一、Immune Intervention Effects on the Induction of Experimental Autoimmune Thyroiditis（论文文献综述）
牧亚峰[1]（2021）在《基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨芪箭消瘿方对AIT大鼠肠道菌群及肠黏膜屏障的影响》文中研究表明目的:1.通过建立自身免疫性甲状腺炎（AIT）动物模型,研究芪箭消瘿方对AIT大鼠TLR4/My D88/NF-κB信号通路及甲状腺炎症损伤的作用。2.以肠道为切入点,探讨芪箭消瘿方对AIT大鼠肠道菌群及肠黏膜屏障的影响。方法:采用猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂皮下免疫注射联合高碘水喂养制备AIT大鼠模型,并随机分为对照组、模型组、硒酵母组及芪箭消瘿方低、中、高剂量组。自实验第7周开始,各组大鼠每天灌胃给药,连续给药6周,于实验第12周结束后行标本采集。H&E染色观察各组大鼠甲状腺组织的病理改变和结肠组织肠黏膜形态的病理改变;透射电镜观察结肠上皮细胞超微结构;ELISA检测各组大鼠血清FT3、FT4、TGAb、TPOAb、TNF-α、IFN-γ、IL-10水平及结肠组织s Ig A含量变化;RT-PCR技术检测各组大鼠甲状腺组织TLR4、My D88、NF-κB p65 m RNA表达;Western blotting检测各组大鼠甲状腺组织TLR4、My D88、IKKβ、p IKKβ、NF-κB p65蛋白表达以及结肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达;16S r RNA高通量测序技术检测及分析各组大鼠肠道菌群的变化。结果:1.实验一芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺炎症损伤的影响1.1 ELISA结果显示:模型组大鼠血清FT3、FT4、TGAb、TPOAb、TNF-α、IFN-γ含量增加。与模型组相比,硒酵母组及芪箭消瘿方低、中、高剂量组大鼠血清FT3、FT4、TGAb、TPOAb、TNF-α、IFN-γ水平下降,说明各药物能够抑制AIT大鼠甲状腺功能,下调甲状腺自身抗体及促炎细胞因子水平。1.2 H&E染色结果显示:模型组大鼠甲状腺滤泡结构破坏,滤泡腔萎缩,可见淋巴细胞浸润,甲状腺组织炎症评分增高。经硒酵母及不同剂量芪箭消瘿方干预后,甲状腺滤泡结构完整性有不同程度恢复,淋巴细胞浸润程度减轻,甲状腺组织炎症评分也逐渐下降。结果表明芪箭消瘿方能够改善AIT大鼠甲状腺组织炎症损伤。2.实验二芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠TLR4/My D88/NF-κB信号通路的影响2.1 RT-PCR结果显示:模型组大鼠甲状腺组织TLR4 m RNA、My D88 m RNA、NF-κB p65 m RNA表达增加。与模型组相比,硒酵母组及芪箭消瘿方中、高剂量组甲状腺组织TLR4 m RNA、My D88 m RNA、NF-κB p65 m RNA表达减少,而芪箭消瘿方低剂量组表达虽然减少,但没有统计学差异。2.2 Western blotting结果显示:模型组大鼠甲状腺组织TLR4、My D88、IKKβ、p IKKβ、NF-κB p65蛋白表达增加。