论文摘要
目的探讨CRTC2调节糖异生途径参与非小细胞肺癌发生的分子机制。方法 QPCR检测70例非小细胞肺癌患者癌和癌旁组织中CRTC2、miR-451及糖异生关键酶G6Pase和PEPCK的表达水平。建立CRTC2缺失的非小细胞肺癌大鼠模型,并通过注射miR-451 inhibitor及葡萄糖耐量实验（GTT）、丙酮酸耐受实验（PTT）和胰岛素耐受实验（ITT）检测NSCLC大鼠的葡萄糖代谢水平。采用Tunel、Western和QPCR证明CRTC2影响NSCLC细胞A549凋亡发生的机制,进一步运用染色质免疫共沉淀（ChIP）和荧光素酶报告系统鉴定CRTC2调控miR-451的分子机制。结果CRTC2、G6Pase和PEPCK在70例肺癌组织中的表达水平明显高于癌旁（P <0. 01）,而肺癌组织中miR-451的表达则明显低于癌旁（P <0. 01）; pearson相关性分析发现CRTC2与G6Pase、PEPCK的表达水平呈明显正相关（P <0. 01）,与miR-451的表达则显著负相关（P <0. 01）。尾静脉注射干扰CRTC2的慢病毒载体导致非小细胞肺癌大鼠在GTT、PTT和ITT实验中的血糖水平显著下降（P <0. 01）,在干扰CRTC2的基础上进一步注射miR-451 inhibitor导致大鼠血糖水平有所回升（P <0. 01）。QPCR、western blot及Tunel实验显示:miR-451 mimic能够抑制靶基因Gyk及下游糖异生关键酶G6Pase和PEPCK的表达,同时促进了A549细胞凋亡; CRTC2过表达上调Gyk、G6Pase和PEPCK的表达水平并抑制了miR-451的促凋亡作用。经Ch IP和荧光素酶实验证实位于miR-451启动子-1121 bp的CREB结合元件是CRTC2抑制miR-451转录活性的关键位点。结论 CRTC2通过抑制miR-451转录进一步激活miR-451靶基因Gyk及下游G6Pase和PEPCK的表达,从而促进非小细胞肺癌的糖异生途径、减少葡萄糖耗竭引发的细胞凋亡,从细胞代谢水平对非小细胞肺癌的发生阐明新的理论依据。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 汪矗,李科,石少卿,李敏
关键词: 糖异生,非小细胞肺癌
来源: 实用癌症杂志 2019年12期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 肿瘤学
单位: 昆明医科大学第一附属医院,昆明医科大学第三附属医院
基金: 云南省教育厅科学研究基金项目(编号:2017zDX169)
分类号: R734.2
页码: 1921-1927+1940
总页数: 8
文件大小: 1476K
下载量: 97