导读:本文包含了牛乳铁素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:牛乳铁素,重组PCR,融合基因,融合蛋白
牛乳铁素论文文献综述
魏新元,闻盼盼,丑敏霞,樊明涛[1]（2010）在《重组牛乳铁素融合蛋白的原核表达及其抑菌活性分析》一文中研究指出为建立生物合成牛乳铁素的方法,根据牛乳铁素氨基酸序列确定其编码序列,利用PCR技术获得基因扩增产物,接着将该产物与编码鱼腥蓝细菌Anabaena sp.PCC7120的DNA聚合酶基因dnaENI中断裂的内含肽基因Asp dnaEIn的PCR产物进行重组PCR,将获得的重组融合基因再克隆到表达载体pET-28a构建重组融合表达质粒。结果显示,融合表达质粒转化大肠杆菌后经诱导能在大肠杆菌表达宿主Escherichia.coli BL21(DE3)中大量表达,且细胞裂解液与纯化的Anabaena sp.PCC7120中含断裂内含肽Asp DnaEIc的DNA聚合酶蛋白DnaECI混合反应后对金黄色葡萄球菌具有抑制作用。(本文来源于《食品科学》期刊2010年19期）
胡志和,刘传国,李娜,庞广昌,陈庆森[2]（2010）在《牛乳铁素对几种免疫细胞因子的影响》一文中研究指出通过对灌胃牛乳铁素(LfcinB)后小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10和TNF-α水平的变化,评价其免疫调节作用。结果表明,灌胃牛乳铁素后3h采血,分离其血清,用ELISA试剂盒检测细胞因子,与阴性对照组相比,对细胞因子IL-2和TNF-α产生极显著促进作用(P≤0.01),对抗炎细胞因子IL-4有极显着的抑制作用(P≤0.01),对IL-6有显着的抑制作用(P≤0.05),对抗炎细胞因子IL-10的分泌影响也极显着(P≤0.01),并且IL-10随TNF-α的增强而增强,起到平衡作用。因此,口服牛乳铁素对实验小鼠具有免疫增强和调节作用。(本文来源于《食品科学》期刊2010年17期）
孙金霞,苗利光,刘艳环,李海涛,李庆超[3]（2009）在《牛乳铁素研究进展》一文中研究指出牛乳铁素是由牛乳铁蛋白在酸性条件下经胃蛋白酶消化后产生的多肽,具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗炎症和免疫调节等多种生物学功能,可应用于多个方面。综述了牛乳铁素结构、功能、作用机制、制备及应用的研究进展。(本文来源于《特产研究》期刊2009年04期）
胡志和,冯飞,刘传国,庞广昌[4]（2008）在《牛乳铁素的制备纯化与氨基酸序列分析》一文中研究指出对牛乳铁素的制备和分离纯化方法进行研究。牛乳铁蛋白经胃蛋白酶水解,其产物经不同分离介质进行分离纯化,用毛细管电泳检测其纯度。用氨基酸分析仪确定其氨基酸组成,并进行适合度检验。结果表明,采用Butyl-Toyopearl650M树脂分离,其纯度为95.6%。纯化出的产物氨基酸组成和序列与已知的牛乳铁素无显着差异。(本文来源于《食品科学》期刊2008年07期）
俞春英[5]（2007）在《牛乳铁素基因的克隆及在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达》一文中研究指出乳铁蛋白(LF)是一种具有多种生物学功能的天然活性铁结合糖蛋白，在杀菌、抗病毒、免疫调节等方面起重要作用，是调节动物体液中自由铁离子水平的转铁家族中最重要的成员。天然乳铁蛋白主要存在于动物乳汁尤其是人初乳中，含量可达6-8mg／mL。乳铁素是乳铁蛋白在酸性条件下经蛋白酶消化后从N-端释放出来的一个小肽段，并且抗菌活性强于乳铁蛋白。国外对牛乳铁素、人乳铁素、山羊乳铁素、鼠乳铁素等的抗菌活性进行了比较，结果发现牛乳铁素的抗菌活性最强。牛乳铁素(LfcinB)作为一种广谱高效的抗菌肽，在替代传统抗生素研究中显示了巨大的潜力和广阔的应用前景。由于自然界中的LfcinB资源有限，提取成本高，本试验拟通过基因工程技术建立一个体外高效表达系统，以期为大量获得LfcinB并进行深入研究奠定基础。本试验根据GenBank中已报道的BLF基因(NO:NM_180998)，化学合成LfcinB的单链基因序列。