导读:本文包含了转录载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:转录,因子,载体,基因,受体,红花,顺式。
转录载体论文文献综述
龚小霞,李超,曹曦月,杨诚诚,黄超[1]（2019）在《人叉头转录因子O亚型6真核表达载体的构建及其对胶质瘤细胞存活的影响》一文中研究指出构建人叉头转录因子O亚型6(forkhead box class O6, FOXO6)基因的真核表达载体,并探究FOXO6对胶质瘤细胞存活的影响。以人神经胶质瘤细胞U251的c DNA为模板,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法扩增FOXO6基因片段,并将其与pRK5-myc载体连接,构建pRK5-myc-FOXO6重组质粒;将构建成功的重组质粒和空载体分别转染至U251细胞中进行表达,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’, 6-diamidino-2-phenylindole, DAPI)染色法分别检测FOXO6对U251细胞中转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator-1α, PGC-1α)转录水平的影响及其对U251细胞存活的影响。经双酶切鉴定及DNA测序表明:pRK5-myc-FOXO6重组质粒构建成功;FOXO6转染组中的PGC-1α转录水平出现了明显的下降,并出现了明显的细胞凋亡现象。上述结果显示,pRK5-myc-FOXO6重组质粒构建成功,体外实验暗示FOXO6可能通过抑制PGC-1α的表达来抑制U251细胞的能量代谢及抗氧化过程,进而诱导U251细胞的凋亡,这为后续深入研究FOXO6在胶质瘤上的作用机制和靶点奠定了基础。(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2019年05期）
周绍酉,周宁,张魁,李扬,赵洋[2]（2019）在《活化转录因子3基因Cas9编辑慢病毒载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的:构建靶向活化转录因子3(ATF3)在CRISPR/Cas9技术编辑的慢病毒载体。方法:针对ATF3基因设计并合成叁条对应的向导(gRNA)序列和一条无意义序列,向导RNA序列与双酶切U6-EF1a-Cas9-FLAG-P2A-EGFP载体链接,DNA测序鉴定重组载体。荧光/绝对定量法测定慢病毒浓度。共转染人微血管静脉内皮细胞(HMEC)后,实时定量荧光PCR检测ATF3 mRNA表达,验证HMEC细胞中是否含有ATF3基因及其是否有突变。对照病毒和叁个靶点慢病毒分别感染Cas9蛋白稳定株,感染后混合克隆进行抽提基因组DNA,将得到PCR产物进行错配酶法进行酶切,对于筛靶中阳性的PCR产物一组序列与野生型对比。Western blot检测ATF3蛋白表达,验证转染效果。定量PCR检测ATF3mRNA的改变。结果:测序表明ATF3在Cas9编辑下慢病毒载体构建成功。HMEC倒置荧光显微镜荧光视野和明视野进行对比,感染可达到80%转染率,GFP持续稳定表达。Western blot结果显示,ATF3蛋白表达有明显下调(P<0.05)。结论:本研究成功构建了ATF3Cas9编辑慢病毒载体,为进一步研究ATF3在静脉桥血管再狭窄中早期内皮功能失调作用机制及基因治疗提供了实验依据。(本文来源于《心肺血管病杂志》期刊2019年07期）
王芳,李伟,王舰[3]（2019）在《马铃薯DREB1转录因子的克隆和植物表达载体构建》一文中研究指出WRKY是DREB/CBF转录因子在植物非生物胁迫响应中起重要的调节作用、激活下游功能基因表达的一类反式作用因子,能增强植物的逆境适应性。本研究以10%的PEG6000胁迫下青薯9号茎段的cDNA为模板,根据马铃薯StDREB1 CDS序列设计特异引物,采用RT-PCR技术克隆了DREB1转录因子,并进行植物表达载体构建。结果表明,DREB1转录因子全长约783 bp,编码框为657 bp,编码218个氨基酸,蛋白质大小为27.6 kD,理论等电点为4.68。