马建霞[1]2004年在《过氧化物酶体增殖物激活受体γ激活剂对胃癌细胞MKN-45生长的影响》文中提出目的:研究PPARγ在人胃癌组织及胃癌细胞株MKN-45的表达,PPARγ激活剂能抑制胃癌细胞的生长引起原癌基因c-myc表达的变化及肿瘤细胞周期的变化,探讨PPARγ在不同病理分型的胃癌组织中表达的不同,以及PPARγ激活剂对肿瘤细胞生长影响的作用机制。方法:采用ABC免疫组织化学方法,测定36例胃癌手术标本中PPARγ表达,同时随机抽取30例慢性萎缩性胃炎,20例胃黏膜肠化、25例胃黏膜不典型增生作对照研究。采用RT-PCR法检测胃癌细胞MKN-45中PPARγ的表达,后采用不同浓度的吡格列酮和罗格列酮干预细胞的生长,MTT法检测两种药物对胃癌细胞株的增殖活性的效应,RT-PCR法检测药物干预前后c-myc基因表达的变化以及流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果:免疫组化提示PPARγ阳性率在胃癌中是47.2%,胃黏膜不典型增生是26.7%,慢性胃炎是6.7%。胃黏膜不典型增生及胃癌与慢性胃炎比,PPARγ表达率显著升高。PPARγ在胃癌细胞株MKN-45中有表达,0.01 μmol/L吡格列酮和罗格列酮对MKN-45细胞的增殖无明显影响,1 μmol·L-1吡格列酮和罗格列酮作用48小时则明显降低MKN-45细胞的存活率,与对照组比较有显着差异(P<0.05),随着药物浓度增加和培养时间延长,这一作用愈加明显。随着药物浓度的增加,c-myc基因的表达呈下降趋势,流式细胞结果显示有,1μmol·L-1吡格列酮、罗格列酮处理MKN-45细胞未出现凋亡峰,细胞周期显示细胞停滞于G1期。而100 μmol·L-1吡格列酮、罗格列酮处理MKN-45细胞48小时后出现凋亡峰,其凋亡率分别为66.96%、49.24%。结论:PPARγ在胃癌及癌前病变中表达上调,PPARγ的表达可能是慢性胃炎发展到胃黏膜不典型增生乃至胃癌的分子标志之一。PPARγ在胃癌细胞株MKN-45中有表达,PPARγ激活剂吡格列酮和罗格列酮均抑制胃癌细胞的生长,且引起c-myc基因表达的下调和细胞的凋亡,其可能是PPARγ激活剂抑制MKN45细胞生长的机制之一。
李小军[2]2007年在《PPARγ、VEGF、VEGFC在人胃癌的表达以及罗格列酮对胃癌细胞生长、新生血管形成和淋巴管形成影响及其机制》文中研究表明目的：研究PPARγ、VEGF、VEGF-C在人胃癌组织中表达的意义和叁者之间的相关性；探讨PPARγ在胃癌细胞株MKN-45、MKN-28中的表达；PPARγ配体罗格列酮抑制胃癌细胞的分化，诱导凋亡作用；罗格列酮对VEGF和VEGF-C表达的影响，了解PPARγ激动剂对胃癌血管和淋巴管增生的抑制作用。方法：分别采用ABC和SP法免疫组织化学方法，测定40例胃癌手术标本中PPARγ、VEGF、VEGF-C表达，同时选取相同病例的癌旁组织，癌旁正常组织作为对照研究；采用RT-PCR方法测定36例胃癌手术标本中PPARγ、VEGF、VEGF-C的表达，同时选取相同病例的胃正常组织作为对照；采用RT-PCR法检测PPARγ在胃癌细胞MKN-45和MKN-28中的表达；采用不同浓度的罗格列酮作用24h、48h、72h干预胃癌细胞的生长，MTT法检测罗格列酮对不同分化程度胃癌细胞增殖活性的效应；采用流式细胞术检测罗格列酮对两种细胞的凋亡和周期的影响；实时荧光定量PCR检测不同浓度罗格列酮在不同时间点对胃癌细胞MKN-45的VEGF和VEGF-C表达的影响；采用Western-bloting检测不同浓度的罗格列酮作用MKN-45细胞48小时对VEGF蛋白表达的调节作用。结果：免疫组化提示PPARγ阳性率在胃癌中是72.5％，癌旁组织中是25％，癌旁正常组织中是17.5％，叁者表达差异有统计学意义；VEGF阳性率在胃癌中是75％，癌旁组织中是40％，癌旁正常组织中是10％，叁者表达差异有统计学意义；VEGF-C阳性率在胃癌中是55％，癌旁组织中是10％，癌旁正常组织中是7.5％，叁者表达差异有统计学意义。PPARγ的蛋白表达与VEGF表达有关(r=0.388，p=0.013)，与VEGF-C的表达有关(r=0.441，p=0.004)；RT-PCR提示PPARγmRNA在胃癌中是1.17±0.10，癌旁正常组织中是0.79±0.23，二者表达差异有统计学意义；VEGF在胃癌中是1.02±0.25，癌旁正常组织中是0.65±0.11，二者表达差异有统计学意义。VEGF-C在胃癌中是2.107±0.52，癌旁正常组织中是0.62±0.17，二者表达差异有统计学意义。PPARγmRNA的表达与VEGF表达有关(t=3.24，p=0.003)，与VEGF-C的表达有关(t=-2.624，p=0.014)；RT-PCR方法检测到PPARγ、VEGF、VEGF-C在胃癌细胞MKN-45和MKN-28中有表达；MTT方法检测到罗格列酮对MKN-45和MKN-28的增殖影响有浓度和时间依赖性；流式细胞术检测到罗格列酮能够诱导MKN-45和MKN-28凋亡，凋亡率有浓度依赖性，细胞周期停滞在G1期；实时荧光定量PCR的结果表明：不同浓度的罗格列酮作用24h、48h、72h对胃癌MKN-45细胞VEGF、VEGF-C表达下调有剂量依赖性；采用Western-blotting方法结果显示不同浓度罗格列酮作用MKN-45细胞48h可以影响VEGF的表达，并且有浓度依赖性。结论：PPARγ激动剂罗格列酮可能通过诱导凋亡及将细胞阻滞在G1期，抑制人类胃癌MKN-45和MKN-28的生长；通过抑制VEGF和VEGF-C的表达抑制胃癌细胞MKN-45新生血管形成和淋巴管形成进一步抑制胃癌细胞的生长和通过血管、淋巴管转移。提示罗格列酮可能是治疗胃癌的有效试剂。
参考文献：
[1]. 过氧化物酶体增殖物激活受体γ激活剂对胃癌细胞MKN-45生长的影响[D]. 马建霞. 东南大学. 2004
[2]. PPARγ、VEGF、VEGFC在人胃癌的表达以及罗格列酮对胃癌细胞生长、新生血管形成和淋巴管形成影响及其机制[D]. 李小军. 四川大学. 2007