甲醇诱导论文_仵雁北,何强,Liangli(Lucy),Yu,Quynhchi,Pham,Lumei,Cheung

导读:本文包含了甲醇诱导论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:甲醇,酵母,诱导,碳源,紫金,细胞,效率。

甲醇诱导论文文献综述

仵雁北,何强,Liangli(Lucy),Yu,Quynhchi,Pham,Lumei,Cheung[1](2019)在《食源性吲哚-3-甲醇对细菌诱导的C57BL/6J小鼠结肠炎的作用及其机制》一文中研究指出吲哚-3-甲醇(I3C)衍生于十字花科蔬菜中的重要成分硫代葡萄糖苷,因其具有显着的抗炎及抗癌活性而受到广泛关注,但其潜在的作用机制仍难以捉摸。因此,本文采用啮齿柠檬酸杆菌(Citrobacter rodentium,Cr)感染建立小鼠急性结肠炎模型,研究了I3C对Cr体外增殖、Cr对结肠细胞Caco-2黏附作用以及抵抗型小鼠肠道免疫和肠道炎症的影响。结果表明,I3C在浓度为0.5 mM时就可显着抑制Cr在厌氧及有氧条件下的体外增殖;25μM的I3C可显着降低Cr对Caco-2细胞的体外黏附作用。动物实验结果表明,C57BL/6J小鼠在普通饮食或I3C饮食下均被Cr感染;与对照组感染小鼠相比,食用1μmol I3C/g饮食可显着降低抵抗型感染小鼠粪便及结肠中的Cr数量,并缓解Cr感染引发的小鼠结肠粘膜层的增生。此外,I3C饮食下感染小鼠结肠中Cr诱导的炎症标记物(如IL-17A,IL-6和IL1β)的表达相较于对照组感染小鼠显着减弱,而细胞毒性T细胞标志物CD8和FasL以及调节性T细胞标志物Foxp3和IL10的mRNA水平显着增加。上结果提示,I3C可能通过抑制Cr生长及Cr在结肠内的黏附作用、提高抵抗型小鼠的肠道免疫功能等方式,抑制Cr在其肠道中的入侵和定植,并缓解Cr感染诱发的结肠炎症反应及组织病变。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2019-11-13)

赵奕欣,张建国[2](2019)在《毕赤酵母的非甲醇诱导系统研究进展》一文中研究指出毕赤酵母是一种能以甲醇为唯一碳源生长的甲基营养型酵母,常用作表达外源蛋白的细胞工厂。目前毕赤酵母常用的高效启动子AOX1(P_(AOX1))是一个严格的底物依赖型启动子,受甲醇的严格诱导,受葡萄糖、甘油、乙醇等非甲醇碳源抑制。但是甲醇有毒、易燃、易爆的特性使得其在食用、医用产品生产等领域受到很大的限制。本文将主要从P_(AOX1)机制改造、新型启动子和非甲醇诱导物研发的角度阐述毕赤酵母非甲醇诱导的研究进展。(本文来源于《工业微生物》期刊2019年03期)

严建,贾禄强,丁健,史仲平[3](2019)在《甲醇周期诱导控制强化毕赤酵母生产猪α干扰素》一文中研究指出利用甲醇营养型毕赤酵母生产猪α干扰素(pIFN-α),诱导过程一般在高细胞密度、定值控制甲醇浓度于5~10g/L下进行,此时、溶解氧浓度(DO)自然下降到接近于0的水平。如果高好氧的毕赤酵母长期处在高甲醇/低DO的诱导浓度环境会导致其代谢活性恶化,胞内甲醇积累严重,pIFN-α表达生产效率低。为此,提出了一种甲醇周期诱导控制策略来强化pIFN-α生产。先将甲醇控制于高浓度达7h,再降低甲醇流加速率,将DO控制在20%左右约4h,一共重复6个循环。采用上述周期控制策略,毕赤酵母代谢活性可以长期维持在较高水平;胞内甲醇处于极低水平(≤0. 003g/g DCW),解除了甲醇毒性效应; pIFN-α活性达到3. 90×10~7IU/ml的最高水平,是定值控制甲醇浓度时的1. 86倍。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2019年06期)