利用SWISS-MODEL在线工具和ProtScal对DREB蛋白二级结构和叁级结构进行预测及分析,结果表明,DREB1蛋白二级可能为mixed型,平均疏水性为-0.868,是亲水性蛋白,属于非跨膜蛋白、非分泌型蛋白。以2gcc.1.A为模板进行DREB1转录因子的叁级结构预测,其AP2结构域非常保守。经NCBI中氨基酸同源序列分析表明,DREB转录因子的核苷酸序列与番茄(Solanum pennellii)的氨基酸序列同源性最高达到88%。通过SacⅠ和XbaⅠ酶切,将StDREB1连接在pBI221-GFP载体上,构建了CaMV35S启动子驱动的DREB1转录因子的植物表达载体StpBI-GFP-DREB1。DREB1转录因子的克隆,为下一步从分子水平上验证其抗旱的生物学功能及提示马铃薯非生物胁迫抗逆机制提供科学依据,为提高马铃薯抗旱分子机制提供新材料。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年11期）
田军,刘晓红,韩林[4]（2019）在《靶向活化转录因子6的短发夹RNA重组腺病毒载体构建及对猪瓣膜间质细胞增殖与凋亡的影响》一文中研究指出目的:构建猪活化转录因子6-短发夹RNA(ATF6-shRNA)重组腺病毒干扰载体,观察其对猪瓣膜间质细胞(VIC)增殖与凋亡的影响。方法:针对猪ATF6序列设计3个shRNA干扰靶点,构建质粒,包装后进行病毒扩增,使用腺病毒转染VIC,通过定量PCR检测腺病毒对VIC中ATF6的干扰效率,通过Western blot法测定下调ATF6后VIC中胱天蛋白酶(caspase)-3的表达情况,并通过CCK-8法检测VIC增殖情况。结果:成功构建靶向ATF6的shRNA重组腺病毒载体。腺病毒转染VIC后,腺病毒对VIC中ATF6干扰效率提高;而ATF6、 caspase-3表达显着降低;自第2天起VIC存活率升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:成功构建靶向ATF6的shRNA重组腺病毒载体,通过降低VIC中ATF6的表达水平,减少VIC凋亡并促进细胞存活。(本文来源于《国际心血管病杂志》期刊2019年03期）
刘秀明,吕彦曦,杨龙宇,杜卫红,宫彦红[5]（2019）在《红花ERF1转录因子的克隆及植物表达载体的构建》一文中研究指出目的克隆1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区序列,并构建植物表达载体。方法在红花转录组测序基础上,利用RT-PCR方法克隆1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区序列(Ct ERF1)并进行生物信息学分析,利用ClustalW 1.83软件构建系统进化树,在Ct ERF1基因序列两端引入SpeI和XbaI酶切位点,构建含有35S启动子的植物超表达载体p BASTA-Ct ERF1。结果 CtERF1基因编码297个氨基酸,且具有典型的AP2/ERF基因的功能结构域,含有1个AP2区域,为ERF亚族蛋白,亚细胞定位分析推测其定位在细胞质和细胞核上。系统进化分析表明,Ct ERF1基因编码氨基酸与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其中与杨树和人参的亲缘关系最近。通过分子生物学方法,成功构建p BASTA-CtERF1植物表达载体。结论成功克隆了1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区基因Ct ERF1,并构建了植物表达载体p BASTA-Ct ERF1。(本文来源于《中草药》期刊2019年04期）
