黑化包被论文_杨松,黄复生,吴玉章,况明书,牟芝蓉

导读:本文包含了黑化包被论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:淋巴,疟原虫,血细胞,包被,电泳,论文,大劣按蚊。

黑化包被论文文献综述

杨松,黄复生,吴玉章,况明书,牟芝蓉^[1]（2004）在《斯氏按蚊黑化包被约氏疟原虫卵囊时血淋巴蛋白的二维电泳分析》一文中研究指出目的　以斯氏按蚊约氏疟原虫为模型 ,用二维电泳技术分析比较约氏疟原虫感染后雌性斯氏按蚊吸饲硝喹蔗糖水和蔗糖水蚊血淋巴蛋白差异。方法　用挤压法分别收集吸硝喹糖水 3d、吸感染血和吸蔗糖水雌斯氏按蚊成蚊血淋巴 ,Bradford法检测血淋巴蛋白浓度 ,继而对血淋巴进行双向电泳 ,凝胶考马斯亮蓝染色 ,ImageMasterVDS CL对二维电泳凝胶蛋白斑点扫描和用ImageMaster 2DElite软件进行蛋白质斑点自动分析。结果　用药组血淋巴蛋白浓度总是低于吸感染血组和吸糖水组 ,用药组蚊血淋巴蛋白点有 10 1个 ,对照组有 115个 ,有 5 1个蛋白点相同。 5 0个仅在用药组中检测到 ,64个仅在对照组中检测到 ;蛋白点的分子量和等电点主要位于 ( 4 0～ 60 )× 10 3 和碱性端。结论　二维电泳技术可直接反映蛋白质的差异 ,其蛋白浓度和白点的差异与硝喹诱导疟原虫卵囊黑化有关。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2004年01期）

徐文岳^[2]（2001）在《大劣按蚊黑化包被约氏疟原虫免疫机理的研究》一文中研究指出约氏疟原虫卵囊黑化是疟原虫不能在大劣按蚊体内发育成熟的主要表型。目前推测，与冈比亚按蚊一样，大劣按蚊黑化包被约氏疟原虫可能也是由PPO级联反应介导，但缺乏直接证据的支持。 PPO系统主要由识别/结合蛋白（recognition/binding protein）、PPO和PPAE组成。其中，PO是PPO系统的关键成分之一，它是以酶原形式PPO存在于昆虫体内，具有MPO和DPO两种酶活性。因此，本研究利用大劣按蚊/约氏疟原虫为模型，通过观察感染约氏疟原虫后大劣按蚊血淋巴PO活性变化，以及卵囊黑化期间血淋巴蛋白的表达，探讨PPO级联反应与约氏疟原虫卵囊黑化的关系以及卵囊黑化包被相关蛋白。 PPAE是一种分子量约为30KD的丝氨酸蛋白酶，而丝氨酸蛋白酶是丝氨酸蛋白酶级联反应的关键酶。大量研究发现，脊椎动物和无脊椎动物体内的丝氨酸蛋白酶对调节生理活动和免疫反应都具有重要作用。因此，本实验克隆了AdsP，为进一步研究其在按蚊黑化包被反应中的调节作用打下基础。另外，还克隆了大劣按蚊S7，拟作为观察感染疟原虫后AdsP转录的内参照。选择3-5日龄的雌大劣按蚊，分成不吸血组、吸正常血组和约氏疟原虫感染组。首先，经非变性PAGE分离后，采用酶底物显色方法，鉴定并测定了血餐后d_5、d_7、d_(11)和d_(15)叁组雌大劣按蚊血淋巴MPO和o-DPO酶活性。结果显示，感染组的血淋巴MPO和o-DPO酶活性明显高于不吸血组和吸正常血组（p＜0.05）；但是随着约氏疟原虫卵囊黑化比率的增高，感染组血淋巴MPO和DPO活性逐渐下降，尤其以d_(15)最为明显。吸血感染后d_1、d_3、d_4和d_5分别收集叁组雌大劣按蚊血淋巴，经SDS-PAGE分离后，银染显色。以不吸血组和吸正常血组为对照，结果发现，感染组的雌大劣按蚊部分血淋巴蛋白表达增强，而部分蛋白表达却减弱。用烟草天蛾（Manduca Sexta）的PPO1 IgG检测正常雌大劣按蚊血淋巴PPO组成，发现大劣按蚊血淋巴 PPO有 87、67、63KD叁条蛋白带，而感染组中相应分子量的叁条蛋白带在山时开始表达增强。根据己报道昆虫的丝氨酸蛋白酶保守氨基酸序列设计简并引物，以大劣按蚊血细胞cDNA为模板，进行PCR扩增，目的片段进行T／A克隆、测序，首次获得叁种大劣按蚊血细胞丝氨酸蛋白酶 CDNA序列，AdSP、AdSPZ和AdsP3。BLAST查询结果显示，AdsPI 与冈比亚按sP14DI、sP14DZ、Holotrichia diomphalia PPAE－I和果蝇（Drosophil）Easter很相似；AdsPZ与冈比亚按蚊 SPZA最相似；而 AdSP3与冈比亚按蚊 SP 4A有很高的同源性。资料显示，SP 4A、sP 4D和 sP 4D2可能是冈比亚按蚊的 PPAE，因此，椎测 AdsP和 AdsP3是大劣按蚊的 PPAE，可能调节黑化包被反应。同时，根据烟草天蛾、人、鼠和冈比亚按蚊的S7 mRNA序列，设计一对简并引物，克隆并测定大劣按蚊S7cDNA部分序列。Blast查询发现，其与人、鼠、冈比亚按蚊和烟草天蛾S7均有非常高的同源性。上述结果提示，PPO级联反应可能介导了大劣按蚊黑化包被约氏疟原虫反应，而且可能在山或更早期被激活；而卵囊黑化期间诱导的大劣按蚊血淋巴蛋白在一定程度上与PPO级联反应主要成分相关。另外，BLAST结果提示 AdsP和 AdsP3可能是大劣按蚊的 PPAE，可能调节大劣按蚊的黑化包被约氏疟原虫反应。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2001-05-01）