刘亭,张煜彬,陆定艳,宋菲,张晓红[4](2018)在《紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用》一文中研究指出目的探讨紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症的抑制作用。方法脂多糖刺激RAW264. 7细胞建立体外炎症模型后,加入不同质量浓度(50、100、200、400 mg/L)紫金龙氯仿-甲醇组分,ELISA法或比色法检测白介素-6 (IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)含有量,Western blot法测定诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧化酶-2 (COX-2)蛋白表达,以及核转录因子κ转抑制蛋白α(IκBα)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(Erk1/2)磷酸化水平。结果紫金龙氯仿-甲醇组分可显着抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、NO、PGE2释放(P <0. 05,P <0. 01),下调i NOS、COX-2蛋白水平(P <0. 01),降低p38、JNK、Erk1/2、IκBα磷酸化水平(P <0. 05,P <0. 01)。结论紫金龙氯仿-甲醇组分可有效抑制脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症,其机制可能与抑制NF-κB、MAPKs信号通路激活、减少炎症因子释放有关。(本文来源于《中成药》期刊2018年10期)

席珏敏,陈俊英,李多,邱丽娟,潘玥[5](2019)在《甲醇诱导条件对登革病毒四型联合重组包膜蛋白Ⅲ区表达的影响》一文中研究指出目的探讨甲醇诱导浓度和诱导时间对登革病毒(dengue virus,DENV)四型联合重组包膜蛋白Ⅲ区(envelope domainⅢ,EDⅢ)表达的影响,以期实现该蛋白在毕赤酵母中的高效表达。方法采用不同浓度甲醇(0. 05%、0. 1%、0. 25%、0. 5%、0. 75%、1%、1. 5%、2%、2. 5%、3%、5%、7. 5%)诱导表达带His标签的DENV四型联合重组EDⅢ蛋白,分别诱导18、24、30、48、72 h,样品经Western blot检测。最佳条件下诱导表达的蛋白液经Ni-Agarose His亲和层析纯化后,进行10%SDS-PAGE检测。结果最佳甲醇诱导浓度为2. 5%,最佳甲醇诱导时间为72 h。纯化产物经10%SDS-PAGE检测,于相对分子质量约41 000处可见单一目的蛋白条带,纯度为99%。结论当甲醇浓度为2. 5%,诱导时间为72 h时,可实现DENV四型联合重组EDⅢ蛋白在毕赤酵母中的高效表达。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年02期)

槐强强[6](2018)在《调控甲醇诱导时间优化毕赤酵母生产甜蛋白过程及其碳/能量代谢模式》一文中研究指出甲醇营养型毕赤酵母是一种高效的外源蛋白表达系统,该系统具有分子遗传操作方便、细胞易于达到高浓度、外源蛋白表达水平相对较高的特性。重组毕赤酵母表达外源蛋白的过程中,一般是在细胞达到高浓度(100 g-DCW·L~(-1)左右)后启动甲醇诱导。也有报道指出,在较低细胞浓度(50 g-DCW·L~(-1)左右)下启动甲醇诱导可以有效地控制整个发酵过程的溶解氧浓度,缓解毒副产物的积累,促进目标蛋白的表达。但是该操作策略下甲醇/能量调控机制不明,相关研究报道很少。论文以生产表达甜味蛋白(monellin)的甲醇利用慢型重组毕赤酵母为模式菌株,通过在线分析计量甲醇消耗速率、CO_2释放速率和O_2摄取速率,探讨了在不同细胞浓度下启动甲醇诱导、外源蛋白表达体系的甲醇/能量代谢模式,分析了在低细胞浓度下启动甲醇诱导、同时将诱导温度控制在30?C策略下monellin得以高效合成的原因。论文主要研究结果如下:(1)在不同细胞浓度(100 g-DCW·L~(-1)和50 g-DCW·L~(-1))下启动甲醇诱导,并将温度控制在30?C和20?C,比较不同策略下毕赤酵母表达的monellin浓度。低细胞浓度下启动甲醇诱导同时将温度控制在30?C策略下monellin浓度达到2.62 g·L~(-1)的最高水平,是高细胞浓度启动甲醇诱导策略下monellin浓度的2.5~4.9倍。(2)低细胞浓度启动甲醇诱导并将温度控制在30?C策略下,monellin比合成速率与细胞比生长速率完全耦联、且耦联系数最大,细胞比生长速率较高;甲醇异化供能途径中用于能量烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)合成的甲醇消耗比率较大,可为monellin合成提供充足的能量;走向合成monellin前体物质途径的碳流最大(65%),且能与用于ATP再生的碳流形成最佳匹配。该策略下理论NADH(能量)利用效率η最高,η在甲醇诱导的绝大部分时段(89%)处于高水平(η>0.8),表明供能途径中产生的NADH能够高效地用于ATP再生以支撑monellin合成。(3)为验证低细胞浓度启动甲醇诱导促进外源蛋白表达的通用性,将表达人血清白蛋白-人成纤维细胞生长因子21融合蛋白(HSA-FGF21)的甲醇利用快型菌作为验证菌株。分别在不同细胞浓度下启动甲醇诱导。低细胞浓度诱导策略下目标蛋白的浓度达到107.8 mg·L~(-1),是相应诱导温度、高细胞浓度诱导策略下最高目标蛋白浓度的3.3倍。碳代谢/能量代谢模式与monellin的表达生产性能基本相同。在较低细胞浓度启动甲醇诱导、并在常温(30?C)条件下的通用能力得到了一定程度的验证。(本文来源于《江南大学》期刊2018-06-01)

