导读:本文包含了单链双功能抗体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:抗体,肿瘤,因子,基因,功能,逆转录,基因治疗。
单链双功能抗体论文文献综述
史梦远,王海涛,张芳琳[1]（2008）在《单链抗体及重组白介素-2双功能抗体融合蛋白的表达及其软件预测》一文中研究指出目的利用生物信息学网络资源分析融合蛋白的二级结构及其理化性质,并探讨分泌型抗成骨肉瘤单链双功能抗体基因的表达。方法采用聚合酶链式反应(PCR)将人工合成的抗体分泌信号肽序列加在抗成骨肉瘤单链抗体(scFv)基因5′端,其3′与白介素-2(IL-2)基因连接构成分泌型单链双功能抗体scFv-IL-2基因,将该基因克隆至逆转录病毒表达载体PLxSN,重组质粒pL(scFv-IL-2)SN在脂质体介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,用NIH3T3测定病毒滴度,将重组病毒感染人成骨肉瘤细胞命名为OSC/scFv-IL-2,以PCR,RT-PCR以及Western blotting对scFv-IL-2基因修饰的OSC9901细胞进行鉴定。在构建融合蛋白之后,运用DNA分析软件DNAs-sist和蛋白质分析软件ANTHEPROTV5分析融合蛋白的氨基酸序列、二级结构及其理化性质。结果经酶切、PCR及Western blotting分析鉴定,成功地构建了融合基因表达载体pL(scFv-IL-2)SN,并获得高滴度产毒细胞株C26,scFv-IL-2融合蛋白通过DNAssist和ANTHEPROTV5软件分析获得了融合蛋白的二级结构及其理化性质。结论利用生物信息学网络资源进行分析预测融合蛋白的性质,为进一步探讨单链双功能抗体基因融合蛋白提供依据。(本文来源于《新乡医学院学报》期刊2008年02期）
李应涛,吴兴安,邱力军[2]（2007）在《分泌型单链双功能抗体分子间接头的设计及软件分析》一文中研究指出目的:利用生物信息学软件分析分泌型抗骨肉瘤单链双功能抗体融合蛋白的二级结构及其理化性质.方法:构建融合蛋白时,先进行连接肽的设计,选用通用酶切位点序列,运用DNA分析软件(DNAssist)和蛋白质分析软件(AN-THEPROTV5)分析预测融合蛋白的氨基酸序列、二级结构及其理化性质.结果:在编码ScFv与TNF的碱基之间引入连接肽,通过酶切位点获得的DNA序列,运用DNAssist核酸序列软件获得了融合蛋白的二级结构,并运用蛋白质分析软件(ANTHEPROTV5)预测了融合蛋白的理化性质.结论:应该充分利用生物信息学软件分析生物学信息,并不断对软件本身进行改进,生物信息学软件可提高药物开发进程,可利用生物信息学和遗传学信息来寻找和开发以基因为基础的药物.(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2007年02期）
李应涛[3]（2006）在《分泌型抗骨肉瘤单链双功能抗体融合蛋白的生物活性的预测及分析》一文中研究指出目的：利用生物信息学网络资源分析融合蛋白的二级结构及其理化性质，进一步构建分泌型抗骨肉瘤单链双功能抗体基因，探讨分泌型抗骨肉瘤单链双功能抗体基因表达并分泌针对成骨肉瘤细胞的靶向性ScFv-TNF融合蛋白。 方法：融合蛋白的亲和性及抗肿瘤活性分别较衍生因子的功能及活性有所变化，可能由于融合蛋白结构变化导致功能及活性的变化，抗体融合的重组设计实际上只受想象和能够产生正确折迭蛋白产物的表达系统的限制。我们在构建融合蛋白时，选用了通用酶切位点序列，然后运用DNA分析软件(DNAssist)和蛋白质分析软件(ANTHEPROT V5)分析预测融合蛋白的氨基酸序列、二级结构及其理化性质。首先采用PCR方法将人工合成的抗体分泌信号肽序列加在抗骨肉瘤ScFv(single chain variable region fragments antibodv)基因5'端，其3'与人的肿瘤坏死因子TNF基因连接构成分泌型单链双功能抗体ScFv-TNF基因，将该基因克隆至逆转录病毒表达载体PLxSN，构建抗骨肉瘤单链双功能抗体基因逆转录病毒表达载体pL(ScFv-TNF)SN，重组质粒pL(ScFv-TNF)SN在脂质体介导下转染PA317包装细胞，G418筛选，直至出现抗性克隆，扩大培养，用NIH3T3测定病毒滴度，将重组病毒感染人骨肉瘤OC9901细胞，G418筛选出抗性克隆，命名为(本文来源于《第四军医大学》期刊2006-04-01）