以合成的序列为模板，用相应的特异性引物扩增LfcinB基因。结果表明扩增得到的PCR产物浓度高、特异性强，且大小在92bp左右。将PCR产物直接克隆到pMD18-T载体上，经过菌落PCR鉴定和BamHⅠ／SalⅠ限制性内切酶酶切分析，初步确认目的基因已克隆入T载体。将含重组质粒的菌液送上海生物工程公司测序，结果与本试验所合成的单链基因序列同源性为100％，表明扩增得到的是LfcinB基因。PCR产物经回收纯化后用EcoRⅠ、NotⅠ限制性内切酶进行双酶切，胶回收获得连接用LfcinB基因片段。将原核表达载体pET-22b(+)和真核表达载体pPIC9K分别用EcoRⅠ、NotⅠ限制性内切酶进行双酶切，然后胶回收目的片段。将酶切的PCR产物与酶切的原核表达载体pET-22b(+)连接并转化大肠杆菌BL21感受态细胞，加入IPTG诱导目的蛋白的表达，分别收集诱导2h、3h、4h的菌液。同时设一个不加IPTG诱导的空白对照和一个经IPTG诱导的非重组菌对照。经菌落PCR鉴定、酶切分析确认LfcinB基因已经插入了多克隆位点。表达产物经SDS-PAGE分析，结果在约3.2KD的位置有目的条带，而对照组没有出现这条带，表明目的蛋白得到了表达，且诱导3h的表达量最高。将酶切的PCR产物与酶切的真核表达载体pPIC9K连接，用SalⅠ线性化重组质粒，并通过原生质体转化法转入毕赤酵母GS115感受态细胞。用G418浓度分别为0.5、0.75、1.0、1.5mg／mL的YPD平板筛选多拷贝His~+转化子，再通过多拷贝His~+转化子在MM和MD板上的生长情况进一步确定转化子的表型，最后诱导目的基因在毕赤酵母中的分泌表达。收集的上清经冷冻干燥浓缩后进行SDS-PAGE分析，结果在分子量约为3.2KD的位置有目的产物的带，而对照组没有出现这条带，表明该菌株可以表达目的蛋白，但目的蛋白的条带是经过浓缩后才被SDS-PAGE检测到，表明表达的目的蛋白的量不是很理想。将上清液按同样方法浓缩，用本实验室保存的大肠杆菌对浓缩产物做抑菌试验，初步鉴定其抗菌活性，同时设阴性对照。结果阴性对照孔没有抑菌圈，试验孔有抑菌圈，约为2.4cm，说明表达产物具有一定的抗菌活性。(本文来源于《西南大学》期刊2007-05-01）
冯飞[6]（2007）在《牛乳铁素的制备分离纯化及其抗菌活性的研究》一文中研究指出牛乳铁素是牛乳铁蛋白在酸性环境下经胃蛋白酶作用N端释放的一段由25个氨基酸组成的多肽,具有抗菌、抗病毒、抑制肿瘤细胞生长、调控基因表达、调节免疫等功能。牛乳铁素作为抗菌肽应用于食品、保健品、医药等行业,具有广阔的应用和开发前景。本研究采用离子交换方法,结合离心、超滤以及冷冻干燥等工艺实现了高纯度牛乳铁素的制备。在测定牛乳铁素最小抑菌浓度的基础上研究了几种常用食品添加剂对其抗菌活性的影响。另外还初步进行了牛乳铁蛋白抗炎性能的研究。实验结果表明:酶解牛乳铁蛋白制备乳铁素的最佳酶解条件为:底物浓度为5%(w/v),酶与底物浓度比为1:30(w/w),酶解时间为60min。选用截留分子量为10000Da和6000Da的超滤膜进行超滤后,用Butyl-Toyopearl 650M型阳离子交换树脂吸附,pH=5.0的柠檬酸-磷酸缓冲液洗脱,10mM盐酸作为洗脱剂可以得到纯度为95.6%的牛乳铁素(还可分别得到纯度为40.6%、80.5%的LfcinB)。牛乳铁素对大肠杆菌的最小抑菌浓度为15μg/mL,测定了四种合成甜味剂,四种天然甜味剂,四种防腐剂对牛乳铁素抗菌活性的影响。(本文来源于《天津商业大学》期刊2007-04-01）
冯飞,胡志和,庞广昌[7]（2006）在《合成甜味剂对牛乳铁素抗菌活性的影响》一文中研究指出乳铁素B是牛乳铁蛋白经胃蛋白酶酶解后得到的最重要的抗菌肽,具有很强的抗菌活性。选取大肠杆菌为实验菌株,进行了合成甜味剂对乳铁素抑菌活性影响的研究。研究表明,在牛肉膏蛋白胨培养基中,pH7.0,菌浓为107CFU/ml的条件下,纯化乳铁素B对大肠杆菌的最小抑菌质量浓度为20μg/ml;阿斯巴甜、甜蜜素、糖精钠在0～5mg/ml的质量浓度范围内,对乳铁素B的抗菌活性都有削弱的作用;而安塞蜜在0～5mg/ml的质量浓度范围内,对乳铁素B的抗菌活性没有太大的影响。(本文来源于《食品科学》期刊2006年11期）
