论文摘要
本研究旨在从生物物理学的角度并结合多种光谱学手段阐明邻苯二酚2,3-双加氧酶（C23O）催化儿茶酚的相互作用机制。我们成功克隆表达了一种新的C23O （命名为C23O-2G）并鉴定为外二醇双加氧酶亚家族1.2的新成员。通过对重组C23O-2G进行表征显示其在温度30℃和pH 7.5下的条件下具有最佳活性,并且在底物特异性实验中发现儿茶酚（100%比活性,Km=39.35μM）和4-甲基儿茶酚（92%）为最佳底物。在分子对接模拟的基础上,确定了儿茶酚在C23O-2G上的精确结合位点,并提出了一些关键残基介导的催化机理。从荧光光谱得到的结合和热力学参数表明,儿茶酚可以通过静态和动态猝灭机制有效地猝灭C23O-2G的内在荧光,并通过氢键和范德华力结合自发形成C23O-2G/儿茶酚络合物。紫外-可见光谱,同步荧光,CD光谱和红外光谱的结果表明C23O-2G的微环境和构象发生明显变化,C23O-2G二级结构含量变化尤其显著。原子力显微镜研究从外观的角度进一步证明了这些变化。本研究扩展了我们对芳香族化合物分解代谢中涉及的代表性双加氧酶的催化机理的理解。
论文目录
文章来源
类型: 国内会议
作者: 曾宪烘,莫测辉,李彦文,蔡全英,赵海明
关键词: 儿茶酚,分子对接,相互作用,催化机理
来源: 2019年中国土壤学会土壤环境专业委员会、土壤化学专业委员会联合学术研讨会 2019-07-21
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 暨南大学生命科学技术学院
分类号: Q78
页码: 25
总页数: 1
文件大小: 27k
下载量: 44
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