王迎政,喻晓蔚,徐岩[7](2018)在《巴斯德毕赤酵母甲醇诱导表达磷脂酶A_2的转录组学分析》一文中研究指出【目的】基于转录组学技术研究表达磷脂酶A_2的毕赤酵母重组菌在甲醇诱导表达外源蛋白时的基因表达差异,从而解析外源蛋白高效诱导表达机制,为进一步工程菌株的改造提供理论支撑。【方法】以一株产磷脂酶(PLA_2)的毕赤酵母为出发菌株,采用RNA-Seq二代测序方法,研究在甘油培养和甲醇诱导两种条件下,重组毕赤酵母转录组基因表达差异情况。【结果】重组毕赤酵母中共鉴定到5225个转录本。甘油培养与甲醇诱导相比,共有857个基因发生显着变化。依据代谢途径分类,差异基因集中在核糖体成分、甲醇代谢、磷酸戊糖途径、糖酵解途径、柠檬酸循环、乙醛酸循环以及蛋白质加工过程。【结论】通过分析甲醇诱导前后的差异表达基因,结果表明碳源改变对胞内代谢会产生全局影响。本研究结果为进一步研究毕赤酵母表达外源蛋白的机制提供了基础。(本文来源于《微生物学报》期刊2018年01期)

蓝娜娜,张薷月,苏然,杨倩,张建国[8](2018)在《非甲醇诱导重组毕赤酵母表达木聚糖酶的条件优化》一文中研究指出以1株表达木聚糖酶的重组毕赤酵母为试材,首先优化了甲醇诱导的培养条件,进而采用甲酸铵作为诱导剂,联合山梨醇或者甲醇诱导重组毕赤酵母表达木聚糖酶。结果表明,甲醇诱导时木聚糖酶活力最高达到3 403.8 U/mL,单位细胞浓度活力为97.5 U/mL OD600。甲酸铵诱导毕赤酵母醇氧化酶1启动子的强度为甲醇诱导时的40.9%。联合0.5%甲酸铵和0.5%山梨醇时木聚糖酶活力为2 032.0 U/mL,单位细胞浓度的木聚糖酶活力为甲醇诱导时的1.54倍。这表明甲酸铵可以作为非甲醇诱导剂诱导毕赤酵母表达外源蛋白,并且联合山梨醇可以使重组毕赤酵母高效表达外源蛋白。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2018年03期)

槐强强,贾禄强,丁健,陈珊珊,孙佼文[9](2018)在《通过在低细胞浓度下启动甲醇诱导、优化碳/能量代谢模式促进毕赤酵母表达Monellin》一文中研究指出重组毕赤酵母生产表达外源蛋白的过程中,一般在细胞达到高密度后开始启动甲醇诱导。也有报道指出,在较低细胞浓度下,启动甲醇诱导可以有效地控制整个发酵过程的溶解氧浓度,缓解毒副产物的积累,促进目标蛋白的表达。但是,该操作策略下,甲醇/能量调控机制不明,相关研究报道很少。文中以生产表达monellin(甜味蛋白)的重组毕赤酵母为模式菌株,通过在线分析计量甲醇消耗速率、CO2释放速率和O2摄取速率,探讨了不同细胞浓度下启动甲醇诱导和外源蛋白表达体系的甲醇/能量代谢模式。结果表明,在较低细胞浓度(50 g DCW/L)启动诱导并将温度控制在30℃,走向合成monellin前体物质途径的碳流最大(65%),且能与用于ATP再生的碳流形成最佳匹配;monellin的比合成速率与细胞比生长速率完全耦联,且耦联系数最大,比生长速率也较高;理论NADH(能量)利用效率η最高,η在甲醇诱导的绝大部分时段(89%)处于高水平(≥0.8),可以为monellin合成提供足够的能量。因此,该操作条件下,monellin浓度达到2.62 g/L的最高水平,是高细胞密度(100 g DCW/L)启动诱导策略下monellin浓度的2.5-4.9倍。(本文来源于《生物工程学报》期刊2018年02期)