程虹,刘彦仿,张惠中,沈万安,杨安钢[4]（2002）在《抗肝癌单链双功能抗体在Hut-78细胞系中的表达及体外杀伤活性》一文中研究指出目的 用携带分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因(sFv TNF α)的重组逆转录病毒感染T细胞淋巴瘤Hut 78细胞 ,使其表达并分泌针对人肝癌细胞的sFv TNF α融合蛋白 ,观察转导的T细胞对体外培养肝癌细胞的杀伤作用 .方法 用感染性重组病毒产生细胞C2 2 (PA317/PST)产生的病毒上清转导人T细胞淋巴瘤Hut 78细胞 ,采用PCR、RT PCR、细胞原位杂交及免疫组织化学染色等方法 ,对转导的Hut 78细胞进行DNA、mRNA及蛋白水平的分析 .转导的Hut 78细胞分别与SMMC 772 1、HHCC共培养 ,MTT法检测Hut/PST细胞表达产物对两种肝癌细胞的杀伤作用 .结果 PCR、RT PCR结果显示转导Hut细胞中扩增出外源目的基因对应的电泳条带 .neo基因探针原位杂交显示转导细胞质内有较强的紫蓝色阳性反应信号 ,其阳性率约为 95 % .鼠抗人TNF α多克隆抗体免疫组织化学染色 ,转导细胞质内有明确的棕黄色阳性反应信号 .MTT法检测结果 ,分泌型抗肝癌单链双功能抗体对体外培养的两种肝癌细胞的杀伤率分别为 15 .4 %和2 6 .5 % .结论 分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因可以在T细胞中整合并稳定表达 ,其分泌的表达产物对两种肝癌细胞均具有一定的亲合活性 ,并且具有一定的体外杀伤作用 .(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2002年24期）
程虹,刘彦仿,张惠中,沈万安,张素珍[5]（2001）在《分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体的构建及表达》一文中研究指出目的分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体的构建及表达。方法采用PCR方法在抗肝癌sFv的5端引入引导序列使其能够在真核细胞中表达并分泌,在其下游连接人TNF-α基因,构建分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因,并将该基因克隆入带有GFP报告基因的真核表达载体,用磷酸钙共沉淀法转染小鼠成纤维细胞NIH3T3进行瞬时表达。结果 DNA序列分析证实在sFv的5端引入正确的60bp引导肽序列,酶切鉴定证明成功构建了分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体,并在NIH3T3细胞中成功地表达了融合荧光蛋白。结论成功构建并表达了分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP基因,为肝癌免疫基因治疗的进一步研究奠定了基础。(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2001年06期）