与模型组相比,硒酵母组及芪箭消瘿方中、高剂量组甲状腺组织TLR4、My D88、IKKβ、p IKKβ、NF-κB p65蛋白表达减少,而芪箭消瘿方低剂量组表达虽然减少,但没有统计学差异。3.实验三芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠肠道菌群的影响3.1物种多样性结果:模型组Shannon、Simpson、chao、ace指数上升,但统计学差异均不显着,表明AIT大鼠肠道菌群物种多样性增加、丰度升高,存在菌群过度生长。与模型组相比,硒酵母组Shannon、Simpson、chao、ace指数增加,而芪箭消瘿方低、中、高剂量组Shannon、Simpson、Chao、Ace指数下降。对照组和模型组在PC1水平上呈明显分开,硒酵母组及芪箭消瘿方低、中、高剂量组在PC1水平上偏离模型组的距离逐渐增大,说明各给药组大鼠肠道菌群组成结构发生显着变化。3.2门水平物种组成:在门水平（Phylum）上,各组大鼠肠道菌群主要包括厚壁菌门Firmicutes、拟杆菌门Bacteroidetes、变形菌门Proteobacteria、柔膜菌门Tenericutes及放线菌门Actinobacteria等主要门类,前3种为优势菌门。模型组大鼠厚壁菌门Firmicutes及厚壁菌门Firmicutes与拟杆菌门Bacteroidetes比值（F/B）比例升高,拟杆菌门Bacteroidetes比例下降。硒酵母组及芪箭消瘿方低、中、高剂量组厚壁菌门Firmicutes比例及F/B值下降,拟杆菌门Bacteroidetes比例上升。3.3属水平物种组成:在属水平（Genus）上,各组大鼠肠道菌群主要包括Muribaculaceae、瘤胃球菌属Ruminococcaceae、毛螺菌属Lachnospiraceae、乳酸杆菌属Lactobacillus、拟杆菌属Bacteroides、克里斯滕森菌属Christensenellaceae、普雷沃氏菌属Prevotellaceae、罗姆布茨菌属Romboutsia等,其中乳酸杆菌属Lactobacillus与普雷沃氏菌属Prevotellaceae组间变化显着。模型组大鼠乳酸杆菌属Lactobacillus和普雷沃氏菌属Prevotellaceae丰度下降。硒酵母组及芪箭消瘿方低、中剂量组乳酸杆菌属Lactobacillus丰度呈不同程度回升。而芪箭消瘿方高剂量组乳酸杆菌属Lactobacillus丰度呈下降趋势,但没有统计学差异。硒酵母组及芪箭消瘿方中、高剂量组普雷沃氏菌属Prevotellaceae丰度呈下降趋势,芪箭消瘿方低剂量组成上升趋势,均没有统计学差异。3.4代谢通路预测结果:各组大鼠肠道微生物代谢功能大体相似,除未知功能外,其余代谢功能主要有碳水化合物运输和代谢、氨基酸转运和代谢、翻译核糖体结构和生物发生、DNA复制重组和修复、能量生成和转化、无机离子运输和代谢、核苷酸转运和代谢、信号转导机制、辅酶运输和代谢等功能。4.实验四芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠肠黏膜屏障的影响4.1 ELISA结果显示:模型组大鼠血清IL-10及结肠组织s Ig A水平下降。与模型组相比,硒酵母组及芪箭消瘿方低、中、高剂量组大鼠血清IL-10及结肠组织s Ig A水平升高。4.2 H&E染色结果显示:模型组大鼠结肠黏膜上皮部分断裂、不完整,黏膜隐窝形态扭曲,伴有淋巴细胞浸润。经硒酵母及不同剂量芪箭消瘿方干预后,AIT大鼠结肠黏膜完整性有所恢复,淋巴细胞浸润明显减少。