导读:本文包含了核黄素操纵子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:核黄素,芽孢,杆菌,枯草,基因,呼吸,关键。
核黄素操纵子论文文献综述
夏苗苗,刘露,班睿[1]（2015）在《枯草芽孢杆菌核黄素操纵子与ribC基因的修饰与遗传效应》一文中研究指出【目的】研究核黄素操纵子(rib)组成型高表达,以及rib C基因低水平表达对枯草芽孢杆菌过量合成核黄素的影响。【方法】在染色体原位修饰启动子,用m RNA稳定子替换m RNA前导区,使rib操纵子组成型高表达;修饰rib C基因的启动子,降低rib C基因的表达水平。采用q RT-PCR方法,表征基因的相对表达水平;通过摇瓶发酵,测定重组菌的生物量和核黄素产量,表征相关基因修饰所表现的遗传效应。【结果】用gsi B m RNA稳定子替换核黄素操纵子的m RNA前导区,使其相对表达水平提高了约1 500倍。rib C基因启动子-35区的首个碱基由"T"突变为"C",使rib C基因的表达水平下降了97%以上。得到的重组菌株LX34在补加蔗糖20 g/L的LB培养基上摇瓶发酵36 h,可积累核黄素2.1 g/L,同时生物量没有明显下降。【结论】使用gsi B m RNA稳定子,能够有效地提高目标基因或操纵子的表达水平;启动子-35区首个碱基的点突变,能够有效降低rib C基因的表达水平;rib操纵子过量表达和rib C基因低水平表达,使细胞能够过量合成并积累核黄素。(本文来源于《微生物学通报》期刊2015年01期）
张西锋,王丽梅,刘梁,李万芬[2]（2011）在《枯草芽孢杆菌核黄素操纵子rib operon的克隆与表达》一文中研究指出目的:构建产核黄素的枯草芽孢杆菌基因工程菌。方法:以穿梭载体pEB03构建核黄素操纵子的表达质粒载体pGJB13和pGJB14,与质粒pMX45分别转化产核黄素的枯草芽孢杆菌GJ07,并通过发酵摇瓶实验检测核黄素的产量。结果:得到产核黄素的工程菌GJ13、GJ14和GJ08,在以蔗糖为碳源的发酵条件下,GJ08可产核黄素820mg/L,提高了约55%。结论:得到了产核黄素的高产菌种GJ08。(本文来源于《生物技术》期刊2011年05期）
段云霞,陈涛,陈洵,王靖宇,赵学明[3]（2010）在《在枯草芽孢杆菌中表达B.cereus ATCC14579的异源核黄素操纵子提高核黄素产量(英文)》一文中研究指出Fragment containing the whole riboflavin(rib)operons of B.cereus ATCC14579 was detected from GenBank and annotated.The rib operon of ATCC14579 was cloned with Pn,its native promoter,or with P43,the vegetative growth promoter,into the plasmid.Expression analysis showed that heterologous rib operon was operative in B.subtilis.Integrative plasmid with P43-rib fragment was integrated into the chromosome of B.subtilis RH33,yielding transformant B.subtilis PY.With optimized medium components,4.3 g·L -1 of riboflavin was achieved in batch culture of B.subtilis PY,which was 27%enhancement compared to the host strain.Real-time reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR)analysis indicated that the transcriptional level of ribA maintained 