张建华[6]（2001）在《分泌型抗成骨肉瘤单链双功能抗体融合基因表达载体的构建》一文中研究指出目的：构建分泌型抗成骨肉瘤单链双功能抗体基因，为进一步探讨分泌型抗成骨肉瘤单链双功能抗体基因表达并分泌针对成骨肉瘤细胞的靶向性sFv-TNF-α融合蛋白以及抗成骨肉瘤单链抗体在成骨肉瘤治疗中的作用。方法：首先采用PCR方法将人工合成的抗体分泌信号肽序列加在抗成骨肉瘤sFv (single chain variable region fragments antibody)基因5’端，其3’与人的肿瘤坏死因子TNF-α(tumor necrosis factor α)基因连接构成分泌型单链双功能抗体sFv-TNF-α基因，将该基因克隆至逆转录病毒表达载体PLXSN，构建抗成骨肉瘤单链双功能抗体基因逆转录病毒表达载体PLXSN-sFv-TNF-α。结果：构建完成的逆转录病毒表达载体PLXSN-sFv-TNF-α，首先用EcoRI和BamHI双酶切下930bp左 军四蔗压大学硕士沧丈 右的片段，符合SFV－TNF－＊片段大＊，PLXSN－SPV－T”NI‘－u进 一步EcoRI和Xhol及Xhol和Ba一分别双酶U鉴定，分别切下 470hp左右及460hp左右的片段，符合TNF－a及sFv片段大小。 结论：我们尝试构建分子量尽可能小、兔疫原性尽可能弱的分泌 型抗成骨肉瘤单链双功能抗体基因，采用PCR方法在抗成骨肉瘤 SFV的5’端加上引导序列、3’端连上人的肿瘤坏死因于1”NF－。基－因，构建成功了分泌型抗成骨肉瘤单链双功能抗体基囚，汁将该 基因克隆至逆转录病毒表达载体I，LXSN，构建仇成骨肉瘤中链双 功能抗体基因逆转录病毒表达载休PLXSN七卜。丁Nr忙。 本研究为进一步探讨分泌型抗成骨肉瘤单链双功能抗体基囚 表达并分泌针对成骨肉瘤细胞的靶向性s＊。，－＊N＊－U融合蛋臼以及 抗成骨肉瘤单链抗体在成骨肉瘤治疗中的作用。探讨柒免疫。基 因治疗和靶向治疗为一体的一种新的治疗成骨肉瘤方法。(本文来源于《第四军医大学》期刊2001-05-01）
程虹,刘彦仿,张惠中,王连刚,于继云[7]（2001）在《抗肝癌单链双功能抗体融合绿色荧光蛋白表达载体的构建及表达》一文中研究指出0 引言 肝癌恶性程度极高 ,在我国有着较高发病率和死亡率 ,迄今尚无理想的治疗手段 .随着现代分子生物学和免疫学的发展 ,基因工程抗体的诞生为肿瘤的诊断和治疗带来了希望 ,尤其是单链抗体的应用成为肿瘤免疫基因治疗的热点我们利用本室克隆的抗肝癌单链抗体(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2001年03期）
程虹,刘彦仿,张惠中,于继云,张素珍[8]（2001）在《抗肝癌单链双功能抗体基因逆转录病毒表达载体的构建及包装》一文中研究指出0 引言 人类基因治疗技术的迅速发展使越来越多针对先天性和获得性疾病的基因治疗方案进入临床试验 ,同时 ,逆转录病毒作为介导基因转染的载体也是目前基础和临床应用研究中最广泛使用的基因转移方法 [1 ] .迄今所掌握的研究资料表明 ,接受逆转录病毒介导基因(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2001年03期）
程虹,刘彦仿,张惠中,沈万安[9]（2000）在《抗肝癌单链双功能抗体基因逆转录病毒表达载体的构建及病毒包装细胞系的建立》一文中研究指出人类基因治疗技术的迅速发展使越来越多针对先天性和获得性疾病的基因治疗方案进入临床试验,同时,逆转录病毒作为介导基因转染的载体也是目前基础和临床应用研究中最广泛使用的基因转移方法.迄今所掌握的研究资料表明,接受逆转录病毒介导基因治疗的患者中尚未发现因病毒感染导致的不良反应.因此,我们选择改造的缺陷型逆转录病毒载体 pLXSN,将分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因(sFv-TNF-α)(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2000年06期）
