胰酶样蛋白酶论文-许小枫,崔瑜霞,邓一泓,余蓉

胰酶样蛋白酶论文-许小枫,崔瑜霞,邓一泓,余蓉

导读:本文包含了胰酶样蛋白酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:胰渣,胰酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶

胰酶样蛋白酶论文文献综述

许小枫,崔瑜霞,邓一泓,余蓉[1](2016)在《从生产胰岛素的胰渣中制备胰酶、胰蛋白酶及糜蛋白酶》一文中研究指出目的从中性乙醇提取胰岛素后的残渣中提取制备高活性的胰酶,并从中分离纯化出胰蛋白酶(T)、糜蛋白酶(CT)。方法在胰渣中加入活化剂活化后,用PEG-6000沉淀、丙酮脱脂干燥得到胰酶;胰酶经CM-纤维素纯化得到胰糜蛋白酶混合制剂,再经CM-sepharose FF层析分离得胰蛋白酶和糜蛋白酶。结果胰酶回收率为12.1%,胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶的活性分别为5.40、39.72、76.72 U·mg-1,3种酶的活性比例达1∶7.4∶14.2。胰蛋白酶、糜蛋白酶的效价分别为2505、1003 U·mg-1;相对于胰酶,二者的活性回收分别为48.93%、61.73%。结论从胰渣中制得的胰酶活性较高(约9倍于《中国药典》2010年版中的标准);制得的T及CT的活力也达到《中国药典》2010年版中的标准。(本文来源于《华西药学杂志》期刊2016年06期)

李维丹[2](2016)在《赤藓糖醇对牙龈卟啉单胞菌的生长、黏附及胰酶样蛋白酶活性的影响分析》一文中研究指出目的:牙周病一直以来被认为是一种成人口腔疾病,然而,近年来牙周病的发病率在儿童、青少年时期呈不断增长的趋势。菌斑生物膜是牙周病发病的始发因子,其中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)在牙周炎的发病过程中占据重要角色,P.gingivalis及其代谢产物可破坏牙周支持组织。赤藓糖醇(erythritol),是一种安全、无毒副作用、热量值低、无致龋性的食品添加剂,作为新型的甜味调节剂被广泛应用于食品、保健品等领域中。目前,学者们主要集中于赤藓糖醇防龋特性的研究,并发现其具有抑制致龋菌的生长繁殖及降低其产酸能力的作用。本实验以P.gingivalis作为实验对象,研究赤藓糖醇对P.gingivalis生长及黏附的影响,并进一步研究及探讨赤藓糖醇对其产生的胰酶样蛋白酶(trypsin-like protease,TLP)活性的影响作用,为临床上应用赤藓糖醇防治牙周病提供新的方向。方法:本实验以标准菌株P.gingivalis ATCC33277作为研究对象,配制牛心脑浸液培养基(BHI培养基),向培养液中加入赤藓糖醇以配制成2%、6%、10%、15%、20%质量浓度的溶液,设不加赤藓糖醇的BHI培养基为对照组。分别加入P.gingivalis菌悬液,在37℃恒温厌氧条件下培养,以4小时的时间间隔测量培养液的菌密度值(OD值),绘制其生长变化曲线,并用稀释涂板计数法观察各组菌落的数量及颜色变化。实验以正畸拔除牙的牙骨质表面作为P.gingivalis黏附载体,使用扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)和激光共聚焦扫描显微镜(Confocal Laser Scanning Microscop,CLSM)观察赤藓糖醇对P.gingivalis在牙骨质表面的黏附情况的影响。在上述配制的溶液中加入P.gingivalis菌悬液,厌氧条件下培养48h,收集培养细菌的上清液和菌细胞的破碎液,对赖氨酸蛋白酶(Rgp)行粗提取,测定TLP的活性及计算底物降解程度下Rgp活性百分比。结果:本实验结果显示赤藓糖醇可抑制P.gingivalis的生长及黏附作用,且赤藓糖醇的浓度越高其抑制效果越明显,组间两两比较差异具有统计学意义(P<0.05);质量浓度为10%的赤藓糖醇即可良好的抑制生物膜的形成。赤藓糖醇能够延长P.gingivalis在血平板中聚集血红素形成特征性黑色菌落的时间。P.gingivalis产生的TLP既可存在于菌细胞膜的表面,也可释放到培养液中呈游离的状态,且膜表面TLP的活性较游离状态的强。赤藓糖醇对TLP的活性具有抑制作用,且呈浓度依赖特性,赤藓糖醇浓度越高,其酶的活性越低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:通过本实验可以得出,新型甜味剂赤藓糖醇对P.gingivalis的生长具有抑制作用,并可降低其在牙骨质表面的黏附作用,对P.gingivalis产生的TLP活性的抑制效果随赤藓糖醇的升高而降低。(本文来源于《福建医科大学》期刊2016-05-01)