2.8-fold higher with the expression of herterologous rib operon.Furthermore,the stability of B.subtilis PY was increased form 45%to 87%.The high transcriptional level of rib gene and higher stability of B.subtilis PY could explain the increased riboflavin production.(本文来源于《Chinese Journal of Chemical Engineering》期刊2010年01期）
张西锋,郭蔼光[4]（2009）在《同源重组法构建枯草芽孢杆菌核黄素操纵子突变株》一文中研究指出为了解除核黄素合成的反馈调节和提高核黄素的产量,以受体菌的核黄素操纵子为同源重组的指导序列,构建了整合表达载体pB1和pB2,通过双交叉同源重组的方法将线性化的pB1和pB2分别整合到受体菌的染色体上.构建了核黄素操纵子的rfn框和启动子ribP1被pB9启动子替换,并在ribB与ribA基因之间引入PnprE启动子的枯草芽孢杆菌核黄素操纵子突变株GJ04和GJ05.通过PCR方法验证了同源重组的正确性.基因工程菌遗传稳定,能分泌产生核黄素.发酵摇瓶实验结果表明:同源重组突变后的菌株GJ04和GJ05的核黄素产量明显高于具有玫瑰黄素抗性标记的菌株GJ02,发酵72 h分别提高了8.6%和11.2%.(本文来源于《武汉大学学报(理学版)》期刊2009年03期）
李晓静[5]（2006）在《枯草芽孢杆菌核黄素操纵子及呼吸链的代谢工程改造》一文中研究指出本文围绕核黄素生物合成反应对产核黄素枯草芽孢杆菌进行了代谢工程改造,构建了一系列产核黄素枯草芽孢杆菌基因工程菌。研究了核黄素操纵子启动子替换及ribA基因的扩增对产核黄素工程菌核黄素生物合成的影响。通过bd氧化酶缺失对枯草芽孢杆菌呼吸链进行了改造。建立了枯草芽孢杆菌的生化反应网络,计算了工程菌的理论得率,并对呼吸链改造前后的工程菌在间歇培养过程中的代谢通量进行了比较分析。最后,通过原生质融合技术改进了产核黄素基因工程菌的性能。得到的主要结果如下:利用枯草芽孢杆菌中组成型启动子SPO2和P43成功替换了核黄素操纵子的一级启动子ribP1。利用不同的整合型载体通过不同整合方式构建了系列核黄素操纵子一级启动子替换的产核黄素基因工程菌。在构建的所有工程菌中,以pUC18为克隆载体所构建的含核黄素操纵子整合型载体转化受体菌得到的工程菌B. subtilis PK具有最高的核黄素生物合成能力,与出发菌相比提高了10倍。建立了产核黄素枯草芽孢杆菌生化反应网络模型,计算了工程菌B. subtilis PK的理论得率,得出该工程菌核黄素的最大合成速率为0.48 mmol葡萄糖/g (CDW)/h,生物量的最大得率为0.47 g cell C/g glucose C。研究了ribA基因的扩增对工程菌B. subtilis RH13、B. subtilis PK和B. subtilis PK/pXJ96核黄素生物合成能力的影响。结果表明:在核黄素操纵子表达量低的工程菌中,ribA基因的表达是核黄素过量合成的限制因素。构建了系列cyd基因缺失的产核黄素工程菌。对比cyd基因缺失工程菌与其受体菌发现,cyd基因的缺失可使工程菌生长速率加快,最大生物量增加,菌体维持能降低,核黄素生物合成能力增强。通过对发酵副产物分析表明:cyd基因缺失工程菌中,乙酸含量明显降低,叁羟基丁酮含量明显升高。对工程菌B. subtilis PK/pXJ96和B. subtilis PK cyd /pXJ96通量分布的计算结果表明:cyd基因缺失可使工程菌中PP途径通量增强,用于生物量合成的葡萄糖百分比增加,并在一定程度上削弱了溢流代谢。基于基因组重排原理改进了产核黄素工程菌的生产性状,通过基因组重排得到的B. subtilis RP/pXJ96在摇瓶发酵条件下可产核黄素5.6 g/l,比B. subtilis RH33/pMX45提高了33%。B. subtilis RP/pXJ96的核黄素产率达到0.104 g核黄素/g葡萄糖,B. subtilis PK/pXJ96相比提高了42%。在5 L发酵罐流加发酵条件下发酵48小时,B. subtilis RP/pXJ96核黄素产量可达16 g/l,产率为0.06 g核黄素/g葡萄糖。(本文来源于《天津大学》期刊2006-06-01）
