全细胞记录论文_王文伟,祁小燕,张雪梅

导读:本文包含了全细胞记录论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:膜片,细胞,分离法,电流,神经元,大鼠,质体。

全细胞记录论文文献综述

王文伟,祁小燕,张雪梅[1](2015)在《一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法》一文中研究指出目的:探讨一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法。此方法使玻璃电极与细胞内液保持电化学连续性,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜造成的破膜难和封接不稳,以及常规全细胞膜片钳破膜后造成的封接不稳。方法:以成骨细胞为研究对象,采用β-七叶素穿孔全细胞膜片钳技术,记录骨细胞L型钙通道电流。结果:采用这种穿孔全细胞膜片钳技术,能有效记录到成骨细胞上L型钙通道电流。结论:穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法,该方法的建立为今后更深入的研究疾病中成骨细胞的病理生理机制提供实验基础。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2015年06期)

徐祖才,徐平,张骏,雷显泽,徐忠祥[2](2012)在《新生大鼠海马神经元原代培养及膜片钳全细胞记录》一文中研究指出目的探讨一种适用于膜片钳全细胞记录的海马神经元培养方法。方法选择鼠龄在1d内的Wistar大鼠,迅速断头,取双侧海马,神经基础培养基添加B-27及L-谷氨酰胺进行神经元原代培养,培养至第10天时,使用免疫荧光技术配合神经元特异性核蛋白NeuN进行细胞鉴定;神经元的电生理特征由膜片钳全细胞记录。结果该方法所培养神经元状态良好,经鉴定发现纯度可高达100%,通过膜片钳全细胞法可记录到自发性动作电位及自发性兴奋性突触后电流。结论本方法操作简便、高效,所培养的海马神经元状态良好,适用于膜片钳全细胞记录。(本文来源于《重庆医学》期刊2012年31期)

程俊,曾晓荣,刘智飞,李鹏云,李妙龄[3](2010)在《一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法》一文中研究指出目的:探讨一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜所造成的封接不稳定。方法:以人肠系膜动脉平滑肌细胞为研究对象,采用穿孔全细胞膜片钳技术,记录人肠系膜动脉平滑肌细胞上大电导钙激活钾通道(big-conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa)宏观电流以及自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)。结果:采用这种穿孔全细胞膜片钳技术,能有效记录到人肠系膜动脉平滑肌细胞上BKCa和STOCs。结论:穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法,该方法的建立为今后更深入的研究提供实验基础。(本文来源于《泸州医学院学报》期刊2010年03期)

沈佩同,毕平,李刚[4](2010)在《双分离法记录Wistar大鼠神经元的全细胞电流》一文中研究指出背景:细胞培养与通道电流记录是全细胞膜片钳实验的主要难点。目的:介绍一种简单可行的降低全细胞膜片钳实验方法,将细胞急性分离与电流的分离技术结合起来,以提高工作效率,缩短实验的时间,从根本上降低膜片钳实验的难度。方法:SPF级出生4~7d的wistar大鼠40只,雌雄不限。采用改良的急性分离的方法制备Wistar大鼠脑皮质细胞,将大鼠脑皮质切成400~600μm厚度的薄片,在人工脑脊液中通混合气静止1h,并通以氧气。将脑组织块放入含有16u/mL(typeX)和2u/mL(typeXIV)蛋白水解酶的人工脑脊液中,孵育60min,清除消化酶。在全细胞电压钳制模式下,保持电位-80mV,给予-60mV到60mV的去极化脉冲刺激,步阶为+10mV,刺激波宽160ms。记录到跨膜总电流,在全细胞电极液里面加入70mmol/LCsCl,70mmol/LCsF;在外液中先后加入11μmol/L阻断剂河豚毒素、30mmol/L的氯化四乙胺、1mmol/L的4-AP。分别记录内向钠电流,瞬时外向钾电流和延迟整流钾电流,结果用clampfit分析处理。主要观察:①细胞的形态学观察。②全细胞电流的记录。③内向钠电流的记录。④外向钾电流的记录。结果与结论:细胞空间立体结构强,表面光滑,有完整的树突或者轴突,且细胞的活性可以在25℃室温下维持8~10h。在外液中加入1μmol/L的河豚毒素基本上可以阻断钠电流;30mmol/L的氯化四乙胺和1mmol/L的4-AP可以阻断外向钾电流。结果表明,改良的细胞急性分离方法细胞功能完好。通过电流分离技术,不改变细胞外液和电极液,仅需添加特异阻断剂,可记录到内向钠电流,瞬时外向钾电流以及延迟整流钾电流,较之传统方法可显着提高工作效率。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2010年02期)