胡志和,庞广昌,陈庆森[8]（2006）在《牛乳铁蛋白及乳铁素的生产与应用现状》一文中研究指出牛奶中的乳铁蛋白和其水解产物乳铁素具有多种生物活性功能。综述了国外的乳铁蛋白和乳铁素生产、分离和纯化的方法,并介绍了乳铁蛋白和乳铁素作为食品保存剂、抗氧化剂、营养强化剂、免疫强化剂、免疫调节剂等应用的现状。展望了我国乳铁蛋白和乳铁素生产的前景。(本文来源于《食品科学》期刊2006年06期）
李铁晶,陈智斌,付红,周东坡[9]（2005）在《牛乳铁素结构和功能研究进展》一文中研究指出牛乳铁蛋白是一种多功能蛋白质,具有抗菌,抗真菌,抗病毒,抗癌,抗炎,以及免疫调节作用,而这些性质都与其高度碱性的N端区域有关。这部分蛋白能在胃的酸性pH值条件下释放出来,新生成的含有25个氨基酸残基的抗菌肽被称为乳铁素。在本文中综述了该抗菌肽结构,以及结构和功能相互联系。抗菌肽和细胞膜的相互作用表明,同中性的真核细胞膜相比它更容易与带负电荷的细菌细胞膜和癌细胞膜发生反应,肽的结合破坏了膜的正常结构。对乳铁素活性非常重要的残基是色氨酸和精氨酸,他们是使蛋白质或合成抗菌肽类能自然的穿过细胞膜区域的根本原因。同时乳铁素的抗菌,抗真菌,抗病毒,抗癌性质与富含Trp/Arg的区域有关。(本文来源于《中国乳品工业》期刊2005年07期）
张东送,庞广昌,胡志和,王彦,刘萍[10]（2004）在《酶解牛乳铁蛋白制备乳铁素B的酶解条件研究》一文中研究指出乳铁素B是牛乳铁蛋白经胃蛋白酶酶解后所得到的最重要的抗菌肽,乳铁蛋白酶解生成乳铁素后抗菌活性大大增强。通过正交试验确立了牛乳铁蛋白酶解制备乳铁素B的最佳条件,指出在底物质量浓度为50g/L,酶与底物质量浓度比为1∶30(质量比),酶解时间为60min时所得的乳铁素质量浓度及活性较好。(本文来源于《中国乳品工业》期刊2004年05期）
牛乳铁素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
通过对灌胃牛乳铁素(LfcinB)后小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10和TNF-α水平的变化,评价其免疫调节作用。结果表明,灌胃牛乳铁素后3h采血,分离其血清,用ELISA试剂盒检测细胞因子,与阴性对照组相比,对细胞因子IL-2和TNF-α产生极显著促进作用(P≤0.01),对抗炎细胞因子IL-4有极显着的抑制作用(P≤0.01),对IL-6有显着的抑制作用(P≤0.05),对抗炎细胞因子IL-10的分泌影响也极显着(P≤0.01),并且IL-10随TNF-α的增强而增强,起到平衡作用。因此,口服牛乳铁素对实验小鼠具有免疫增强和调节作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
牛乳铁素论文参考文献
[1].魏新元,闻盼盼,丑敏霞,樊明涛.重组牛乳铁素融合蛋白的原核表达及其抑菌活性分析[J].食品科学.2010
[2].胡志和,刘传国,李娜,庞广昌,陈庆森.牛乳铁素对几种免疫细胞因子的影响[J].食品科学.2010
[3].孙金霞,苗利光,刘艳环,李海涛,李庆超.牛乳铁素研究进展[J].特产研究.2009
[4].胡志和,冯飞,刘传国,庞广昌.牛乳铁素的制备纯化与氨基酸序列分析[J].食品科学.2008
[5].俞春英.牛乳铁素基因的克隆及在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达[D].西南大学.2007
[6].冯飞.牛乳铁素的制备分离纯化及其抗菌活性的研究[D].天津商业大学.2007
[7].冯飞,胡志和,庞广昌.合成甜味剂对牛乳铁素抗菌活性的影响[J].食品科学.2006
[8].胡志和,庞广昌,陈庆森.牛乳铁蛋白及乳铁素的生产与应用现状[J].食品科学.2006
[9].李铁晶,陈智斌,付红,周东坡.牛乳铁素结构和功能研究进展[J].中国乳品工业.2005
[10].张东送,庞广昌,胡志和,王彦,刘萍.酶解牛乳铁蛋白制备乳铁素B的酶解条件研究[J].中国乳品工业.2004