陈涛,王靖宇,班睿,陈洵,赵学明[6]（2005）在《核黄素操纵子在B.subtilis 24R7染色体上整合对核黄素合成的影响》一文中研究指出构建含有 B.subtilis 24 核黄素操纵子的整合型核黄素质粒 pRB40、pRB61 和 pRB63,研究了核黄素操纵子分别在B.subtilis 24R7染色体的 rib、amyE和thrC 位点整合对核黄素合成的影响.结果表明,核黄素操纵子通过单交换重组方式整合在上述位点可使核黄素合成量增加14%~19%,而通过双交换重组方式整合在 amyE 或 thrC 位点可使核黄素合成量增加 40% ~44%.增强核黄素操纵子在B.subtilis 24R7染色体上的稳定性可以提高核黄素的合成量.(本文来源于《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》期刊2005年01期）
周世奇[7]（2005）在《强启动子枯草芽孢杆菌核黄素操纵子整合型载体的构建并在枯草芽孢杆菌中的表达》一文中研究指出本论文研究的主要内容是以下内容:通过DNA片段原生质转化法,用带有完整recA基因的DNA片段转化产核黄素菌株B.subtilis 24(recA4突变株)原生质体,恢复了B.subtilis 24的同源重组功能。恢复recA基因功能恢复后,菌株的核黄素产量没有下降(为1.3g/L)是比较理想的受体菌。运用基因工程方法构建了带强启动子SPO2和P43及原启动子P1核黄素操纵子的叁个B.subtilis整合型质粒,发现叁个带核黄素操纵子质粒都可以在大肠杆菌中能产一定量的核黄素,核黄素产量P43>P1≈SPO2。然后,分别通过整合型质粒在B.subtilis D3染色体上定点(amyE位点)整合和随机整合研究了带不同启动子的核黄素操纵子在B.subtilis中的表达情况。定点(amyE位点)整合的转化子中,核黄素产量P1>P43>SPO2。通过比较发现随机整合的效果要比定点(amyE位点)整合好,通过筛选得到了带有P43强启动子核黄素操纵子的高产核黄素菌株,达3.1g/L。研究了不带启动子的rib结构基因构建的多克隆载体重组子在E.coli(Top10)中产核黄素的原因。利用PCR方法从B.subtilis扩增出只含核黄素操纵子中ribA结构基因的DNA片段,克隆到E.coli中发现该菌株已有一定的核黄素表达量。一方面解释了带rib结构基因的多克隆载体在E.coli(Top10)中产核黄素的原因,另一方面说明了单独增加ribA的基因剂量就能增加核黄素的产量。(本文来源于《天津大学》期刊2005-01-01）
王靖宇,陈涛,班睿,陈洵,赵学明[8]（2004）在《蜡样芽孢杆菌ATCC14579核黄素操纵子的克隆及在枯草芽孢杆菌中的表达》一文中研究指出利用BLAST从B cereusATCC14 5 79的基因组中找到一段与枯草芽孢杆菌核黄素操纵子具有较高相似性的4 6kb大小的基因组DNA片段 ,该片段中含有完整的核黄素操纵子。该操纵子结构基因的编码产物的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌核黄素操纵子相应结构基因的编码产物的氨基酸序列具有 99%的同源性。该片段被克隆到大肠杆菌 -枯草芽孢杆菌穿梭载体pHP13M中。表达分析的结果表明B cereusATCC14 5 79核黄素操纵子可在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中表达。利用PCR方法用来自枯草杆菌的sacB基因的启动子替换B cereusATCC14 5 79核黄素操纵子原有的启动子使其更好表达。替换启动子后的核黄素操纵子在本文使用的发酵条件下有较好的表达 ,核黄素产量从 39 5mg L增加到 6 1 7mg L。(本文来源于《生物加工过程》期刊2004年02期）
