棉铃虫作为单核细胞增生李斯特菌感染模型的初步研究

论文摘要

研究单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes,简称Lm）对棉铃虫（Helicoverpa armigera）的致病性,探讨棉铃虫作为Lm感染模型的可行性。用野生株EGDe（中毒）、PrfA缺失株（EGDeΔprfA,弱毒）和PrfA组成型高表达株（EGDeΔprfA+pERL3-prfA*,高毒）腹腔微量注射4龄棉铃虫幼虫,计算半数致死量(LD50)和虫体的载菌量,同时观测棉铃虫中肠细胞的病理变化以及血细胞包囊作用和数目。实验结果显示:①EGDe、EGDeΔprfA和EGDeΔprfA+pERL3-prfA*的LD50分别为2.56×103cfu/mL、1.98×106cfu/mL和6.63×102cfu/mL。②感染Lm后,EGDe和EGDeΔprfA+pERL3-prfA*在棉铃虫体内各部分的活菌数均有所上升,而EGDeΔprfA却显著下降。③中肠病理切片显示,Lm对棉铃虫幼虫中肠细胞的损伤程度与菌株的毒性高低正相关,并且随时间延长差异更为明显。④EGDeΔprfA+pERL3-prfA*对棉铃虫血细胞的包囊作用的抑制作用最强,而EGDeΔprfA基本无抑制作用。⑤感染Lm后,棉铃虫的血细胞数量先急剧上升随后减少。72 h时,感染EGDe、EGDeΔprfA和EGDeΔprfA+pERL3-prfA*的血细胞减少量分别为45%、27%和71%。结果表明,Lm不仅能成功侵染棉铃虫幼虫并致其死亡,且其半数致死量、其对棉铃虫中肠细胞的损伤程度以及对血细胞包囊作用和数量的影响等均与细菌毒力高低有较好的关联性,表明棉铃虫幼虫（至少是4龄棉铃虫幼虫）适合作为研究Lm致病机制的昆虫模型。

论文目录

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株和昆虫

1.1.2 主要试剂

1.1.3 仪器与设备

1.2 方法

1.2.1 不同毒力Lm生长曲线及生长形态的测定

1.2.2 棉铃虫半数致死量LD50的测定

1.2.3 棉铃虫中肠病理切片的制备和观察

1.2.4 单核细胞增生李斯特菌对棉铃虫血细胞包囊作用的影响

1.2.5 血细胞计数

1.2.6 棉铃虫全虫及体内不同部分（肠道、血淋巴、体液）载菌量的测定

2 结果与分析

2.1 单核细胞增生李斯特菌的生长曲线及菌落大小

2.2 单核细胞增生李斯特菌对4龄棉铃虫幼虫的致病能力

2.2.1不同毒力单核细胞增生李斯特菌的半数致死量LD50及感染不同毒力单核细胞增生李斯特菌的棉铃虫的致死率

2.2.2 感染单核细胞增生李斯特菌后,棉铃虫全虫及体内不同部分（肠道、血淋巴、体液）的载菌量

2.2.3 不同毒力单核细胞增生李斯特菌对棉铃虫中肠组织的致病性

2.3 单核细胞增生李斯特菌对棉铃虫血细胞包囊作用和数量的影响

2.3.1 单核细胞增生李斯特菌对棉铃虫血细胞包囊作用的影响

2.3.2 棉铃虫血细胞数量变化

3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨丽玉,刘婵娟,杨诗怡,王菁妍,罗勤

关键词: 单核细胞增生李斯特菌,棉铃虫,模型,致病性

来源: 微生物学杂志 2019年06期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室

基金: 国家自然科学基金项目(31571931),遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室开放课题项目(GRIB201709),华中师范大学中央高校基本科研业务费资助项目(CCNU18TS024)

分类号: S852.61

页码: 47-55

总页数: 9

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棉铃虫作为单核细胞增生李斯特菌感染模型的初步研究

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