仲琦[3](2016)在《穿心莲内酯对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响》一文中研究指出牙周病是口腔两大主要疾病之一,在我国患病率居于龋病之上。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)是慢性牙周炎的主要致病菌,而胰酶样蛋白酶(trypsin-like protease,TLP)为P.g的重要毒力因子,是目前研究的热点。穿心莲内酯(andrographolide,Andro)作为中草药提取物在我国来源广泛且毒副作用小,并具有抗炎抗菌等多方面作用。目的:本实验拟选用穿心莲内酯为研究对象,观察其对牙龈卟啉单胞菌的生长能否起到抑制作用;并通过研究其对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶的活性是否有影响及其影响程度,为穿心莲内酯应用于牙周炎的预防及治疗提供理论基础。方法:本实验的实验菌株为P.g W83,采用二倍稀释法配比药物浓度进行药敏实验。实验一:测定穿心莲内酯对P.g的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC)。实验二:测定培养物结合态TLP和游离态TLP活性及含量,计算TLP的比活,评价穿心莲内酯。配制液体牛心脑浸液培养基(BHI),P.g浓度为108CFU/ml,穿心莲内酯终浓度分别为MIC的l/2、l/4和l/8,加入一定浓度的P.g菌悬液及不同浓度的穿心莲内酯,在37℃恒温箱内厌氧培养48小时后,收集离心后的培养物上清液,并超声破碎剩余菌细胞,收集破碎后菌细胞上清液,测定菌细胞破碎后上清液及培养物上清液中TLP活性及其含量,计算TLP的比活。结果:在P.g浓度为108CFU/ml时,穿心莲内酯对P.g的生长抑制作用较明显,穿心莲内酯的MIC为6mg/ml,其MBC为12mg/ml。P.g的TLP存在两种形式:结合态(与菌细胞结合)和游离态(分泌到细胞外),TLP主要的存在形式为与菌细胞结合的结合态。游离态TLP水解蛋白的能力较结合态弱,穿心莲内酯的浓度越弱,酶比活越高,对P.g的TLP酶的抑制作用越弱。结论:穿心莲内酯对P.g的生长有抑制作用,MIC为6mg/ml,MBC为12mg/ml;穿心莲内酯对P.g游离态TLP和结合态TLP的活性及蛋白水解能力均有抑制作用,浓度越大,抑制作用越强,且对游离态TLP抑制作用强于结合态TLP。(本文来源于《吉林大学》期刊2016-04-01)

陈春雨,刘鹤,何畔,卢建忠,应頔[4](2015)在《野菊花提取物对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的抑制作用》一文中研究指出目的:探讨野菊花提取物对牙龈卟啉单胞菌(P.g)胰酶样蛋白酶(TLP)活性的影响,为野菊花治疗牙周炎提供理论依据。方法:配制牛心脑浸液培养基(BHI),低、中、高浓度对倍稀释的野菊花提取物(0.1563、0.3125和0.6250g·L-1)和一定浊度的P.g菌悬液,实验分为低、中、高浓度野菊花提取物组、阳性对照组(不加野菊花提取物)和阴性对照组(加入低浓度野菊花提取物,不加P.g)。各组含溶液的EP管在37℃恒温条件下厌氧培养48h,测定培养物上清液和菌细胞破碎后上清液中TLP活性和蛋白水平,计算TLP比活。结果:与阳性对照组比较,中、高浓度野菊花提取物组上清液中TLP活性(游离态和结合态)均降低(P<0.05);与低浓度野菊花提取物组比较,中、高浓度野菊花提取物组上清液中TLP活性(游离态和结合态)均降低(P<0.05);与中浓度野菊花提取物组比较,高浓度野菊花提取物组上清液中TLP活性(游离态和结合态)降低(P<0.05),各组上清液中蛋白水平和TLP比活无明显变化(P<0.05)。结论:野菊花提取物对TLP活性有抑制作用。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2015年05期)

