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七玄汤对实验性鼠伤寒沙门氏菌感染的保护效果观察

2020-12-02阅读(460)

七玄汤对实验性鼠伤寒沙门氏菌感染的保护效果观察

论文摘要

鼠伤寒沙门氏菌是沙门氏菌中分离率最高、耐药性最强的血清型之一,感染后可引起急、慢性肠胃炎及其他局部炎症,严重时可全身感染致败血症甚至死亡,因此针对鼠伤寒沙门氏菌感染的新药研究十分重要。七玄汤是一副自拟中药复方,其成分具有良好的抗菌抗炎活性。本课题研究了七玄汤对感染鼠伤寒沙门氏菌的小鼠组织损伤的影响,并初步了探索七玄汤的作用机制。试验通过腹腔注射鼠伤寒沙门氏菌建立了小鼠感染模型,并设置了七玄汤125mg/kg、250 mg/kg、500 mg/kg三个剂量组,自攻菌前3 d开始给药连续5 d,第4 d除对照组外,各组小鼠腹腔注射1×106 CFU鼠伤寒沙门氏菌,观察感染小鼠的临床症状和剖解病变,并于攻菌后24 h通过Western Blot法检测关键蛋白,分析其作用机制。结果如下:1.小鼠的鼠伤寒沙门氏菌感染模型研究（1）攻菌剂量为1×106CFU组小鼠死亡率接近半数,且出现精神萎靡和明显食欲下降,与对照组相比体重极显著下降（p<0.01）,因此将1×106 CFU确定为攻菌剂量。（2）攻菌后小鼠死亡高峰时间段为12-24 h,且24 h时小鼠大肠NLRP3和caspase-1 p10蛋白表达量明显高于对照组,因此将24 h作为后续试验采样时间。2.七玄汤对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠的保护效果研究（1）高剂量500 mg/kg的七玄汤可显著降低鼠伤寒沙门氏菌感染死亡率（p<0.05）。（2）不同剂量的七玄汤均能够在一定程度上减轻小鼠大肠上皮细胞脱落和肺脏的炎性细胞浸润现象,其中高剂量500 mg/kg组效果最好。（3）不同剂量的七玄汤均能极显著抑制鼠伤寒沙门氏菌引起的白介素（IL）-1β和白介素（IL）-18血清水平升高（p<0.01）。3.七玄汤的作用机制研究与模型组相比,不同剂量的七玄汤均可极显著抑制细胞焦亡的必须蛋白GSDMD p30的表达水平（p<0.01）,极显著抑制炎性小体NLRP3的表达水平（p<0.01）,以及经典与非经典焦亡通路的关键蛋白caspase-1 p10和caspase-11 p20的表达水平（p<0.01）。综上所述,七玄汤对鼠伤寒沙门氏菌感染的小鼠具有保护作用,可显著改善小鼠临床症状,减轻大肠和肺部的病变,降低死亡率及炎症水平。鼠伤寒沙门氏菌感染与细胞焦亡息息相关,七玄汤可能是通过抑制经典焦亡通路和非经典焦亡通路的关键蛋白caspase-1 p10和caspase-11 p20的表达,进而抑制焦亡必须蛋白GSDMD p30的表达,起到抑制细胞焦亡的作用,从而对机体产生保护效果。这些结果将有助于进一步研究复方中药“七玄汤”,以及预防或治疗鼠伤寒沙门氏菌引起的疾病。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 主要缩略词
  • 第一章 文献综述与研究目的
  •   1 鼠伤寒沙门氏菌病的研究概况
  •     1.1 病原学
  •     1.2 流行病学
  •     1.3 临床症状与危害
  •   2 鼠伤寒沙门氏菌的致病机制
  •     2.1 鼠伤寒沙门氏菌感染的发病机制
  •     2.2 鼠伤寒沙门氏菌感染中的炎症反应
  •     2.3 鼠伤寒沙门氏菌感染中的细胞焦亡
  •   3 鼠伤寒沙门氏菌病的防治
  •     3.1 现代医学对鼠伤寒沙门氏菌病的防治概况
  •     3.2 中医对鼠伤寒沙门氏菌病的防治概况
  •   4 研究目的与意义
  • 第二章 “七玄汤”组分的确定及急性毒性试验
  •   1 材料与方法
  •     1.1 材料
  •     1.2 方法
  •   2 试验结果
  •     2.1 治疗沙门氏菌病的中药方剂统计结果
  •     2.2 七玄汤组分的确定
  •     2.3 七玄汤最大给药量（MLD）测定结果
  •   3 讨论
  •   4 小结
  • 第三章 实验性鼠伤寒沙门氏菌感染模型的建立
  •   1 材料与方法
  •     1.1 材料
  •     1.2 方法
  •   2 试验结果
  •     2.1 鼠伤寒沙门氏菌对小鼠临床症状的影响
  •     2.3 鼠伤寒沙门氏菌对小鼠大肠NLRP3和caspase-1 表达的影响
  •   3 讨论
  •   4 小结
  • 第四章 七玄汤对实验性鼠伤寒沙门氏菌感染的保护效果观察
  •   1 材料与方法
  •     1.1 材料
  •     1.2 方法
  •   2 试验结果
  •     2.1 七玄汤对鼠伤寒小鼠临床症状的影响
  •     2.2 七玄汤对鼠伤寒小鼠脏器指数的影响
  •     2.3 七玄汤对鼠伤寒小鼠肺和大肠病变的影响
  •     2.4 七玄汤对鼠伤寒小鼠炎症因子水平的影响
  •   3 讨论
  •   4 小结
  • 第五章 七玄汤的作用机制初探
  •   1 材料与方法
  •     1.1 材料
  •     1.2 方法
  •   2 试验结果
  •     2.1 七玄汤对鼠伤寒小鼠肺和大肠GSDMD表达的影响
  •     2.2 七玄汤对鼠伤寒小鼠肺和大肠NLRP3、caspase-1 表达的影响
  •     2.3 七玄汤对鼠伤寒小鼠肺和大肠caspase-11 表达的影响
  •   3 讨论
  •   4 小结
  • 第六章 主要结论与创新点
  •   1 主要结论
  •   2 创新点
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简历
  • 附图

    • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 张然

    导师: 贺常亮,宋舟

    关键词: 七玄汤,鼠伤寒沙门氏菌,炎症,细胞焦亡,小鼠

    来源: 四川农业大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 四川农业大学

    分类号: S852.61

    DOI: 10.27345/d.cnki.gsnyu.2019.000766

    总页数: 77

    文件大小: 3160k

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