李华贤
(山西省临汾职业技术学院山西临汾041000)
【摘要】目的:比较正常老年大鼠和青年大鼠重要脏器(心,肾,肺)微观形态学的差异。方法:取正常老年(28月龄)和青年(3月龄)Wistar大鼠的心脏、肾脏、肺脏做石蜡切片,利用HE染色的方法进行染色、观察、分析。结果:老年大鼠和青年大鼠心、肾、肺各重要脏器的微观形态均有显著差异。结论:衰老导致大鼠心脏、肾脏和肺脏的微观形态学表现出现显著变化。
【关键词】青年;老年;微观形态;HE染色
【中图分类号】R31【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2015)14-0366-02
随着我国进入人口老龄化社会,老年各重要脏器疾病已成为我国重大公共卫生问题之一。衰老引起各器官形态结构发生种种改变,这是研究和认识衰老相关疾病的重要依据。本研究选择正常老年大鼠和青年大鼠,比较老年大鼠与青年大鼠心脏、肾脏、肺脏的微观形态学差异,旨在为老年慢性疾病的研究提供实验依据。
1.材料与方法
1.1实验动物及分组
健康雄性Wistar大鼠12只,包括3月龄(青年组)6只,体重300g左右;28月龄(老年组)6只,体重500g左右。两组大鼠由山西医科大学实验动物中心提供。实验动物的使用遵循中华人民共和国卫生部令(第55号)——医学实验动物管理实施细则,以及山西医科大学实验动物管理细则,并得到了山西医科大学动物保护协会的批准。
1.2主要试剂与仪器
全封闭组织脱水机(Tissue-TekVIP5日本);显微镜(LeicaDM6000B德国);苏木素粉剂(北京中杉金桥生物技术公司);水溶性伊红(北京中杉金桥生物技术公司)。
1.3苏木素-伊红染色(HE染色)
大鼠用4%多聚甲醛做内固定,之后取心脏、肾脏、肺脏等组织,用4%多聚甲醛做后固定;石蜡包埋,切片4μm厚。脱蜡后用苏木素和伊红染料进行染色。
2.结果
2.1老年大鼠心脏与青年大鼠相比差异显著
在光学显微镜下观察发现:与青年大鼠心脏相比,老年大鼠心肌细胞肥大、细胞数目减少、核浆比降低;间质毛细血管减少、结缔组织增生。(见图1)
2.2老年大鼠肾脏与青年大鼠相比差异显著
与青年大鼠肾脏相比,老年大鼠肾脏肾小球肥大、数目减少,肾小球毛细血管内皮细胞数量减少,有局灶节段性肾小球硬化现象;肾小管萎缩、上皮细胞数目减少、核浆比减小;间质纤维化。(见图2)
2.3老年大鼠肺脏与青年大鼠相比差异显著
与青年大鼠肺脏相比,老年大鼠肺脏中细小支气管、肺泡管、肺泡囊扩张;肺泡腔扩张甚至破裂,肺泡上皮细胞萎缩、减少,肺泡壁变薄;肺泡间隔纤维组织增生;肺泡壁毛细血管减少。(见图3)
3.讨论
随着人口老龄化进程的加剧,明确脏器衰老与各脏器疾病的关系就至关重要。衰老是一个极其复杂的综合过程,涉及机体各个组织器官的生理病理变化。
3.1老年与青年大鼠心脏微观形态学表现具有显著差异
本实验发现:与青年大鼠心脏相比,老年大鼠心肌细胞肥大、细胞数目减少、核浆比降低;间质毛细血管减少、结缔组织增生。个体衰老过程中,心肌细胞由于凋亡、坏死而减少。30岁到70岁,心肌细胞数量大约减少35%[1]。这种年龄相关性心肌细胞死亡导致健存心肌细胞机械负荷增加而发生肥大性改变。心肌细胞肥大可以部分代偿心肌细胞数量的减少。
心脏中还含有大量成纤维细胞,随着个体衰老,成纤维细胞增加,并合成胶原纤维,引起间质纤维结缔组织增生,进而导致心室顺应性降低,心室充盈障碍[2]。
3.2老年与青年年大鼠肾脏微观形态学表现具有显著差异
本研究发现,与青年大鼠肾脏相比,老年大鼠肾脏肾小球肥大、数目减少,肾小球毛细血管内皮细胞数量减少,有局灶节段性肾小球硬化现象;肾小管萎缩、上皮细胞数目减少、核浆比减小;间质纤维化。该结果与以往研究结果一致[3]。因此,老年人的肾脏清除废物和重吸收的功能有所减低,尿里常可见到微量蛋白质、红细胞,有时还会出现尿糖、尿比重偏低等情况。老年人的肾脏储备力差,更易发生肾功能不全。
3.3老年与青年大鼠肺脏微观形态学表现具有显著差异
早在1958年,Rappaport等提出“老年肺”,是指肺结构老化,单纯因增龄而引起的肺衰老。我们的实验结果发现:与成年大鼠肺脏相比,老年大鼠肺脏中细小支气管、肺泡管、肺泡囊扩张;肺泡腔扩张甚至破裂,肺泡上皮细胞萎缩、减少,肺泡壁变薄;肺泡间隔纤维组织增生;肺泡壁毛细血管减少。与“老年肺”的特征相符。在衰老进程中,伴随呼吸系统结构的变化,肺功能也出现衰老表现。健康人群肺功能随增龄而下降。
综上所述,老年大鼠与青年大鼠心脏、肾脏、肺脏的微观形态学表现均具有显著差异。研究老年与成年微观形态学的差异有助于解释老年各器官功能障碍的机理。
【参考文献】
[1]BernhardD,LauferG.Theagingcardiomyocyte;amini-review[J].Gerontology,2008,54(1):24-31.
[2]SandersD,DudleyM,CrobanL.Diastolicdysfunction,cardiovascularaging,andtheanesthesiologist[J].AnesthesiolClin,2009,27(3):497-517.
[3]苗里宁.肾功能衰竭[M].西安:第四军医大学出版社,2007:16-91.