4.3透射电镜结果显示:模型组大鼠结肠黏膜上皮细胞间紧密连接出现部分断裂,连接开放、疏松,桥粒密度下降,微绒毛数量减少,且排列较紊乱。硒酵母组及芪箭消瘿方低、中、高剂量组大鼠结肠黏膜细胞间紧密连接连续性均有不同程度恢复,连接更加紧密,肠上皮微绒毛数量增加,排列较模型组整齐。4.4 Western blotting结果显示:模型组大鼠结肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达减少。与模型组相比,硒酵母组及芪箭消瘿方低、中、高剂量组大鼠结肠组织ZO-1、Occludin蛋白表达增加。结论:1.芪箭消瘿方可能通过调控AIT大鼠TLR4/My D88/NF-κB信号通路关键蛋白的表达,减少促炎细胞因子的产生,改善甲状腺滤泡结构的炎症损伤,起到保护甲状腺的作用。2.芪箭消瘿方可能通过调节AIT大鼠肠道菌群多样性及组成结构,改善肠黏膜屏障损伤而起到治疗作用。
韩梦雨[2]（2021）在《中西医协同治疗视神经脊髓炎相关性视神经炎的应用研究》文中进行了进一步梳理(一)视神经脊髓炎相关性视神经炎患者临床特点及疗效分析目的:分析视神经脊髓炎相关性视神经炎（NMO-ON）患者的临床特点及针药联合改善NMO所致视神经萎缩的疗效。方法:对2016年1月至2019年12月就诊于中日友好医院的72例以ON为首发临床表现的NMO患者进行回顾性分析总结,包括一般资料、发病特点、病程进展、合并疾病、免疫学检验、治疗反应及预后等。结果:1.一般资料:72例NMO-ON患者,发病年龄中位数33岁;女性61例（84.72%）,男女比约为1:5.54;病程中位数67月,病程以“复发-缓解”为主,单相与复发比约1:5.8。2.临床特点:66例（91.67%）单独ON起病,ON累及单眼者59例（81.94%）;主要症状为急性或亚急性视力下降,可伴转动痛、视野缺损及色觉异常等;14例（19.44%）伴诱因,最常见为上呼吸道感染;11例（15.28%）伴系统性免疫性病,最常伴发干燥综合征及甲状腺疾病;59眼（75.64%）首发视力小于0.1,AQP4-IgG状态（P=0.032,OR=2.55）和发病年龄（P=0.037,OR=3.93）是影响患者首发视力的独立危险因素;整个病程中,44例（61.11%）双眼先后累及,ON发病次数中位数为2次,ON二次发作时间中位数是3月;1年、3年复发率分别约0.56（40/72）和0.74（53/72）;至末次随访时间,单侧致盲率约48.61%,致患者单侧致盲ON发作中位数为2次;53例（73.61%）出现其他神经系统的累及,脊髓（61.1 1%）是最常见的复发部位。3.实验室结果:80%（48/60）患者血清AQP4-IgG抗体阳性;25%（3/12）患者MOG-IgG阳性;18例（25%）伴其他系统性免疫性抗体,最常见伴ANA抗体阳性;4.影像学特点:NMO-ON多累及后视路,病变长度>1/2视神经;45例（84.91%）脊髓MRI病变≥3个锥体;47.17%（25/53）患者同时或相继发生颈髓和胸髓病变。5.针药联合改善NMO所致视神经萎缩:24眼治疗4周有8只眼视力提高≥2行,总有效率91.67%;动态视野平均缺损度（MD）及平均敏感度（MS）较前改善,但与治疗前相比,差异均无统计学意义（P>0.05）;治疗8周有12眼视力提高≥2行,总有效率100%;视野MD显着下降（P<0.05）,MS明显提高（P<0.05）。