钟韬,柳贤德[10](2017)在《苦丁茶甲醇提取物对过氧化氢诱导巨噬细胞炎症的影响》一文中研究指出通过苦丁茶甲醇提取物和绿原酸对过氧化氢诱导巨噬细胞(RAW264.7)的处理,分析苦丁茶提取物和绿原酸对氧化应激模型一氧化氮(NO),IL-6及TNF-α的影响。结果表明,苦丁茶甲醇提取物和绿原酸对巨噬细胞不产生毒性,但呈剂量依赖性显着降低过氧化氢(H_2O_2)诱导巨噬细胞的NO水平(p<0.05),并且显着提高过氧化氢诱导巨噬细胞的IL-6水平(p<0.05)和TNF-α水平(p<0.05)。苦丁茶甲醇提取物和绿原酸可降低巨噬细胞的NO来减少其氧化应激,但对过氧化氢诱导巨噬细胞的IL-6和TNF-α显著提高,似乎与过氧化氢一起促进其细胞凋亡。苦丁茶甲醇提取物和绿原酸对巨噬细胞的影响较为复杂,需要进行更进一步研究。(本文来源于《农产品加工》期刊2017年09期)

甲醇诱导论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

毕赤酵母是一种能以甲醇为唯一碳源生长的甲基营养型酵母,常用作表达外源蛋白的细胞工厂。目前毕赤酵母常用的高效启动子AOX1(P_(AOX1))是一个严格的底物依赖型启动子,受甲醇的严格诱导,受葡萄糖、甘油、乙醇等非甲醇碳源抑制。但是甲醇有毒、易燃、易爆的特性使得其在食用、医用产品生产等领域受到很大的限制。本文将主要从P_(AOX1)机制改造、新型启动子和非甲醇诱导物研发的角度阐述毕赤酵母非甲醇诱导的研究进展。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

甲醇诱导论文参考文献

[1].仵雁北,何强,Liangli(Lucy),Yu,Quynhchi,Pham,Lumei,Cheung.食源性吲哚-3-甲醇对细菌诱导的C57BL/6J小鼠结肠炎的作用及其机制[C].中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集.2019

[2].赵奕欣,张建国.毕赤酵母的非甲醇诱导系统研究进展[J].工业微生物.2019

[3].严建,贾禄强,丁健,史仲平.甲醇周期诱导控制强化毕赤酵母生产猪α干扰素[J].中国生物工程杂志.2019

[4].刘亭,张煜彬,陆定艳,宋菲,张晓红.紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用[J].中成药.2018

[5].席珏敏,陈俊英,李多,邱丽娟,潘玥.甲醇诱导条件对登革病毒四型联合重组包膜蛋白Ⅲ区表达的影响[J].中国生物制品学杂志.2019

[6].槐强强.调控甲醇诱导时间优化毕赤酵母生产甜蛋白过程及其碳/能量代谢模式[D].江南大学.2018

[7].王迎政,喻晓蔚,徐岩.巴斯德毕赤酵母甲醇诱导表达磷脂酶A_2的转录组学分析[J].微生物学报.2018

[8].蓝娜娜,张薷月,苏然,杨倩,张建国.非甲醇诱导重组毕赤酵母表达木聚糖酶的条件优化[J].食品与发酵工业.2018

[9].槐强强,贾禄强,丁健,陈珊珊,孙佼文.通过在低细胞浓度下启动甲醇诱导、优化碳/能量代谢模式促进毕赤酵母表达Monellin[J].生物工程学报.2018

[10].钟韬,柳贤德.苦丁茶甲醇提取物对过氧化氢诱导巨噬细胞炎症的影响[J].农产品加工.2017

论文知识图

重组酵母KhCSa菌株细胞表面水解活力(...蛋白的WesternBlot鉴定Fig2.7T...启动子0G,G石和IGZ相对强度的SDS-PAGE图谱(考马斯亮蓝染...不同诱导时间发酵上清总蛋白电泳结果重组转化子的PCR筛选Fig.3-27PCRscr...

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