张舟,章骏,孙传文[5](2009)在《膜片钳全细胞记录法在研究谷氨酰胺转运蛋白分子机制中的应用》一文中研究指出为了研究中性氨基酸转运蛋白-谷氨酰胺转运蛋白的结构与功能,采用膜片钳全细胞记录法测定谷氨酰胺转运蛋白2介导的电流.结果表明:谷氨酰胺转运蛋白诱导了底物氨基酸和Na+浓度依赖性电流,可用于测定底物氨基酸和Na+对转运蛋白的表观亲和常数Km,SNAT2野生型对丙氨酸的表观亲和常数KmA la为(200±5)×10-6mol/L,对Na+的表观亲和常数KmNa为(100±7)×10-3mol/L.谷氨酸转运蛋白转运底物氨基酸过程是生电的过程,在膜电势负值时氨基酸转运电流增大,可用于转运机制的研究.因此膜片钳全细胞记录法是研究谷氨酰胺转运蛋白分子机制的有效方法.(本文来源于《上海师范大学学报(自然科学版)》期刊2009年04期)

沈佩同,毕平,李刚[6](2009)在《双分离法记录wistar大鼠脑皮层神经元全细胞电流》一文中研究指出为了寻找一种简单可行的实验方法来降低全细胞膜片钳试验的难度,提高其工作效率,提出了采用改良的急性分离法与电流分离相结合技术,大幅度缩短了整个试验的时间,从根本上降低了膜片钳实验的难度,在全细胞电压钳制模式下,可以分别记录到电压门控钠,钾,钙通道电流.钠电流对TTX敏感,钾电流对TEA和4-AP敏感。(本文来源于《中国仪器仪表学会医疗仪器分会第四次全国会员代表大会暨2009年学术年会论文集》期刊2009-04-08)

邵金平,杨卓[7](2008)在《快反应电压敏感染料脑片功能性成像结合全细胞膜片钳记录的体外研究》一文中研究指出在大脑的许多区域,局部回路的连接被分离成特定的层状体或神经纤维球,如海马、大脑新皮质和嗅球等。在解剖学上这些区域相互分隔。而功能成像对表现回路特征发挥着独(本文来源于《天津医药》期刊2008年04期)

查定军,王智明,薛涛,林颖,邱建华[8](2008)在《应用穿孔全细胞膜片钳记录技术研究培养大鼠耳蜗螺旋神经节神经元的基本电生理特性》一文中研究指出为了深入了解耳蜗螺旋神经节(SG)神经元的基本电生理特点,本研究首先成功培养了急性分离的大鼠SG神经元,然后采用穿孔全细胞膜片钳记录技术观察了培养SG神经元的基本电生理特性。结果表明,可从培养的SG神经元记录到动作电位,且不同的SG神经元具有异质性的放电特征。上述结果提示穿孔全细胞膜片钳记录技术可用于体外培养耳蜗SG神经元的电生理特征研究,为开展听觉信息传导和调控的功能研究开辟了新途径。(本文来源于《神经解剖学杂志》期刊2008年02期)

朱俊英,闫慧,高荣孚,尹伟伦[9](2007)在《中国沙棘子叶叶肉细胞电流全细胞记录的研究》一文中研究指出实验得出适合膜片钳实验的耐盐木本植物中国沙棘子叶原生质体的游离条件,即取当天脱壳的子叶,放入渗透浓度为0.88 mol/L,pH为5.8,酶液的组分为10 g/LCellulase R-10、0.5 g/LPectolyase Y-23、1.5 g/LMacrozymeR-10、1 g/L Hemicellulase、1 g/L BSA、1 g/L PVP-40、2 mmol/L CaCl2、10 mmol/L Mes和5 mmol/L Vc的溶液中,在26℃、黑暗条件下,静置4 h。并且利用Multiclamp 700B放大器和Clampex 9.2软件,记录到了该原生质体质膜全细胞内向K+通道电流(-459.137 pA及-290.527 pA)和非选择性阳离子通道的外向电流(8.036 pA)。这为沙棘属木本植物细胞的电生理特性及其耐盐性机制关系的研究奠定基础。(本文来源于《江西农业大学学报》期刊2007年05期)