结论:1.NMO-ON患者首次发病多ON单独起病,单侧累及,女性中青年高发,AQP4-IgG阴性患者更趋年轻化,急性期对患者视功能威胁巨大,恢复期多遗留较差的视力预后;最常见诱因为上呼吸道感染,漫长的病程多见双侧视神经受累及多次复发,脊髓是除视神经外最常见的复发部位;AQP4-IgG状态和发病年龄是影响NMO患者首次发病视功能的独立危险因素;2.大多数（80%）NMO-ON患者AQP4-IgG血清阳性,部分患者伴发以干燥综合征和甲状腺疾病为代表的系统性免疫性疾病,最常见伴有的血清学免疫性抗体是抗ANA抗体;3.NMO-ON患者视神经多累及后视路,病变长度>1/2视神经,脊髓损伤多为连续长节段,约一半患者同时或相继发生颈髓和胸髓病变;4.针药联合可显着提高NMO所致视神经萎缩患者的视功能,明显提高患者视力和动态视野MS,降低患者MD。（二）视神经脊髓炎相关视神经炎（NMO-ON）大鼠模型的构建与评价目的:通过将患者AQP4-IgG强阳性血清显微注射至大鼠视神经周围蛛网膜下腔,诱导视神经NMO样病变,从活体与病理、视神经及脊髓、大脑等多维度评价该模型,为探究药物防治NMO-ON提供模型基础。方法:SD雄性大鼠30只根据血清样本类型随机分为模型组、假手术组,上结膜入路暴露视神经后选择球后2mm处分别将AQP4-IgG强阳性血清和健康人血清缓慢注射到蛛网膜下腔。术后第3天免疫荧光法检测视神经AQP4-IgG表达;术前1天（第0天）、术后第7、14天分别行闪光视觉诱发电位（F-VEP）及瞳孔对光反射（PLR）检测;术后第14天分别处死两组大鼠行视网膜、视神经、大脑及脊髓等组织制片和病理学观察。结果:术后第3天模型组视神经AQP4-IgG强表达,假手术组未见表达（P<0.001）;与假手术组相比,AQP4和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）在AQP4-IgG沉积区域表达也显着降低（P<0.001）;模型组N1-P1波振幅和PLR第7天、14天均明显降低,与假手术组相比差异均有统计学意义（P<0.001）;组织病理学观察:与假手术组相比,模型组视神经HE染色肿胀水肿、着色明显加深,轴突数量显着减少伴有不规则空洞化,其间见大量炎症细胞浸润等;RGCs水肿显着,数量明显减少,且大小不一,核仁不清晰;视神经LFB髓鞘染色,模型组可见到蓝色区域显着减少;模型组大鼠视神经电镜则可见到轴突数量明显减少且排列紊乱、横断面形态不规则,微管微丝大量溶解,髓鞘严重分层、结构不完整,且大多数髓鞘松解或者脱失、塌陷,甚至无髓鞘;免疫荧光染色发现,与假手术组相比,模型组神经丝蛋白L（NFL）表达量明显下降（P<0.001）及CD68表达显着升高（P<0.001）;脊髓组织HE发现,假手术组和模型组均未见到脊髓白质炎症浸润、轴突及髓鞘损伤等病理变化;脊髓组织LFB染色可见假手术组和模型组髓鞘染色成蓝色且均匀一致,未见到染色区域减少及白色未着色区等。大脑组织HE和LFB染色也未发现炎症浸润及脱髓鞘等病理损伤;结论:1.我们通过在大鼠视神经蛛网膜下腔显微注射人类AQP4-IgG阳性血清成功构建了NMO-ON大鼠模型,该模型显示NMO-ON的特征性病理变化,包括星形胶质细胞破坏、炎症浸润、轴突损伤及脱髓鞘等;2.大鼠视神经蛛网膜下腔显微注射人类AQP4-IgG阳性血清构建NMO-ON模型,仅能启动局部视神经周围免疫,对脊髓及大脑等其他神经系统未产生病理损伤。（三）调肝活络法防治视神经脊髓炎相关性视神经炎（NMO-ON）的疗效及机制探究目的:通过动物模型的体内研究,观察调肝活络法的干预效果,并深入挖掘方药发挥作用的分子机制,为NMO-ON的临床治疗提供中西医协同的解决方案。