薛巨坤,王博,王莲萍,杨春雨,国会艳[6]（2019）在《一个顺式作用元件的载体构建及与一个MYB转录因子的互作分析》一文中研究指出转录因子通过与下游基因启动子上的顺式作用元件的互作调控目标基因的表达,引起一系列的应答反应,从而增强植物的抗逆能力。在我们前期的研究中,通过酵母单杂交技术发现白桦的BplMYB46转录因子能够与一个核心序列为"TGTCGC"的顺式作用元件结合。在本研究中,"TGTCGC"顺式作用元件的每个碱基分别被突变后构建到表达载体pHIS2中,然后利用酵母单杂交技术与BplMYB46转录因子进行互作分析,结果显示,当"TGTCGC"的核心序列的第二个碱基为G/A、第六个碱基为C/G时,酵母单菌落能在叁缺培养基TDO/3AT上生长,表明与BplMYB46转录因子结合的顺式作用元件的特异性序列为T (G/A) TCG(C/G)。本研究为后续通过BplMYB46转录因子与这个顺式作用元件的结合,来分析BplMYB46转录因子与下游基因的调控以及为筛选优良下游基因改良白桦的遗传性状提供数据基础。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年05期）
王棋,王心正,韩秋影,樊浩,李亭亭[7]（2019）在《小鼠干扰素γ受体β基因启动子荧光报告载体构建及转录活性分析》一文中研究指出目的克隆小鼠干扰素γ受体β(Ifngr2)基因启动子,并应用双荧光素酶报告系统对其进行功能分析。方法首先应用欧洲启动子在线数据库(EPD)获得小鼠Ifngr2基因的启动子区域,包含转录起始位点在内的-1344～+48的DNA序列。然后以小鼠MEF细胞基因组DNA为模板,利用PCR扩增调取该序列,并进一步插入pGL4.19-luc2CP荧光素酶报告载体。通过PCR扩增获得启动子系列截短体并分别插入pGL4.19-luc2CP载体,共获得包含6个不同长度启动子序列的荧光素酶报告载体。进一步通过双荧光报告实验检测不同截短体对Ifngr2基因转录活性影响,确定其影响转录活性的关键区域。通过点突变探究潜在转录因子对Ifngr2基因转录的影响。结果成功构建小鼠Ifngr2基因启动子荧光素酶报告载体,获得有转录活性的启动子报告基因载体。启动子系列截短分析显示,-132～-97和-1059～-727包含启动子重要元件。生物信息学分析发现,在-132～-97区域内存在潜在的NF-κB结合位点,进而通过点突变实验得到验证。结论通过构建小鼠Ifngr2基因启动子报告载体并对Ifngr2启动子进行功能分析,发现小鼠Ifngr2基因启动子中的转录因子NF-κB结合区域,提示NF-κB在Ifngr2基因表达调控中起重要作用。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2019年01期）
柳娜,杨文雄[8]（2018）在《转录因子DREB1A基因的克隆及植物表达载体的构建》一文中研究指出研究转录因子DREB1A在植物抗渗透胁迫反应中的作用。根据GenBank中登录的DREB1A基因的序列设计引物,用PCR方法从拟南芥中克隆DREB1A基因,利用基因重组技术成功构建了植物表达载体pCAMB1A1300-DREB1A。该结果为进一步利用DREB1A基因做遗传转化研究奠定了基础。(本文来源于《甘肃农业科技》期刊2018年11期）
姚娜,刘建雨,田媛媛,董园园,刘秀明[9]（2019）在《红花bHLH转录因子基因的克隆、表达分析及植物表达载体构建》一文中研究指出克隆红花花瓣中bHLH(basic helix-loop-helix)基因,研究其在红花不同开花时期花瓣中的表达量并构建其植物表达载体。利用红花基因组测序结果中富集到的bHLH家族中的基因CtbHLH1的开放阅读框,设计特异性引物进行PCR扩增。利用RT-PCR法分析在红花不同开花时期花瓣中bHLH1基因的表达量,同时构建植物表达载体p BASTA-bHLH1。获得bHLH1基因全长897 bp,编码298个氨基酸。红花bHLH1与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其与烟草的氨基酸序列相似性最高。实时荧光定量PCR分析表明,CtbHLH1基因在红花不同组织及不同开花时期的花瓣中表达水平具有显着差异,其在花瓣中表达量高,开花第3天表达量最高,末花期表达量低。另外其在根中有表达,在茎、叶中表达量极低。该研究成功地对bHLH1基因进行克隆及表达分析,并构建植物表达载体p BASTA-bHLH1。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2019年02期）
