OmpD对肠炎沙门菌生物学特性影响的研究

OmpD对肠炎沙门菌生物学特性影响的研究

论文摘要

为研究外膜孔蛋白Omp D在肠炎沙门菌致病中的作用,本研究利用λ-Red同源重组技术构建了肠炎沙门菌(C50336) omp D基因缺失突变株(C50336Δomp D)。测定了C50336,缺失株C50336Δomp D,回补株p BR322-omp D/C50336Δomp D各菌株在LB和M9培养基中的生长情况,结果显示,缺失株C50336Δomp D与野生型菌株和回补菌株相比,其生长速度无明显差异。利用结晶紫染色方法观察和测定生物被膜(BF)表达量,结果显示,C50336Δomp D与野生型菌株和回补菌株相比,其BF形成受到明显抑制;利用刚果红培养基和荧光剂培养基分析细菌BF成分变化,结果显示C50336Δomp D构成BF的主要成分卷毛和纤维素的表达量明显减少。通过K-B药敏试验结果显示,C50336Δomp D菌株与野生型菌株和回补菌株相比,其对包括多黏菌素B在内的多种抗生素的敏感性显著增强。利用小鼠模型评估omp D基因缺失对肠炎沙门菌致病力的影响,结果显示,omp D基因缺失突变株对小鼠的LD50相较野生菌株提高约20倍,表明Omp D蛋白与肠炎沙门菌致病力密切相关,毒力基因检测结果显示缺失株BF调控基因均转录水平下调。本研究为进一步阐释肠炎沙门菌致病机制奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌株、质粒及主要试剂
  •   1.2 λ-Re d同源重组引物的设计
  •   1.3 沙门菌ompD基因缺失株及回补菌株的构建
  •   1.4 沙门菌生长特性检测
  •   1.5 肠炎沙门菌BF形成能力检测
  •   1.6 菌株耐药性检测
  •   1.7细菌粘附试验
  •   1.8 细菌致病力的检测
  •   1.9 BF和毒力基因的检测
  • 2 结果
  •   2.1 肠炎沙门菌C50336ΔompD的构建
  •   2.2 ompD基因缺失对肠炎沙门菌生长特性的影响
  •   2.3 ompD基因缺失对肠炎沙门菌BF的影响
  •   2.4 ompD基因缺失对肠炎沙门菌耐药性的影响
  •   2.5 ompD基因缺失对肠炎沙门菌黏附的影响
  •   2.6 ompD基因缺失对肠炎沙门菌毒力的影响
  •   2.7 ompD基因缺失对肠炎沙门菌相关基因转录水平的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张志强,苏硕青,杜万年,李永慧,刘勃兴,吴同垒,朱国强,史秋梅

    关键词: 肠炎沙门菌,基因缺失,生物学特性

    来源: 中国预防兽医学报 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 河北科技师范学院,秦皇岛第二医院,扬州大学

    基金: 国家自然科学基金项目(31802186),河北省高等学校科学技术研究项目(ZD2016067),秦皇岛市科技创新平台建设运行经费(201702B001),河北省现代农业产业技术体系肉牛产业创新团队岗位项目(HBCT2018130203-WSZ),河北省科技厅项目(18246629G)

    分类号: S852.61

    页码: 1106-1112

    总页数: 7

    文件大小: 1745K

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