牛传染性鼻气管炎病毒论文_任亚初,楚会萌,程凯慧,解晓莉,张亮

导读:本文包含了牛传染性鼻气管炎病毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:传染性,气管炎,病毒,荧光,基因,蛋白,犊牛。

牛传染性鼻气管炎病毒论文文献综述

任亚初,楚会萌,程凯慧,解晓莉,张亮[1](2019)在《牛传染性鼻气管炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用》一文中研究指出为快速定量检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),本研究根据IBRV的 D基因保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了能够快速检测IBRV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。特异性试验结果显示,该方法与引起牛消化道和呼吸道疾病的其它几种病毒均无交叉反应,特异性较强;敏感性试验结果显示,该方法对质粒标准品的最低检出限达6.1×10~1拷贝/μL,敏感性较高且高于普通PCR方法;重复性实验结果显示,批内、批间变异系数均小于3.0%,重复性良好。利用该方法检测了3个规模化奶牛场送检的47份奶牛鼻拭子样品,结果显示检出了12份阳性样品,与常规PCR检测方法的相比,总符合率为97.87%。本研究建立的检测IBRV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法准确可靠,为IBRV的早期快速检测和定量分析提供了技术支撑。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年10期)

何小丽,李凡飞,王文佳,张凯,程成[2](2019)在《牛传染性鼻气管炎病毒部分gB蛋白的原核表达及抗原性分析》一文中研究指出为对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gB基因进行原核表达,并对表达产物进行抗原性分析,利用笔者所在实验室已构建好的gB-BL21重组阳性菌落,进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对培养及诱导表达条件(IPTG最佳浓度、作用时间)等影响表达的因素进行优化,然后将表达的gB重组蛋白进行亲和层析纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,gB蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达蛋白的相对分子量约为32.4 ku,与预期的蛋白大小一致。经BCA(聚氰基丙烯酸正丁酯)蛋白含量测定试剂盒测定,gB重组蛋白浓度为1.84 mg/mL。Western Blot结果显示,纯化后的gB重组蛋白能被标准IBR阳性血清识别,说明表达的目的蛋白具有良好的反应原性,可作为IBRV检测的特异性抗原。试验为建立牛传染性鼻气管炎诊断方法及研究gB蛋白的功能特性提供了材料和技术理论支持。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年17期)

刘占悝,刘泽余,李智杰,孙飞雁,郭利[3](2019)在《牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒双重Nano-PCR检测方法的建立与应用》一文中研究指出为了对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)同时进行检测,提高检测效率,根据IBRV gE基因序列(GenBank登录号:L27212.1)和BVDV 5′端非编码区序列(GenBank登录号:AY-278459.1)的保守区域,分别设计1对IBRV的特异性引物和1对BVDV的特异性引物,建立用于IBRV和BVDV的双重纳米PCR(Nano-PCR)检测方法。特异性试验结果显示,该方法对牛副流感病毒3型、牛呼吸道合胞体病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒均无交叉反应,表明该方法的特异性良好。敏感性试验结果显示,该方法的最低检测量为10 fg/μL,是普通PCR的10倍,表明该方法的敏感性良好。特异性试验与敏感性试验均进行3次重复,结果一致,重复性良好。用建立的方法对38份临床样品进行检测,IBRV、BVDV及IBRV与BVDV的共感染阳性率分别为5.26%、44.74%和2.63%。综上所述,建立的Nano-PCR方法可用来对临床样品的快速诊断和检测,具有特异性强、灵敏度高、重复性好的优点。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年12期)

李成绪,齐艳萍[4](2019)在《牛传染性鼻气管炎病毒与单纯疱疹病毒的比较分析》一文中研究指出牛传染性鼻气管炎病毒和单纯疱疹病毒是常见的两种疱疹病毒。牛传染性鼻气管炎病毒主要侵害牛的呼吸系统、生殖系统和中枢神经系统,严重影响牛的生产性能,病牛通常直接扑杀不予治疗。预防该病发生以接种疫苗为主。单纯疱疹病毒主要引起人的皮肤、黏膜出现疱疹,可垂直传播,常用治疗药物有阿昔洛韦等,目前临床上无有效的预防疫苗。(本文来源于《现代畜牧科技》期刊2019年09期)