徐萍萍,房宸曦,梁丽娜,王亚鹏,张宁[10]（2018）在《马铃薯StERF5转录因子酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定》一文中研究指出为了筛选与马铃薯StERF5转录因子相互作用的宿主蛋白,构建其诱饵载体,本研究利用PCR方法扩增得到马铃薯StERF5基因的编码序列,克隆至载体p MD18-T,验证正确后插入到酵母双杂交系统诱饵表达载体pGBKT7,经双酶切、PCR反应及测序验证其正确后,利用PEG/LiAc法将构建好的重组诱饵载体pGBKT7-StERF5及空载体pGBKT7分别转化到酵母Y2HGlod感受态细胞中,检测其对酵母菌株是否有毒性作用和自激活活性。结果表明:扩增得到StERF5基因,成功构建了诱饵表达载体pGBKT7-StERF5,此诱饵载体对酵母宿主细胞无毒性且不具自主激活报告基因的功能。研究结果可为进一步利用酵母双杂交技术筛选与ERF5基因互作的宿主蛋白及功能研究提供科学依据。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年19期）
转录载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建靶向活化转录因子3(ATF3)在CRISPR/Cas9技术编辑的慢病毒载体。方法:针对ATF3基因设计并合成叁条对应的向导(gRNA)序列和一条无意义序列,向导RNA序列与双酶切U6-EF1a-Cas9-FLAG-P2A-EGFP载体链接,DNA测序鉴定重组载体。荧光/绝对定量法测定慢病毒浓度。共转染人微血管静脉内皮细胞(HMEC)后,实时定量荧光PCR检测ATF3 mRNA表达,验证HMEC细胞中是否含有ATF3基因及其是否有突变。对照病毒和叁个靶点慢病毒分别感染Cas9蛋白稳定株,感染后混合克隆进行抽提基因组DNA,将得到PCR产物进行错配酶法进行酶切,对于筛靶中阳性的PCR产物一组序列与野生型对比。Western blot检测ATF3蛋白表达,验证转染效果。定量PCR检测ATF3mRNA的改变。结果:测序表明ATF3在Cas9编辑下慢病毒载体构建成功。HMEC倒置荧光显微镜荧光视野和明视野进行对比,感染可达到80%转染率,GFP持续稳定表达。Western blot结果显示,ATF3蛋白表达有明显下调(P<0.05)。结论:本研究成功构建了ATF3Cas9编辑慢病毒载体,为进一步研究ATF3在静脉桥血管再狭窄中早期内皮功能失调作用机制及基因治疗提供了实验依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转录载体论文参考文献
[1].龚小霞,李超,曹曦月,杨诚诚,黄超.人叉头转录因子O亚型6真核表达载体的构建及其对胶质瘤细胞存活的影响[J].浙江大学学报(农业与生命科学版).2019
[2].周绍酉,周宁,张魁,李扬,赵洋.活化转录因子3基因Cas9编辑慢病毒载体的构建及鉴定[J].心肺血管病杂志.2019
[3].王芳,李伟,王舰.马铃薯DREB1转录因子的克隆和植物表达载体构建[J].分子植物育种.2019
[4].田军,刘晓红,韩林.靶向活化转录因子6的短发夹RNA重组腺病毒载体构建及对猪瓣膜间质细胞增殖与凋亡的影响[J].国际心血管病杂志.2019
[5].刘秀明,吕彦曦,杨龙宇,杜卫红,宫彦红.红花ERF1转录因子的克隆及植物表达载体的构建[J].中草药.2019
[6].薛巨坤,王博,王莲萍,杨春雨,国会艳.一个顺式作用元件的载体构建及与一个MYB转录因子的互作分析[J].分子植物育种.2019
[7].王棋,王心正,韩秋影,樊浩,李亭亭.小鼠干扰素γ受体β基因启动子荧光报告载体构建及转录活性分析[J].中国药理学与毒理学杂志.2019
[8].柳娜,杨文雄.转录因子DREB1A基因的克隆及植物表达载体的构建[J].甘肃农业科技.2018
[9].姚娜,刘建雨,田媛媛,董园园,刘秀明.红花bHLH转录因子基因的克隆、表达分析及植物表达载体构建[J].中国中药杂志.2019
[10].徐萍萍,房宸曦,梁丽娜,王亚鹏,张宁.马铃薯StERF5转录因子酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定[J].分子植物育种.2018
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