论文摘要
为制备土霉素（Oxytetracycline,OTC）完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝胶电泳鉴定其偶联效果,然后将完全抗原免疫BLAB/c小鼠获得多抗血清（pAb）并对其免疫学特性进行鉴定,通过优化条件建立OTC间接竞争ELISA检测方法。结果表明,偶联效果良好,免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1∶12 800;4只小鼠多抗血清均有抑制效果,其中2号小鼠产生的多抗血清效果最佳,基于该多抗血清建立的OTC间接竞争ELISA检测方法半数抑制浓度(IC50)为32.92ng/mL,检测限（LOD）为1.3ng/mL,牛奶样品中添加回收率在84.70%～87.45%,与金霉素、四环素的交叉反应率分别为5.27%,4.10%,与其他竞争物交叉反应率<0.4%。该试验成功合成了OTC完全抗原,获得了免疫学特性良好的OTC多抗血清,并建立了OTC免疫学检测方法。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 曹金博,胡骁飞,王耀,李燕虹,曹夕丹,邢云瑞,孙亚宁,邓瑞广,张改平
关键词: 土霉素,完全抗原,多抗血清
来源: 食品与机械 2019年09期
年度: 2019
分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学,农业科技
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南科技大学食品与生物工程学院,河南农业大学
基金: 国家“十二五”科技支撑计划课题（编号：2014BAD13B05）,国家重点研发计划（编号：2018YFC1602903）,国家自然科学基金（编号：31702218）,河南省自然科学基金（编号：182300410038）,河南省科技攻关项目（编号：182102110445,182102310230）,河南省高等学校重点科研项目（编号：18B550001）,河南省动物免疫学重点实验室开放课题（编号：PKLAI20170603）
分类号: S852.4
DOI: 10.13652/j.issn.1003-5788.2019.09.015
页码: 77-83
总页数: 7
文件大小: 663K
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