马小静,李继东,许立华[5](2019)在《牛传染性鼻气管炎病毒gD基因真核表达载体的构建及其在细胞中的表达》一文中研究指出研究目的疱疹病毒包膜糖蛋白D是病毒的主要组成成分且对于病毒侵入细胞是必不可少的,因此是病毒感染细胞期间中和抗体的主要靶标。本实验旨在构建一种能表达g D基因的真核表达载体,进一步研究该真核表达载体携带的g D基因在外源细胞中的表达情况,并深入探究其在诱导保护性免疫方面的作用。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27)

张康,张凯,王磊,张景艳,王旭荣[6](2019)在《某牛场牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒和大肠杆菌混合感染的诊断及分析》一文中研究指出为了确定甘肃省张掖市某奶牛场犊牛严重腹泻的病因,试验无菌采集发病犊牛血液、鼻黏液及粪便样品,通过病毒特异性引物的PCR检测、细菌分离鉴定及16S r DNA PCR检测及测序分析等方法对发病犊牛的病料进行检测,并对分离菌进行药敏试验。结果表明:全血及粪便等样品中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)呈阳性;从粪便中分离出大肠杆菌,且分离株对氨苄西林、头孢氨苄、环丙沙星高敏,对其他抗菌药物分别呈现不同程度的耐药。说明该奶牛场犊牛腹泻是由BVDV、IBRV和大肠杆菌混合感染引起的,应结合药敏试验结果用药,同时配合中药辅助治疗,以提高临床治疗效果。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年14期)

陈颖彬,常丽云,李林,王紫燕,赵越[7](2019)在《河北省奶牛传染性鼻气管炎病毒的分离鉴定与系统进化分析》一文中研究指出为了分离与鉴定河北省牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus, IBRV),试验对河北省某规模化奶牛场IBRV初检阳性病料进行处理,采用病毒分离培养、分离毒毒价测定、中和试验、PCR扩增、目的基因片段测序、同源性分析及系统进化树构建的方法对病毒进行鉴定和分析。结果表明:筛选出一株病变毒株,其TCID_(50)为1×10~(-4.7)/0.1 mL,分离株抗原能够被IBRV阳性血清中和,PCR扩增出大小为314 bp的特异性片段,扩增的gB基因片段共编码316个核苷酸,与GenBank中部分IBRV毒株的同源性为99.3%~100%,该毒株与BH81株(DQ006854)亲源关系较近,将其命名为HBXT-IBRV。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年13期)

张颖慧,岳华,汤承,黄建德[8](2019)在《牛传染性鼻气管炎病毒恒温隔绝式荧光PCR检测方法的建立》一文中研究指出为建立检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的恒温隔绝式荧光PCR (iiPCR)方法,本研究采用文献报道的引物和探针,通过优化反应体系,首次建立了检测IBRV核酸的iiPCR方法。结果显示该方法仅特异性检测出IBRV,而对牛病毒性腹泻-黏膜病病毒、牛副流感3型病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛腺病毒3型、牛冠状病毒、牛支原体、多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌等病原则不能检出。该方法的检测下限为2.4拷贝/μL质粒标准品,并具有良好的重复性。对临床样品的检测结果与OIE推荐的荧光定量PCR方法的检测结果一致;该方法配合PetNAD核酸萃取试剂盒,从核酸提取到报告检测结果仅需1 h,具有操作简便、快速、可现地化的特点。对9个省29份商品化冻精检测结果显示,IBRV阳性率为24%(7/29),表明我国流通的商品化冻精携带IBRV情况普遍。本研究为IBRV的现地检测提供了一个可靠的方法。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年06期)