张鹏俊,张宇,张文平,谭爱娟,张策[10](2006)在《大鼠海马CAⅠ区锥体细胞的急性分离及全细胞记录方法》一文中研究指出目的寻求一种适用于膜片钳技术(PCT)的大鼠海马CAⅠ区锥体细胞的急性分离及全细胞记录方法。方法采用酶加机械分离的方法制备10~16d鼠龄的海马CAⅠ区锥体神经元。其电生理学特性测定用全细胞PCT。结果所分离的85%神经元不仅形态学特征保存完好,而且保存了主要的离子通道活性。结论成功建立了一种简单、快速、可靠的适用于PCT的大鼠皮层神经元急性分离方法。(本文来源于《中国药物与临床》期刊2006年08期)

全细胞记录论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨一种适用于膜片钳全细胞记录的海马神经元培养方法。方法选择鼠龄在1d内的Wistar大鼠,迅速断头,取双侧海马,神经基础培养基添加B-27及L-谷氨酰胺进行神经元原代培养,培养至第10天时,使用免疫荧光技术配合神经元特异性核蛋白NeuN进行细胞鉴定;神经元的电生理特征由膜片钳全细胞记录。结果该方法所培养神经元状态良好,经鉴定发现纯度可高达100%,通过膜片钳全细胞法可记录到自发性动作电位及自发性兴奋性突触后电流。结论本方法操作简便、高效,所培养的海马神经元状态良好,适用于膜片钳全细胞记录。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

全细胞记录论文参考文献

[1].王文伟,祁小燕,张雪梅.一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法[J].中国病理生理杂志.2015

[2].徐祖才,徐平,张骏,雷显泽,徐忠祥.新生大鼠海马神经元原代培养及膜片钳全细胞记录[J].重庆医学.2012

[3].程俊,曾晓荣,刘智飞,李鹏云,李妙龄.一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法[J].泸州医学院学报.2010

[4].沈佩同,毕平,李刚.双分离法记录Wistar大鼠神经元的全细胞电流[J].中国组织工程研究与临床康复.2010

[5].张舟,章骏,孙传文.膜片钳全细胞记录法在研究谷氨酰胺转运蛋白分子机制中的应用[J].上海师范大学学报(自然科学版).2009

[6].沈佩同,毕平,李刚.双分离法记录wistar大鼠脑皮层神经元全细胞电流[C].中国仪器仪表学会医疗仪器分会第四次全国会员代表大会暨2009年学术年会论文集.2009

[7].邵金平,杨卓.快反应电压敏感染料脑片功能性成像结合全细胞膜片钳记录的体外研究[J].天津医药.2008

[8].查定军,王智明,薛涛,林颖,邱建华.应用穿孔全细胞膜片钳记录技术研究培养大鼠耳蜗螺旋神经节神经元的基本电生理特性[J].神经解剖学杂志.2008

[9].朱俊英,闫慧,高荣孚,尹伟伦.中国沙棘子叶叶肉细胞电流全细胞记录的研究[J].江西农业大学学报.2007

[10].张鹏俊,张宇,张文平,谭爱娟,张策.大鼠海马CAⅠ区锥体细胞的急性分离及全细胞记录方法[J].中国药物与临床.2006

论文知识图

在实验组、体内对照组、体外对照组中...典型的ON-OFF型视网膜神经节细胞哺乳动物与果蝇嗅觉系统的对比图典型的无光刺激反应的视网膜神经节细胞无光刺激反应的视网膜神经节细胞诱发的...不同刺激点阵对激活细胞的影响

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全细胞记录论文_王文伟,祁小燕,张雪梅
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