盐碱胁迫下苜蓿对亚精胺浸种的生理应答特征

盐碱胁迫下苜蓿对亚精胺浸种的生理应答特征

论文摘要

土壤盐碱胁迫是植物生长发育的主要障碍因子之一。本研究通过亚精胺处理苜蓿种子,探求在盐碱胁迫下苜蓿生长发育、生理及抗逆性对外源亚精胺的应答特征,并利用转录组测序和代谢组测序验证与盐碱胁迫有关的目标功能基因的富集模式与差异性代谢物情况,旨在为紫花苜蓿在盐碱地土壤适应性栽培提供技术支撑与理论依据。选用东苜1号和公农1号紫花苜蓿为试材进行盆栽。供试土壤为吉林白城东北师范大学试验基地的盐碱土和实验室培养土浇灌混合盐碱溶液模拟盐碱土。实验处理分别为纯净水、0.5mM与1 mM亚精胺溶液浸泡处理24小时,并在温室条件下进行4个月的盆栽培养,在光照培养箱中进行2个月盆栽培养。测定苜蓿生物量、渗透势、可溶性糖、叶绿素,脯氨酸、丙二醛、苜蓿的钠钾钙离子含量、苜蓿根际表面的钠钾钙离子流速、转录组差式表达基因的富集模式和代谢组差异代谢物的富集模式。在盐碱胁迫下亚精胺浸种处理的苜蓿生物量、可溶性糖、叶绿素、脯氨酸、钾离子含量均明显上升,而叶片组织中钠离子和丙二醛含量显著下降,其中以0.5 mM亚精胺浸种处理效果最佳。转录组测序表明亚精胺浸种致使基因表达发生改变。通路分析表明,这些差式表达基因主要参与了蛋白质合成、次生代谢途径及信号转导。亚精胺浸种能够有效地促进盐碱胁迫下苜蓿的生长发育。代谢组分析表明亚精胺处理使植物体内的氨基酸、有机酸、脂肪酸等物质发成了差异性变化,改变了苜蓿的蛋白质合成、生长代谢途径。通过亚精胺浸种增加了苜蓿叶片中参与渗透调节性代谢物质的积累及钠离子外排,维持了细胞内渗透势平衡,导致苜蓿的耐盐碱性增强。亚精胺浸种明显导致差式表达基因在苜蓿叶片中的富集模式发生改变,并差式表达基因上调或下调,并参与了苜蓿的生理代谢过程。本研究证实了0.5 mM亚精胺对缓解苜蓿盐碱胁迫伤害效果最佳,表明外源亚精胺可以为苜蓿在盐碱胁迫下的植株生长提供信号调节。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 前言
  •   1.1 盐碱土
  •     1.1.1 盐碱土的现状
  •     1.1.2 盐碱土的危害
  •     1.1.3 盐碱土的改良
  •   1.2 苜蓿
  •     1.2.1 紫花苜蓿
  •     1.2.2 紫花苜蓿生物学基础
  •   1.3 亚精胺在植物中作用
  •   1.4 研究目的和意义
  •   1.5 技术路线
  • 第二章 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿的生理生化分析
  •   2.1 试验材料
  •     2.1.1 植物材料
  •     2.1.2 实验试剂
  •     2.1.3 实验仪器及器材
  •   2.2 试验方法
  •     2.2.1 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿生育指标的测定
  •     2.2.2 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿根系扫描
  •     2.2.3 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿的生化指标
  •   2.3 实验结果
  •     2.3.1 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿的表型变化
  •     2.3.2 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿的生地上部物量变化
  •     2.3.3 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿的地下部生物量变化及根系形态
  •     2.3.4 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿生理指标的变化
  •   2.4 小结
  • 第三章 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿的离子含量和非损伤测试
  •   3.1 材料和方法
  •     3.1.1 植物材料
  •     3.1.2 实验试剂及Hoagland营养液配制
  •     3.1.3 实验仪器
  •   3.2 试验方法
  •     3.2.1 钠钾钙含量
  •     3.2.2 非损伤测试
  •   3.3 结果分析
  •     3.3.1 苜蓿中钠钾钙离子含量
  •     3.3.2 盐碱胁迫下亚精胺处理苜蓿根部钠钾钙离子流速
  •   3.4 小结
  • 第四章 盐碱胁迫下苜蓿的基因差式分析
  •   4.1 实验材料
  •     4.1.1 植物材料
  •     4.1.2 实验试剂
  •     4.1.3 实验仪器
  •   4.2 试验方法
  •     4.2.1 RNA测序
  •     4.2.2 测序结果分析
  •   4.3 结果分析
  •     4.3.1 测序数据组成和质量
  •     4.3.2 基因表达水平统计分析
  •     4.3.3 差异表达基因分析
  •     4.3.4 差异表达GO富集
  •     4.3.5 差异表达KEGG富集
  •     4.3.6 逆境胁迫相应的差异基因分析
  •   4.4 小结
  • 第五章 盐碱胁迫下苜蓿的代谢组学分析
  •   5.1 材料和方法
  •     5.1.1 植物材料
  •     5.1.2 实验试剂
  •     5.1.3 实验仪器
  •     5.1.4 代谢物提取
  •     5.1.5 数据分析
  •     5.1.6 代谢物鉴定
  •   5.2 试验结果
  •     5.2.1 样本主成分分析
  •     5.2.2 样本的正交偏最小二乘方-判别分析(OPLS-DA)
  •     5.2.3 差异性代谢物变化
  •     5.2.4 差异性代谢物通路分析
  •     5.2.5 差异性代谢物KEGG通路分析
  •   5.3 小结
  • 第六章 全文结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 夏关雪莹

    导师: 程宪国

    关键词: 苜蓿,亚精胺,盐碱胁迫,转录组分析,代谢组分析

    来源: 沈阳农业大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 自然地理学和测绘学,农业基础科学,农艺学,农作物

    单位: 沈阳农业大学

    分类号: S156.4;S541.9

    DOI: 10.27327/d.cnki.gshnu.2019.000247

    总页数: 61

    文件大小: 2740K

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