赵敏[9](2019)在《MicroRNA-2361通过直接靶向EGR1基因抑制牛传染性鼻气管炎病毒的复制》一文中研究指出牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious Bovine Rhinotracheitis virus,IBRV)又称牛疱疹病毒Ⅰ型(Bovine herpesvirus-1,BHV-1),是引起牛传染性鼻气管炎(IBR)的病原体,常呈现脑炎、结膜炎、呼吸道感染、产奶下降以及牛致病性细菌性肺炎等临床症状,严重影响了世界养牛业的经济发展。尽管疫苗免疫可预防IBR,但该病时有发生。因此,需要深入研究IBR复制的分子机制,尤其是miRNA与IBRV复制过程中的作用及其机制等,以期发现药物靶点,进而为抗IBR新药研发提供线索和思路。miRNA是一种非编码单链RNA,可以通过碱基配对机制来调控宿主或病毒的基因表达,进而通过靶向mRNA 3'非翻译区(3'UTR)降低靶基因mRNA的表达水平。越来越多的研究表明,宿主细胞miRNA在病毒感染可以显着表达。宿主miRNA可改变细胞内环境使病毒逃避抗病毒免疫应答,或使宿主细胞触发抗病毒防御机制。例如,miRNA-649可通过靶向MALT1促进人疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)的复制。然而,与HSV-1同科的IBRV与宿主miRNA的相互作用尚未见报道。本研究通过对IBRV感染牛肾细胞MDBK后不同时间点的样品进行深度miRNA测序,与对照组相比,感染后12h有105个miRNA上调,152个miRNA下调;感染后24h有146个miRNA上调,41个miRNA下调;感染后48h有242个miRNA上调,78个miRNA下调。随后对表达差异比较显着基因进行分析,挑选出在叁个时间点表达一致的miRNA进行荧光定量PCR验证,发现miR-2361在IBRV感染后这叁个不同的时间点均显着下调。为了检测miR-2361在IBRV感染过程中的作用,将miR-2361 mimic转染MDBK细胞后进行病毒滴度检测,发现miR-2361可以抑制IBRV的复制。为了更有效地筛选miR-2361的候选靶基因,我们进行了转录组测序,通过分析IBRV感染MDBK细胞后的上调基因,并结合生物信息学工具预测的结果,早期生长反应因子1(EGR1)是miR-2361的候选靶标。随后,使用双荧光素酶报道基因检测技术进一步验证了miR-2361和EGR1的3'UTR之间的靶标关联。此外,miR-2361的过表达导致EGR1 mRNA和蛋白质水平降低,表明EGR1基因是miR-2361的靶标分子。此外,在过表达EGR1后,通过检测病毒滴度发现可以促进IBRV复制,而沉默EGR1具有相反的效果。进一步的机理研究表明,EGR1刺激IBRV UL46启动子活性,而miR-2361的过表达抑制了EGR1及UL46基因的表达,进而抑制IBRV的复制。本研究通过深度miRNA测序及转录组学测序技术发现了与IBRV复制可能相关的miRNA及EGR1基因,以二者的关系为切入点,率先发现miR-2361和EGR1分别抑制和促进IBRV的复制,揭示了miR-2361通过靶向EGR1基因抑制IBRV复制的分子机制,为抗病毒药物研发提供了靶标分子。(本文来源于《山东师范大学》期刊2019-06-05)

