论文摘要
采用基因挖掘技术,从NCBI数据库发现来源于Glaciecola polaris的葡萄糖3-脱氢酶基因,该基因经密码子优化后合成,构建p ET28b-GpG3DH重组表达载体,转入大肠杆菌E. coli BL21中进行重组表达,结果显示:GpG3DH实现了部分可溶表达,其分子量为5. 5×104。随后,优化了GpG3DH的表达条件,结果发现,重组菌在TB培养基中37℃培养至OD600为0. 8时,加入IPTG至终浓度为0. 5 mmol/L,16℃诱导表达10 h,GpG3DH酶活为2. 83×10-2U/m L。进一步将重组菌用于3-酮对硝基苯井冈霉胺的细胞转化法合成,细胞用10 mmol/L的EDTA处理,在p H为7. 5、25℃的条件下转化32 h,3-酮对硝基苯井冈霉胺的产率(Y3-KpNPV)为0. 54。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 张建芬,柯薇,陈虹
关键词: 葡萄糖脱氢酶,基因挖掘,酮对硝基苯井冈霉胺,细胞转化
来源: 生物加工过程 2019年01期
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 浙江树人大学生物与环境工程学院
基金: 国家自然科学基金青年基金(21102131),浙江省自然科学基金(LY18C010002)
分类号: Q78
页码: 94-98
总页数: 5
文件大小: 320K
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标签:葡萄糖脱氢酶论文; 基因挖掘论文; 酮对硝基苯井冈霉胺论文; 细胞转化论文;