方法:SD雄性大鼠60只随机分为模型组、假手术组、中药组、激素组、中药+激素组,显微注射法构建NMO-ON大鼠模型,分别给予无菌蒸馏水、中药、激素及中药+激素等灌胃干预21天,术前1天（第0天）、术后7天、14天及21天分别行F-VEP、PLR检测;第21天处死所有大鼠,制备视网膜、视神经切片,进行HE染色及超微电镜观察;免疫组织化学染色检测RGCs中Brn3a表达;免疫荧光染色检测GFAP、NFL、髓鞘碱性蛋白（MBP）和CD68表达;Western-blotting检测视神经IL-6、IL-10、TNF-α、p-NF-κB p65 蛋白表达。结果:1.视神经功能学评价:与同时间点模型组和激素组相比,中药组和中药+激素组在第7、14和21天均可显着提高视神经F-VEP的N1P1振幅（P<0.001）;在第21天,中药组、中药+激素组与模型组和激素组相比,PLR收缩程度也显着增加（P<0.001）;2.组织病理学评价:与模型组和激素组相比,中药组和中药+激素组视神经HE染色均可见轴突损伤减轻、视神经水肿消退及未见到明显炎症细胞浸润;电镜发现中药组轴突数量明显增加,神经纤维束状形态可循,可见微丝微管结构,髓鞘损伤也较之减轻;与激素组相比,中药+激素组见到更完整的神经轴突、髓鞘结构;免疫组化发现,与模型组和激素组相比,中药组和中药联合激素组RGCs的Brn3a表达量较之均显着升高（P<0.001）;视神经免疫荧光提示中药组及中药+激素组GFAP、MBP和NFL表达量较模型组表达量升高（P<0.001）。CD68视神经染色也发现,与模型组相比,中药组及中药+激素组可见到CD68表达显着降低（P<0.001）;3.Western Blotting:与假手术组相比,模型组大鼠视神经内p-NF-κB p65、TNF-α和IL-6显着升高（P<0.001）;与模型组相比,中药组、激素及中药+激素组均可见到p-NF-κB p65、TNF-α和IL-6降低（P<0.001）;与假手术组相比,模型组大鼠视神经内IL-10显着降低（P<0.001）;与模型组相比,中药组、激素及中药+激素组均可见到 IL-10 升高（P<0.001）。结论:1.调肝活络复方中药可以减轻NMO-ON大鼠模型视神经轴突丢失、髓鞘损伤及炎症浸润,进而提升和改善视觉诱发电位N1P1振幅及瞳孔对光反射收缩能力。2.调肝活络复方中药对NMO-ON视神经及视网膜发挥神经保护和治疗作用可能与其能抑制视神经内NF-κB蛋白磷酸化及调控相关炎症介质（IL-6、TNF-α及IL-10）的产生有关。
连小月[3]（2021）在《Notch信号通路调控巨噬细胞极化参与自身免疫性甲状腺炎过程的分子机制研究》文中研究指明背景:自身免疫性甲状腺炎（Autoimmune thyroiditis,AIT）是以个体免疫力、生活环境和家族遗传不同而引发的常见自身免疫性病,最为重要的病理改变为甲状腺组织被大量淋巴细胞充斥,在患者血清中可检测出甲状腺自身抗原的特异性抗体[1]。巨噬细胞是固有免疫系统中的组成细胞之一,当体内巨噬细胞极化失去平衡时,内环境的稳态便会发生改变[2],进而引发一系列疾病的发生发展。Notch信号通路是巨噬细胞活化的重要经典信号通路之一[3]。目前国内外尚无Notch信号通路对AIT巨噬细胞极化作用的相关报道。本研究将通过碘诱导NOD.H-2h4小鼠AIT模型和采取体外细胞阻断和过表达Notch信号的方法,探讨AIT小鼠中是否存在巨噬细胞极化的改变,Notch信号通路是否在自身免疫性甲状腺炎中过度活化以及Notch信号和巨噬细胞极化的相关性。