王靖宇[9]（2004）在《蜡样芽孢杆菌核黄素操纵子的克隆与在枯草芽孢杆菌中的表达》一文中研究指出本文利用生物信息学方法，以 B.subtilis 核黄素操纵子的 DNA 序列为比对序列，在 B.cereusATcc 10987 和 ATcc 14579 的基因组数据库中搜索同源片段，结果从中得到了两条与比对序列具有较高相似性的 DNA 片段，这两个片段经过0RF Finder 及 Blastp 分忻后发现其中包含完整的核黄素操纵子。它们的编码产物与 B.subtilis 168 及 B. amyloliquefaciens 核黄素操纵子的相应的编码产物具有98％以上的同源性。 利用 PcR 方法从基因组中扩增出这两条长度在 4.6kh 左右的核黄素操纵子片段，克隆到大肠杆菌一枯草芽孢杆菌穿梭载体 pHPl3 中，构建了重组质粒 pHP—BcRlO 和 pHP—BcRl4，并转化到大肠杆菌 DH5 a 中，结果发现两个 B.cereus核黄素操纵子部可以在大肠杆菌中表达。 将重组质粒 pHP—BcRl4 转化到核黄素缺陷型菌株 B.subtilis 1A210 中，通过缺陷型互补实验表明 B.cereusATcc 14579 核黄素操纵子可以在 B.subtilis 中表达。用来自枯草芽孢杆菌的 sacB 基因的启动子替换 B.cereusATCC 14579 核黄素操纵子，构建了重组质粒 psBcRl4。将 pSBCRl4 转化从 B.subtilis 24 改造而来的受体菌 B.subtilis 24RD 中。结果含有重组质粒 psBcRl4 的 B.subtilis 24RD 转化子经发酵鉴定后，与对照菌株 B.subtilis 24RD 相比，核黄素积累浓度从39．5mg/L 增加到 61.7 mg/g。(本文来源于《天津大学》期刊2004-01-01）
核黄素操纵子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建产核黄素的枯草芽孢杆菌基因工程菌。方法:以穿梭载体pEB03构建核黄素操纵子的表达质粒载体pGJB13和pGJB14,与质粒pMX45分别转化产核黄素的枯草芽孢杆菌GJ07,并通过发酵摇瓶实验检测核黄素的产量。结果:得到产核黄素的工程菌GJ13、GJ14和GJ08,在以蔗糖为碳源的发酵条件下,GJ08可产核黄素820mg/L,提高了约55%。结论:得到了产核黄素的高产菌种GJ08。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
核黄素操纵子论文参考文献
[1].夏苗苗,刘露,班睿.枯草芽孢杆菌核黄素操纵子与ribC基因的修饰与遗传效应[J].微生物学通报.2015
[2].张西锋,王丽梅,刘梁,李万芬.枯草芽孢杆菌核黄素操纵子riboperon的克隆与表达[J].生物技术.2011
[3].段云霞,陈涛,陈洵,王靖宇,赵学明.在枯草芽孢杆菌中表达B.cereusATCC14579的异源核黄素操纵子提高核黄素产量(英文)[J].ChineseJournalofChemicalEngineering.2010
[4].张西锋,郭蔼光.同源重组法构建枯草芽孢杆菌核黄素操纵子突变株[J].武汉大学学报(理学版).2009
[5].李晓静.枯草芽孢杆菌核黄素操纵子及呼吸链的代谢工程改造[D].天津大学.2006
[6].陈涛,王靖宇,班睿,陈洵,赵学明.核黄素操纵子在B.subtilis24R7染色体上整合对核黄素合成的影响[J].无锡轻工大学学报(食品与生物技术).2005
[7].周世奇.强启动子枯草芽孢杆菌核黄素操纵子整合型载体的构建并在枯草芽孢杆菌中的表达[D].天津大学.2005
[8].王靖宇,陈涛,班睿,陈洵,赵学明.蜡样芽孢杆菌ATCC14579核黄素操纵子的克隆及在枯草芽孢杆菌中的表达[J].生物加工过程.2004
[9].王靖宇.蜡样芽孢杆菌核黄素操纵子的克隆与在枯草芽孢杆菌中的表达[D].天津大学.2004
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