朱翔[9]2003年在《盐胁迫下西伯利亚蓼cDNA文库构建及表达序列标签（EST）分析》文中研究指明为了研究西伯利亚蓼耐盐的分子机理，使用Stratagene的cDNA合成和GigapackⅢ Gold包装试剂盒构建了盐(NaHCO_3)胁迫下西伯利亚蓼的cDNA文库，随机选取重组克隆测序，用表达序列标签(EST)方法研究盐胁迫下西伯利亚蓼基因的表达。 蓝白斑检验结果表明cDNA文库滴度为1.2×10~6，重组效率为95.9％，PCR检测及序列分析结果验证插入片段平均长度大于450bp。 随机选取2688个重组克隆测序，从2575个克隆获得了有效序列。通过本地BLAST和序列多重对齐分析，从这些序列得到1651个独立的序列。网上BLAST比对显示其中1118个序列与已知基因相似，其余533个为未知功能的开放阅读框(其中101个已在其它生物中发现，423个为新发现的序列)。 在构建的文库中植物胁迫响应基因转录丰度较高，尤其是渗透胁迫基因。例如：H_-~+转运ATP酶蛋白、甜菜碱醛脱氢酶(BADH)、过氧化氢酶(catalase)、山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase)、钙调蛋白(CaM)、脯氨酰异构酶(prolyl isomerase)、热休克蛋白(heat shock protein)、通透酶(permease)等。我们还对部分序列做开放阅读框分析，利用推定的氨基酸序列进行疏水性分析，为研究蛋白的功能和细胞内定位提供线索。 本项研究构建的文库、dbEST数据库和相关的材料、信息，为进一步研究西伯利亚蓼在盐胁迫下基因的表达调控及耐盐的分子机理奠定了基础。
那守海, 王垠, 刘关君[10]2010年在《西伯利亚蓼PsGRX基因的克隆及其在NaHCO_3胁迫下的表达》文中研究指明采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从西伯利亚蓼叶cDNA文库中克隆到谷氧还蛋白基因(PsGRX)的完整编码区cDNA序列(GenBank注册号为GU139794),长度为465bp,编码106个氨基酸。根据与其他植物谷氧还蛋白的氨基酸序列的比对以及系统进化分析的结果,初步确定此基因为谷氧还蛋白基因家族成员。实时定量PCR的结果显示,PsGRX在西伯利亚蓼的叶、茎、地下茎中均有表达,叶中表达量最高,地下茎和茎中较低。在NaHCO3胁迫的过程中,此基因在叶、茎和地下茎中的表达模式也有较明显的差异。
参考文献：
[1]. 西伯利亚蓼耐盐碱机制初步研究[D]. 王大海. 东北林业大学. 2004
[2]. EST技术分析西伯利亚蓼耐盐机制及耐盐相关基因克隆[D]. 刘关君. 东北林业大学. 2007
[3]. 西伯利亚蓼（Polygonum sibiricum）rd22基因的克隆、表达与功能验证[D]. 郑磊. 东北林业大学. 2007
[4]. 西伯利亚蓼抗病基因克隆、双价载体构建及遗传转化[D]. 刘昌财. 东北林业大学. 2008
[5]. 西伯利亚蓼GST和CS基因双价载体构建及转酵母和烟草研究[D]. 刘明坤. 东北林业大学. 2009
[6]. 西柏利亚蓼PsGSTU1、PsCSase1、PsnsLTP基因的抗逆功能分析[D]. 刘春. 东北林业大学. 2011
[7]. 盐胁迫下西伯利亚蓼6个时期混合叶cDNA文库的构建和初步分析[J]. 刘关君, 刘明坤, 许志茹, 阎秀峰, 朱翔. 植物生理学通讯. 2008
[8]. 西伯利亚蓼PsPIP1基因的克隆及其在NaHCO_3胁迫下的表达[J]. 王垠, 刘关君, 阎秀峰, 杨传平, 刘明坤. 遗传. 2008
[9]. 盐胁迫下西伯利亚蓼cDNA文库构建及表达序列标签（EST）分析[D]. 朱翔. 东北林业大学. 2003
[10]. 西伯利亚蓼PsGRX基因的克隆及其在NaHCO_3胁迫下的表达[J]. 那守海, 王垠, 刘关君. 植物生理学通讯. 2010