研究方法:动物实验,将4周龄的雌性NOD.H-2h4小鼠按照随机法分为2组,对照组（Control组）和实验组（Spontaneous autoimmune thyroiditis,SAT组）,对照组喂无菌去离子水,SAT组给予0.05%碘化钠水。分别于喂养2周、4周、8周、12周和16周处死小鼠。取其甲状腺、血清、脾脏和腹腔灌洗液。记录甲状腺重量、ELISA法测定血清Tg Ab滴度、HE染色法观察甲状腺细胞淋巴的浸润程度、流式细胞术检测脾脏和腹腔巨噬细胞群分布状况。体外实验:1、取Control组和SAT组各个周龄小鼠骨髓,用集落刺激因子诱导培养,RT-PCR法检测Notch信号通路的m RNA的表达水平,Western blot法检测Notch信号通路蛋白的表达水平。2、Notch信号阻断和激活实验:4周龄雌性NOD.H-2h4小鼠随机分为2组,Control组喂无菌去离子水,SAT组给予0.05%碘化钠水,16周处死后取小鼠骨髓,种植于6孔板中,集落刺激因子诱导培养七天后,向培养液中加入不同处理因素诱导极化巨噬细胞,分为对照组、M1极化组（1、2、3组）、M2极化组（4、5、6组）。刺激24h后,用流式细胞术检测各组巨噬细胞群分布状况,Western blot法检测蛋白表达水平。对照组:+DMSO;M1极化组1:LPS+IFN-γ;M1极化组2:LPS+IFN-γ+Jagged1（Notch配体）;M1极化组3:LPS+IFN-γ+DAPT（Notch阻断剂）;M2极化组4:IL-4;M2极化组5:IL-4+Jagged1（Notch配体）;M2极化组6:IL-4+DAPT（Notch阻断剂）结果:高碘水喂养第8周、12周和16周,SAT组NOD.H-2h4小鼠甲状腺重量、血清Tg Ab水平以及甲状腺淋巴细胞浸润程度较同龄Control组有明显增高,具有统计学差异。给予碘干预2周和4周,两组小鼠相比无统计学差异。在F4/80+巨噬细胞中,在第8周、12周和16周,NOD.H-2h4小鼠（SAT组）与（Control）组相比,脾脏和腹腔M1型巨噬细胞（F4/80+CD11c+）比例明显升高,M2型巨噬细胞（F4/80+CD206+）比例明显下降,且随着喂碘水时间增长,这种改变趋势愈加突出,并具有显着的统计学意义。而经过2周和4周高碘诱导的小鼠与同时间段用无菌水喂养的对照组小鼠相比,M1型和M2型巨噬细胞的比例并无明显的上升或下降的趋势,并不具有统计学差异。在高碘水喂养第8周、12周和16周,SAT组小鼠的骨髓巨噬细胞中Notch信号相关分子Notch1、Notch3、Jagged1、Socs3、Delta1、Hey1、Hes1的m RNA表达较同龄Control组明显上升并有显着的统计学差异。而碘诱导2周和4周的SAT组小鼠并无上述变化,无统计学差异。从第8周开始,SAT组骨髓巨噬细胞中Notch信号通路关键蛋白Jagged1、Hey1、Hes1的蛋白表达均明显高于Control组并持续到16周,差异具有统计学意义。过表达和阻断Notch信号的体外实验:无论在SAT组或Control组中,在M1极化组LPS+IFN-γ+Jagged1（Notch配体）组中,Jagged1、Hey1和Hes1的蛋白表达量与M1型巨噬细胞的表达均明显高于LPS+IFN-γ组;而在LPS+IFN-γ+DAPT（Notch阻断剂）组中,Jagged1、Hey1和Hes1的蛋白表达量与M1型巨噬细胞的表达较LPS+IFN-γ组均显着下降。