陈春雨[5](2014)在《野菊花对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响》一文中研究指出本实验以牙龈卟啉单胞菌作为研究对象,选用野菊花粗提物,研究野菊花对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)的生长是否有抑制作用,并探讨其对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶(trypsin-like protease,TLP)活性是否有影响及影响程度,为野菊花在临床应用治疗牙周炎提供理论依据。本实验以P.gATCC33277作为实验菌株,采用液体二倍稀释法进行药敏实验,测定野菊花对P.g的最小抑菌浓度(MIC);以此浓度为参考,配制牛心脑浸液培养基(BHI),加入不同浓度的野菊花粗提物和一定浊度的P.g菌悬液,野菊花粗提物中浓度分别为l/2MIC、l/4MIC和l/8MIC,P.g浓度为108CFU/ml,在37℃恒温条件下厌氧培养48小时,离心后收集培养物上清液,并将剩余菌细胞超声破碎,收集菌细胞破碎后上清液,测定培养物上清液和菌细胞破碎后上清液中TLP活性及蛋白含量,计算TLP的比活。结果显示野菊花粗提物对P.g的生长有明显的抑制作用,在P.g数量为108CFU/ml时,野菊花粗提物的MIC为1.25mg/ml。P.g的TLP存在两种形式:分泌到细胞外的游离态和与菌细胞结合的结合态,TLP主要以与菌细胞结合的结合态形式存在。P.g结合态TLP水解蛋白的能力比游离态强,其酶比活随野菊花粗提物浓度升高而降低。通过本实验可得到结论:野菊花粗提物对P.g的生长有抑制作用,对P.g结合态TLP活性有明显的抑制作用,高浓度的野菊花粗提物对P.g游离态TLP活性有明显抑制作用,但低浓度的野菊粗提物花对其抑制作用不明显。(本文来源于《吉林大学》期刊2014-04-01)

阙斐,赵粼,陈锡威[6](2014)在《胰酶提升小麦蛋白酶解产物乳化活性工艺及其功能特性研究》一文中研究指出以乳化活力为指标,系统地研究了胰酶水解小麦蛋白的工艺条件,酶解产物的抗氧化活性、分子量分布、氨基酸组成等功能特性。结果表明,最佳酶解条件为:酶浓度E/S为1%、温度45℃、pH7.5,乳化活力指数达到35.38m2/g,此时水解度为4.73%,显着提升了小麦蛋白的乳化活性。最佳工艺条件下的小麦蛋白酶解液具有一定的DPPH自由基清除能力,但显着低于VC;首次发现了酶解液具有较强的金属螯合能力。酶解小麦蛋白产物中多肽分子量主要分布在200~1000u,占65.99%;酶解产物中共检测出了15种氨基酸,谷氨酸含量最高,达30.48%;肽类可能是酶解产物具备化活性、抗氧化活性等功能特性的重要贡献者。(本文来源于《食品工业科技》期刊2014年10期)

姚望,张莉,马宁[7](2012)在《乳铁蛋白对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响》一文中研究指出目的:探讨乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)胰酶样蛋白酶(TLP)活性的影响。方法:在BHI培养基中加入不同浓度的乳铁蛋白和一定浊度的P.g进行厌氧培养。测定培养物上清液和菌细胞上清液中TLP活性及蛋白质含量,计算TLP的比活。结果:乳铁蛋白对P.g结合态TLP活性有明显的抑制作用,高浓度的牛乳铁蛋白对P.g游离态TLP活性有明显抑制作用,但低浓度的牛乳铁蛋白对其抑制不明显。结论:乳铁蛋白抑制P.g TLP的活性,提示其对牙周病可能具有防治作用。(本文来源于《实用口腔医学杂志》期刊2012年01期)

赵妍嫣,胡林林,赵宏伟,姜绍通[8](2011)在《胰酶和木瓜蛋白酶混合酶解猪板骨工艺条件的研究》一文中研究指出利用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶混合酶酶解猪骨粉,以提高酶解液中钙的溶出率。通过单因素和正交实验,确定了混合酶酶解猪骨粉的最佳工艺条件为:温度45℃,酶配比1g:1g,pH7.5,酶与底物为20mg:3g,此时酶解液中的钙含量为2.7757mg/g、钙磷比为2.77/1。(本文来源于《食品工业科技》期刊2011年04期)

