复合酶解结合膜分离技术制备秘鲁鱿鱼抗氧化肽的研究

论文摘要

为从秘鲁鱿鱼（Dosidicus gigas）中提取具有抗氧化活性且Fe2+螯合能力强的蛋白肽,研究采用复合酶解的手段通过响应面法得到了最佳酶解工艺,同时利用膜分离技术对酶解肽分级分离,考察了其氨基酸组成、红外光谱结构以及热稳定性的差异。实验结果表明,复合酶解的最佳工艺条件为:先调整反应体系为pH 7.0,添加木瓜蛋白酶酶解6 h;灭酶后调整pH为8.42,添加碱性蛋白酶酶解2 h,酶添加总量11800 U/g底物,两酶添加配比0.69（即木瓜蛋白酶:碱性蛋白酶=3.41%:4.96%）,酶解温度保持55℃,此条件下酶解肽的Fe2+螯合能力为56.35%,DPPH.清除率为64.32%。经SDS-PAGE验证,必需氨基酸含量占氨基酸总含量（EAA/TAA）有显著性差异;红外光谱图显示各级抗氧化肽二级结构中包含了β-折叠、α-螺旋以及无规则卷曲,经酶解暴露出的官能团有羧酸类、氨基酸残基间的酰胺键以及少量的羟基;差示量热扫描结果表明分子质量越小,蛋白肽的耐热性越差。研究结果将为蛋白活性肽的精深应用提供理论支持。

论文目录

1 材料与方法

1.1 实验耗材

1.1.1 材料与试剂

1.1.2 仪器与设备

1.2 实验方法

1.2.1 工艺流程

1.2.2 复合蛋白酶的水解工艺研究

1.2.3 酶解效果评定指标

1.2.4 超滤膜分离酶解肽研究

1.3 数据分析与统计

2 结果与分析

2.1 单酶最佳的实验条件

2.1.1 水解度的测定

2.1.2 亚铁离子螯合能力和抗氧化效果的测定

2.2 酶添加方式对复合酶解效果的影响

2.3 酶质量配比对复合酶解效果的影响

2.4 总加酶量对复合酶解效果的影响

2.5 复合酶解响应面分析结果

2.5.1 响应面优化复合酶解条件对抗氧化肽Fe2+螯合能力的影响

2.5.2 响应面优化复合酶解条件对抗氧化肽DPPH.清除率的影响

2.6 最佳提取工艺验证

2.7 酶解肽膜分离结果

2.7.1 SDS-PAGE电泳验证

2.7.2 各级酶解肽氨基酸含量分析

2.7.3 红外光谱分析

2.7.4 差示热量扫描测定

3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 缪佳瑜,林慧敏,李颖杰,邓尚贵

关键词: 秘鲁鱿鱼,抗氧化肽,响应面法,膜分离

来源: 食品科技 2019年12期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 浙江海洋大学食品与医药学院

基金: 浙江省自然科学基金项目(LY18C200007),浙江省团队特派员项目(2017T1106)

分类号: TS254.4

DOI: 10.13684/j.cnki.spkj.2019.12.024

页码: 131-139

总页数: 9

文件大小: 4130K

下载量: 161

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