程虹[10]（1999）在《分泌型单链双功能抗体基因修饰的T淋巴细胞抗肝癌活性的实验研究》一文中研究指出我室从1982年开始从事肝癌单克隆抗体及其基因工程改造研究，曾成功构建并高效原核表达了抗肝癌单链抗体。在此基础上，我们尝试用sFv 5′端带有引导序列、3′端带有TNF-α基因的分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因修饰人T淋巴细胞，使其表达并分泌针对人肝癌细胞的靶向性sFv-TNF-α融合蛋白，观察转导细胞对体外培养肝癌细胞的杀伤作用及其体内回输对裸鼠移植瘤生长的影响。 首先采用PCR方法将人工合成的抗体分泌信号肽序列加在抗肝癌sFv基因的N末端，再将sFv基因的C末端与人TNF-α基因连接构成分泌型单链双功能抗体基因，将该重组基因克隆至带有GFP报告基因的真核表达载体中，构建了分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP表达载体。用磷酸钙介导重组载体转染小鼠成纤维细胞NIH3T3，在NIH3T3细胞中成功地表达了sFv-TNFα-GFP融合蛋白，转染后20h即可观察到转染的部分细胞发出较强的绿色荧光，证实构建的分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因可以在真核细胞中有效地表达。将该基因克隆至逆转录病毒表达载体PLXSN，构建抗肝癌单链双功能抗体基因逆转录病毒表达载体，用磷酸钙共沉淀法转染PA317包装细胞，G418筛选，挑选50个细胞集落并扩大培养，测定了29(本文来源于《第四军医大学》期刊1999-04-01）
单链双功能抗体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:利用生物信息学软件分析分泌型抗骨肉瘤单链双功能抗体融合蛋白的二级结构及其理化性质.方法:构建融合蛋白时,先进行连接肽的设计,选用通用酶切位点序列,运用DNA分析软件(DNAssist)和蛋白质分析软件(AN-THEPROTV5)分析预测融合蛋白的氨基酸序列、二级结构及其理化性质.结果:在编码ScFv与TNF的碱基之间引入连接肽,通过酶切位点获得的DNA序列,运用DNAssist核酸序列软件获得了融合蛋白的二级结构,并运用蛋白质分析软件(ANTHEPROTV5)预测了融合蛋白的理化性质.结论:应该充分利用生物信息学软件分析生物学信息,并不断对软件本身进行改进,生物信息学软件可提高药物开发进程,可利用生物信息学和遗传学信息来寻找和开发以基因为基础的药物.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
单链双功能抗体论文参考文献
[1].史梦远,王海涛,张芳琳.单链抗体及重组白介素-2双功能抗体融合蛋白的表达及其软件预测[J].新乡医学院学报.2008
[2].李应涛,吴兴安,邱力军.分泌型单链双功能抗体分子间接头的设计及软件分析[J].第四军医大学学报.2007
[3].李应涛.分泌型抗骨肉瘤单链双功能抗体融合蛋白的生物活性的预测及分析[D].第四军医大学.2006
[4].程虹,刘彦仿,张惠中,沈万安,杨安钢.抗肝癌单链双功能抗体在Hut-78细胞系中的表达及体外杀伤活性[J].第四军医大学学报.2002
[5].程虹,刘彦仿,张惠中,沈万安,张素珍.分泌型抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体的构建及表达[J].世界华人消化杂志.2001
[6].张建华.分泌型抗成骨肉瘤单链双功能抗体融合基因表达载体的构建[D].第四军医大学.2001
[7].程虹,刘彦仿,张惠中,王连刚,于继云.抗肝癌单链双功能抗体融合绿色荧光蛋白表达载体的构建及表达[J].第四军医大学学报.2001
[8].程虹,刘彦仿,张惠中,于继云,张素珍.抗肝癌单链双功能抗体基因逆转录病毒表达载体的构建及包装[J].第四军医大学学报.2001
[9].程虹,刘彦仿,张惠中,沈万安.抗肝癌单链双功能抗体基因逆转录病毒表达载体的构建及病毒包装细胞系的建立[J].世界华人消化杂志.2000
[10].程虹.分泌型单链双功能抗体基因修饰的T淋巴细胞抗肝癌活性的实验研究[D].第四军医大学.1999
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