含腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素基因的重组大肠杆菌的高密度发酵和免疫效果

论文摘要

为确定含腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素重组蛋白的生产效率并评价其作为抗原的免疫效果,用生物反应器对重组大肠杆菌DE3-pET-AE进行高密度发酵,并将其制苗后以不同抗原剂量分别接种家兔和绵羊,间隔21 d进行二免,分别测定一免、二免动物混合血清的中和效价。发酵结果显示,培养物菌体密度D600 nm达20.3,相对表达量为27.6%,D600 nm与相对表达量的乘积为摇瓶培养的6.5倍,菌体湿质量为37.2 g/L;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）结果显示,目的蛋白以可溶形式表达。动物免疫效果评价结果显示,在家兔和绵羊上,抗原含量与免疫效果在一定的范围内均呈正相关,当接种量为300μg/只时,免疫效果均最好;对腐败梭菌毒素与D型产气荚膜梭菌毒素的血清中和效价,在家兔上一免、二免分别达4与30、15与200,在绵羊上一免、二免分别达2与30、12与250。结果表明,DE3-pET-AE菌高密度发酵可获得高产量蛋白抗原,且抗原的免疫效果明显优于《中华人民共和国兽药典》合格标准。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 彭小兵,杜吉革,彭国瑞,李旭妮,董令赢,冯丽芳,蒋玉文

关键词: 腐败梭菌毒素,产气荚膜梭菌毒素,大肠杆菌高密度发酵,免疫效果,抗原含量,家兔,绵羊

来源: 江苏农业科学 2019年17期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,一般化学工业,畜牧与动物医学

单位: 中国兽医药品监察所

基金: 国家重点研发计划(编号:2017YFD0500905),中国兽医药品监察所所级课题(编号:201701)

分类号: S852.4;TQ920.1

DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.17.046

页码: 186-189

总页数: 4

文件大小: 299K

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