姚望[9](2011)在《乳铁蛋白对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响》一文中研究指出结果显示天然牛乳铁蛋白对P.g的生长具有明显的抑制作用,在P.g数量为108CFU/ml时,乳铁蛋白的MIC为5mg/ml。P.g的TLP存在两种形式:分泌到细胞外的游离态和与菌细胞结合的结合态,但主要以与菌细胞结合的结合态形式存在。P.g结合态TLP水解蛋白的能力比游离态强,其酶比活随乳铁蛋白浓度的升高而降低。当乳铁蛋白浓度在1.25mg/ml以上时,随着其浓度的增加培养物上清液中TLP(游离态)本实验以牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)作为研究对象,选用天然牛乳铁蛋白,研究牛乳铁蛋白对牙龈卟啉单胞菌的生长是否有抑制作用,并在此基础上探讨牛乳铁蛋白对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶(trypsin-like protease,TLP)的活性是否有影响以及影响的程度,为在临床应用天然牛乳铁蛋白治疗牙周病提供理论依据。本实验以P.g ATCC33277作为实验菌株,采用液体二倍稀释法进行药敏实验,测定天然牛乳铁蛋白对P.g的最小抑菌浓度(MIC);并以此浓度为参考,配制牛心脑浸液培养基,加入不同浓度的牛乳铁蛋白和P.g菌悬液,牛乳铁蛋白终浓度分别为l/2MIC、l/4MIC和l/8MIC,P.g浓度为108CFU/ml,在37℃恒温条件下厌氧培养48小时,离心后收集培养物上清液,并将剩余菌细胞超声破碎,再次离心收集菌细胞破碎后的上清液,测定培养物上清液和菌细胞破碎后上清液中TLP活性值及蛋白含量,计算TLP的比活。比活降低,但低浓度乳铁蛋白(<1.25mg/ml)对其影响不明显。通过本实验可得到结论:天然牛乳铁蛋白对P.g的生长有抑制作用,对P.g结合态TLP活性有明显的抑制作用,高浓度的牛乳铁蛋白对P.g游离态TLP活性有明显抑制作用,但低浓度的牛乳铁蛋白对其抑制不明显。(本文来源于《吉林大学》期刊2011-04-01)

王昌亮,张国华,吴旭,胡薇,唐发兵[10](2010)在《豚鼠过敏性休克肺组织中类胰蛋白酶和胃促胰酶的表达》一文中研究指出目的观察豚鼠过敏性休克死亡肺组织中类胰蛋白酶和胃促胰酶的表达情况,试图为过敏性休克死亡提供客观的诊断依据。方法健康豚鼠24只,随机均分为实验组和对照组,每组再分死亡即时组、冷藏48h组和冷冻7d组,每组4只。实验组将0.5mL人混合血清用生理盐水1∶10稀释,注射于豚鼠后掌皮内,致敏后3周以人混合血清1mL注入心腔诱发过敏性休克致死;对照组采用生理盐水代替混合血清。提取豚鼠心血及肺组织,应用免疫组化染色和图像分析技术观察类胰蛋白酶和胃促胰酶的表达情况。结果对照组豚鼠肺组织中类胰蛋白酶和胃促胰酶阳性细胞数量较少,分布在小血管和小气管周围。实验组肺组织中类胰蛋白酶和胃促胰酶阳性细胞明显增多,多数细胞形态不规则,阳性染色颗粒脱出肥大细胞并弥散到组织间隙。冷藏48h和冷冻7d的条件下对这两种酶的表达无明显影响。结论过敏性休克致死豚鼠肺组织中类胰蛋白酶和胃促胰酶的表达明显增强,在冷藏48h和冷冻7d内的条件下,可作为过敏性休克死亡的一项诊断依据。(本文来源于《中国法医学杂志》期刊2010年04期)

