酵母TPS1基因对干旱胁迫下北苍术的影响

论文摘要

目的:通过培养北苍术转TPS1抗性基因植株,探究转TPS1基因北苍术抗旱机制,提高北苍术的抗旱性。方法:以啤酒酵母基因组DNA为模板,PCR扩增、克隆TPS1基因,并构建pX6-TPS1重组载体,采用农杆菌介导法将构建的重组载体pX6-TPS1导入北苍术中,经抗生素培养基筛选获得转基因北苍术。结果:干旱胁迫后,转基因北苍术中促进根系生长的PLT1、PIN1、CRLⅠ基因表达量均显著高于野生型,其中PLT1、CRLⅠ的表达量约为野生型3倍左右,而野生型抑制根系生长的WOXⅡ、ARRⅠ基因表达量高于转基因北苍术;且干旱胁迫后,转基因北苍术根直径约为野生型的1.2倍,平均根长为野生型的2.7倍,一级侧根数目为野生型的2.4倍,转基因北苍术根部总吸收面积增加57.1%,活跃吸收面积增加57.8%,比表面积增加19.6%,根系活力指数增加30.9%。结论:转TPS1基因北苍术根系较野生型发达,有利于抵御干旱胁迫,可为抗旱育种、种质创新提供理论基础和技术指导。

论文目录

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.2 转基因北苍术的制备

1.2.1 酵母TPS1基因克隆:

1.2.2 酵母TPS1基因表达载体的构建:

1.2.3 农杆菌转化转基因北苍术:

1.2.4 转基因北苍术植株的分子鉴定:

1.2.5 干旱处理:

1.3 根系相关基因的表达分析

1.3.1 北苍术根系总RNA提取:

1.3.2 北苍术根系cDNA的合成:

1.3.3 实时定量PCR检测:

1.3.4 重复性试验:

2 结果与分析

2.1 酵母TPS1基因的克隆

2.2 pX6-TPS1重组质粒的构建

2.2.1 pTE-TPS1重组质粒的检测:

2.2.2 pSK-TPS1重组质粒的检测:

2.2.3 pX6-TPS1重组质粒的检测:

2.3 转基因北苍术的培养

2.3.1 野生型、转基因北苍术根部总RNA质量检测:

2.3.2 农杆菌介导北苍术转化:

2.4 转基因北苍术的分子检测

2.5 转基因北苍术的抗旱性检测

2.5.1 干旱胁迫下转基因北苍术根系相关基因的表达:

2.5.2 干旱胁迫下转基因北苍术根系生长状况:

3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 于佳慧,王丹丹,冷春玲

关键词: 北苍术,基因,抗旱性,农杆菌介导,根系活力

来源: 中药材 2019年09期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,农业科技

专业: 农作物

单位: 辽东学院农学院

基金: 中央财政专项(851800501),丹东市2016科技攻关项目(2016KJ001),辽东学院青年基金(20175QN050),辽宁省省级大学生创新项目

分类号: S567.239

DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2019.09.009

页码: 2013-2018

总页数: 6

文件大小: 370K

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酵母TPS1基因对干旱胁迫下北苍术的影响

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