黑化包被论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

约氏疟原虫卵囊黑化是疟原虫不能在大劣按蚊体内发育成熟的主要表型。目前推测，与冈比亚按蚊一样，大劣按蚊黑化包被约氏疟原虫可能也是由PPO级联反应介导，但缺乏直接证据的支持。 PPO系统主要由识别/结合蛋白（recognition/binding protein）、PPO和PPAE组成。其中，PO是PPO系统的关键成分之一，它是以酶原形式PPO存在于昆虫体内，具有MPO和DPO两种酶活性。因此，本研究利用大劣按蚊/约氏疟原虫为模型，通过观察感染约氏疟原虫后大劣按蚊血淋巴PO活性变化，以及卵囊黑化期间血淋巴蛋白的表达，探讨PPO级联反应与约氏疟原虫卵囊黑化的关系以及卵囊黑化包被相关蛋白。 PPAE是一种分子量约为30KD的丝氨酸蛋白酶，而丝氨酸蛋白酶是丝氨酸蛋白酶级联反应的关键酶。大量研究发现，脊椎动物和无脊椎动物体内的丝氨酸蛋白酶对调节生理活动和免疫反应都具有重要作用。因此，本实验克隆了AdsP，为进一步研究其在按蚊黑化包被反应中的调节作用打下基础。另外，还克隆了大劣按蚊S7，拟作为观察感染疟原虫后AdsP转录的内参照。选择3-5日龄的雌大劣按蚊，分成不吸血组、吸正常血组和约氏疟原虫感染组。首先，经非变性PAGE分离后，采用酶底物显色方法，鉴定并测定了血餐后d_5、d_7、d_(11)和d_(15)叁组雌大劣按蚊血淋巴MPO和o-DPO酶活性。结果显示，感染组的血淋巴MPO和o-DPO酶活性明显高于不吸血组和吸正常血组（p＜0.05）；但是随着约氏疟原虫卵囊黑化比率的增高，感染组血淋巴MPO和DPO活性逐渐下降，尤其以d_(15)最为明显。吸血感染后d_1、d_3、d_4和d_5分别收集叁组雌大劣按蚊血淋巴，经SDS-PAGE分离后，银染显色。以不吸血组和吸正常血组为对照，结果发现，感染组的雌大劣按蚊部分血淋巴蛋白表达增强，而部分蛋白表达却减弱。用烟草天蛾（Manduca Sexta）的PPO1 IgG检测正常雌大劣按蚊血淋巴PPO组成，发现大劣按蚊血淋巴 PPO有 87、67、63KD叁条蛋白带，而感染组中相应分子量的叁条蛋白带在山时开始表达增强。根据己报道昆虫的丝氨酸蛋白酶保守氨基酸序列设计简并引物，以大劣按蚊血细胞cDNA为模板，进行PCR扩增，目的片段进行T／A克隆、测序，首次获得叁种大劣按蚊血细胞丝氨酸蛋白酶 CDNA序列，AdSP、AdSPZ和AdsP3。BLAST查询结果显示，AdsPI 与冈比亚按sP14DI、sP14DZ、Holotrichia diomphalia PPAE－I和果蝇（Drosophil）Easter很相似；AdsPZ与冈比亚按蚊 SPZA最相似；而 AdSP3与冈比亚按蚊 SP 4A有很高的同源性。资料显示，SP 4A、sP 4D和 sP 4D2可能是冈比亚按蚊的 PPAE，因此，椎测 AdsP和 AdsP3是大劣按蚊的 PPAE，可能调节黑化包被反应。同时，根据烟草天蛾、人、鼠和冈比亚按蚊的S7 mRNA序列，设计一对简并引物，克隆并测定大劣按蚊S7cDNA部分序列。Blast查询发现，其与人、鼠、冈比亚按蚊和烟草天蛾S7均有非常高的同源性。上述结果提示，PPO级联反应可能介导了大劣按蚊黑化包被约氏疟原虫反应，而且可能在山或更早期被激活；而卵囊黑化期间诱导的大劣按蚊血淋巴蛋白在一定程度上与PPO级联反应主要成分相关。另外，BLAST结果提示 AdsP和 AdsP3可能是大劣按蚊的 PPAE，可能调节大劣按蚊的黑化包被约氏疟原虫反应。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。