胰酶样蛋白酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:牙周病一直以来被认为是一种成人口腔疾病,然而,近年来牙周病的发病率在儿童、青少年时期呈不断增长的趋势。菌斑生物膜是牙周病发病的始发因子,其中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)在牙周炎的发病过程中占据重要角色,P.gingivalis及其代谢产物可破坏牙周支持组织。赤藓糖醇(erythritol),是一种安全、无毒副作用、热量值低、无致龋性的食品添加剂,作为新型的甜味调节剂被广泛应用于食品、保健品等领域中。目前,学者们主要集中于赤藓糖醇防龋特性的研究,并发现其具有抑制致龋菌的生长繁殖及降低其产酸能力的作用。本实验以P.gingivalis作为实验对象,研究赤藓糖醇对P.gingivalis生长及黏附的影响,并进一步研究及探讨赤藓糖醇对其产生的胰酶样蛋白酶(trypsin-like protease,TLP)活性的影响作用,为临床上应用赤藓糖醇防治牙周病提供新的方向。方法:本实验以标准菌株P.gingivalis ATCC33277作为研究对象,配制牛心脑浸液培养基(BHI培养基),向培养液中加入赤藓糖醇以配制成2%、6%、10%、15%、20%质量浓度的溶液,设不加赤藓糖醇的BHI培养基为对照组。分别加入P.gingivalis菌悬液,在37℃恒温厌氧条件下培养,以4小时的时间间隔测量培养液的菌密度值(OD值),绘制其生长变化曲线,并用稀释涂板计数法观察各组菌落的数量及颜色变化。实验以正畸拔除牙的牙骨质表面作为P.gingivalis黏附载体,使用扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)和激光共聚焦扫描显微镜(Confocal Laser Scanning Microscop,CLSM)观察赤藓糖醇对P.gingivalis在牙骨质表面的黏附情况的影响。在上述配制的溶液中加入P.gingivalis菌悬液,厌氧条件下培养48h,收集培养细菌的上清液和菌细胞的破碎液,对赖氨酸蛋白酶(Rgp)行粗提取,测定TLP的活性及计算底物降解程度下Rgp活性百分比。结果:本实验结果显示赤藓糖醇可抑制P.gingivalis的生长及黏附作用,且赤藓糖醇的浓度越高其抑制效果越明显,组间两两比较差异具有统计学意义(P<0.05);质量浓度为10%的赤藓糖醇即可良好的抑制生物膜的形成。赤藓糖醇能够延长P.gingivalis在血平板中聚集血红素形成特征性黑色菌落的时间。P.gingivalis产生的TLP既可存在于菌细胞膜的表面,也可释放到培养液中呈游离的状态,且膜表面TLP的活性较游离状态的强。赤藓糖醇对TLP的活性具有抑制作用,且呈浓度依赖特性,赤藓糖醇浓度越高,其酶的活性越低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:通过本实验可以得出,新型甜味剂赤藓糖醇对P.gingivalis的生长具有抑制作用,并可降低其在牙骨质表面的黏附作用,对P.gingivalis产生的TLP活性的抑制效果随赤藓糖醇的升高而降低。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

胰酶样蛋白酶论文参考文献

[1].许小枫,崔瑜霞,邓一泓,余蓉.从生产胰岛素的胰渣中制备胰酶、胰蛋白酶及糜蛋白酶[J].华西药学杂志.2016

[2].李维丹.赤藓糖醇对牙龈卟啉单胞菌的生长、黏附及胰酶样蛋白酶活性的影响分析[D].福建医科大学.2016

[3].仲琦.穿心莲内酯对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响[D].吉林大学.2016

[4].陈春雨,刘鹤,何畔,卢建忠,应頔.野菊花提取物对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的抑制作用[J].吉林大学学报(医学版).2015

[5].陈春雨.野菊花对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响[D].吉林大学.2014

[6].阙斐,赵粼,陈锡威.胰酶提升小麦蛋白酶解产物乳化活性工艺及其功能特性研究[J].食品工业科技.2014

[7].姚望,张莉,马宁.乳铁蛋白对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响[J].实用口腔医学杂志.2012

[8].赵妍嫣,胡林林,赵宏伟,姜绍通.胰酶和木瓜蛋白酶混合酶解猪板骨工艺条件的研究[J].食品工业科技.2011

[9].姚望.乳铁蛋白对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响[D].吉林大学.2011

[10].王昌亮,张国华,吴旭,胡薇,唐发兵.豚鼠过敏性休克肺组织中类胰蛋白酶和胃促胰酶的表达[J].中国法医学杂志.2010

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