谷氨酸棒状杆菌ATCC 14067阻遏蛋白ArgR与L-精氨酸合成途径相关基因的相互作用

论文摘要

在细菌中阻遏蛋白ArgR通过与精氨酸合成途径相关基因中的保守序列结合,阻遏相关基因的转录。在谷氨酸棒状杆菌ATCC 14067中,精氨酸生物合成涉及的基因位于基因簇argCJBDFRGH和carAB中。构建重组菌株E.coli BL21（DE3）/pET22b-argR,诱导表达ATCC 14067来源的ArgR,成功得到目的蛋白。利用分子筛色谱柱对ArgR蛋白进行分析,表明ArgR蛋白相对分子质量在108 ku左右,在活性状态下ArgR蛋白为六聚体。合成生物素标记的谷氨酸棒状杆菌ATCC 14067来源的argC、argJ、argB、argF、argG、argH、carA基因片段,采用凝胶阻滞实验（EMSA）观察ArgR蛋白与其在体外的相互作用。结果表明,ArgR蛋白能够在体外与argC基因-26～+32 bp、argB基因-86～-29 bp、argG基因-161～-104 bp、carA基因-99～-42 bp结合,且与argB基因的结合程度最大,但不与argJ、argF、argH基因片段结合。本文首次将argC、argB、argG、carA基因中ArgR蛋白结合的靶标位点定位在60bp内,为更深入的研究谷氨酸棒状杆菌ATCC 14067中精氨酸合成的调控机制提供了理论依据。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 敖婉钦,张豪,郑穗平

关键词: 谷氨酸棒状杆菌,分子筛色谱柱,凝胶阻滞实验

来源: 现代食品科技 2019年01期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 华南理工大学生物科学与工程学院

基金: 国家自然科学基金项目(31671840)

分类号: Q78

DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.1.003

页码: 15-21

总页数: 7

文件大小: 1361K

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