魏鑫[10](2019)在《牛传染性鼻气管炎病毒gD基因的原核表达及免疫学特性研究》一文中研究指出牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus,IBRV)又称牛疱疹病毒I型(Bovine herpesvirus type 1,BHV-1),它会引起一种急性、热性、接触性传染病,在感染牛之后,主要表现出高热、呼吸困难、鼻炎、窦炎和上呼吸道炎症,称为牛传染性鼻气管炎(Infectious Bovine Rhinotracheitis,IBR),又称“红鼻病”或“坏死性鼻炎”[1]。世界动物卫生组织(World Organisation for Animal Health,OIE)将IBR列为法定报告动物疫病。gD蛋白是IBRV的主要结构蛋白,它可以同时诱导体液免疫和细胞免疫,gD也是病毒复制的必需基因,在病毒吸附和侵入宿主细胞过程中起重要作用,gD还是刺激机体产生中和抗体的主要糖蛋白。因此,在IBR的所有蛋白中gD被作为IBRV特异性抗原研究的首选。本研究以本实验室于2017年从呼市周边牧场分离到的IBRV为基础,对其进行鉴定,并命名为IBRVNMHS-1。并以IBRVNMHS-1基因组为模板,设计引物特异性扩增gD基因,与表达载体pET32(+)相连,成功构建重组载体,优化诱导条件,使重组蛋白可溶性表达。以分离到的IBRV NMHS-1毒株为攻击毒,成功感染家兔建立了动物模型。将纯化后的重组蛋白制备成疫苗,并对家兔进行动物免疫试验。试验表明,家兔经过2次免疫后,成功抵制了病毒的感染。通过Western Blot,证明重组蛋白有良好的反应原性;通过动物免疫,间接ELISA方法检测兔血清抗体效价,证明重组蛋白有良好的免疫原性。综上所述,本研究成功分离到一株IBRV,并将其命名为IBRVNMHS-1株;成功诱导gD基因表达,获得了可溶性的目的蛋白;IBRV NMHS-1成功感染家兔建立了动物模型;制备的亚单位疫苗可有效保护实验动物免受强毒攻击,为IBRV的亚单位疫苗的研制提供了可能。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2019-06-01)

牛传染性鼻气管炎病毒论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gB基因进行原核表达,并对表达产物进行抗原性分析,利用笔者所在实验室已构建好的gB-BL21重组阳性菌落,进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对培养及诱导表达条件(IPTG最佳浓度、作用时间)等影响表达的因素进行优化,然后将表达的gB重组蛋白进行亲和层析纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,gB蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达蛋白的相对分子量约为32.4 ku,与预期的蛋白大小一致。经BCA(聚氰基丙烯酸正丁酯)蛋白含量测定试剂盒测定,gB重组蛋白浓度为1.84 mg/mL。Western Blot结果显示,纯化后的gB重组蛋白能被标准IBR阳性血清识别,说明表达的目的蛋白具有良好的反应原性,可作为IBRV检测的特异性抗原。试验为建立牛传染性鼻气管炎诊断方法及研究gB蛋白的功能特性提供了材料和技术理论支持。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

牛传染性鼻气管炎病毒论文参考文献

[1].任亚初,楚会萌,程凯慧,解晓莉,张亮.牛传染性鼻气管炎病毒SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J].中国预防兽医学报.2019

[2].何小丽,李凡飞,王文佳,张凯,程成.牛传染性鼻气管炎病毒部分gB蛋白的原核表达及抗原性分析[J].江苏农业科学.2019

[3].刘占悝,刘泽余,李智杰,孙飞雁,郭利.牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒双重Nano-PCR检测方法的建立与应用[J].中国兽医科学.2019

[4].李成绪,齐艳萍.牛传染性鼻气管炎病毒与单纯疱疹病毒的比较分析[J].现代畜牧科技.2019

[5].马小静,李继东,许立华.牛传染性鼻气管炎病毒gD基因真核表达载体的构建及其在细胞中的表达[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019

[6].张康,张凯,王磊,张景艳,王旭荣.某牛场牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒和大肠杆菌混合感染的诊断及分析[J].黑龙江畜牧兽医.2019

[7].陈颖彬,常丽云,李林,王紫燕,赵越.河北省奶牛传染性鼻气管炎病毒的分离鉴定与系统进化分析[J].黑龙江畜牧兽医.2019

[8].张颖慧,岳华,汤承,黄建德.牛传染性鼻气管炎病毒恒温隔绝式荧光PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报.2019

[9].赵敏.MicroRNA-2361通过直接靶向EGR1基因抑制牛传染性鼻气管炎病毒的复制[D].山东师范大学.2019

[10].魏鑫.牛传染性鼻气管炎病毒gD基因的原核表达及免疫学特性研究[D].内蒙古农业大学.2019

论文知识图

牛传染性鼻气管炎病毒分离株电...牛传染性鼻气管炎病毒电镜下的形...牛传染性鼻气管炎病毒在MDBK细胞...牛传染性鼻气管炎病毒在MDBK细胞...病料的PCR检测结果基因的PCR扩增结果

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