在M2极化组中,IL-4+Jagged1组M2型巨噬细胞的表达低于IL-4组,IL-4+DAPT组的M2型巨噬细胞的表达高于IL-4组;Jagged1、Hey1和Hes1的蛋白表达量在IL-4+Jagged1（Notch配体）组中,均高于IL-4组和IL-4+DAPT（Notch阻断剂）组。SAT组的M1/M2极化组Notch信号通路关键蛋白的表达均显着高于Control组,差异具有显着的统计学意义。结论:1、0.05%碘化钠水喂养8周后NOD.H-2h4小鼠发生自身免疫性甲状腺炎。2、自身免疫性甲状腺炎小鼠腹腔和脾脏的M1型的巨噬细胞的表达显着增高,M2型巨噬细胞的的表达显着下降。3、AIT小鼠的骨髓巨噬细胞Notch信号相关分子中,Notch1、Notch3、Jagged1、Socs3、Delta1、Hey1、Hes1的m RNA,Jagged1、Hey1、Hes1的蛋白水平,均明显高于同龄对照组,提示Notch信号通路参与自身免疫性甲状腺炎的发生发展。4、激活Notch信号通路后,小鼠骨髓M1型巨噬细胞表达增加,Jagged1、Hey1和Hes1的蛋白表达量增加,M2型巨噬细胞表达减少;抑制Notch信号通路后,M1型巨噬细胞表达减少,Jagged1、Hey1和Hes1的蛋白表达量下降,M2型巨噬细胞表达增加。提示Notch信号通路调控巨噬细胞极化参与自身免疫性甲状腺炎。
白尹豪[4]（2020）在《隔药灸脐法治疗桥本甲状腺炎的临床研究》文中研究说明目的:1.基于现阶段临床证据,探索采用灸法治疗桥本甲状腺炎的可行性;2.观察隔药灸脐法对桥本甲状腺炎患者中医临床症状评分、甲状腺功能、形态及健康状况的影响。方法:1.Meta分析:采用计算机检索中国知网数据库、中国生物医学文献、万方数据库、Pubmed、Embase和Cochrane Library,全面检索所有关于灸法治疗桥本甲状腺炎的临床随机对照试验,采用人工筛选的方法收集灸法治疗桥本甲状腺炎的临床证据,使用Cochrane Handbook推荐偏倚风险评估工具Risk of bias tool对纳入试验进行质量评价,采用Review Manager5.3软件进行统计分析并绘图。2.临床研究:采用随机单盲法将纳入的60例患者分为隔药灸脐组30例、隔淀粉灸脐组30例,治疗3个疗程后,观察两组患者治疗前后的中医临床症状、甲状腺激素水平（FT3、FT4、TSH）、甲状腺激素滴度（TPOAb、TGAb）、甲状腺形态、健康状况调查简表评分（SF-36）的变化。结果:1.Meta分析结果:（1）与单纯使用西药相比,灸法在升高FT3值方面疗效优于西药;在降低桥本甲状腺炎患者TGAb值、MCA值、TSH值方面疗效与西药相当且有优于西药的趋势,在升高桥本甲状腺炎患者FT4值方面疗效与西药相当。（2）与单纯使用西药相比,灸法联合西药在降低桥本中状腺炎患者TGAb值、MCA值、TPOAb值方面疗效优于西药,在升高桥本甲状腺炎患者FT3值方面疗效优于西药,在提高临床疗效方面效果优于西药;在降低桥本甲状腺炎患者TSH值方面疗效与西药相当且有优于西药的趋势,在升高桥本甲状腺炎患者FT4值方面疗效与西药相当且有优于西药的趋势。2.临床研究结果:（1）中医临床症状改善情况:隔药灸脐组患者颈前肿大、畏寒怕冷、胃脘或胁肋痛、情绪抑郁、便溏不爽的临床症状改善明显（P<0.01）,隔淀粉灸脐组患者情绪抑郁、便溏不爽的临床改善明显（P<0.01）;隔药灸脐组总有效率为80.95%,隔淀粉灸脐组总有效率为42.11%,比较两组差异有明显统计学意义（P<0.01）。（2）甲状腺激素水平改善情况:隔药灸脐组在治疗后FT3、FT4、TSH较治疗前存在显着统计学差异（P<0.01）;隔淀粉灸脐组在治疗后仅FT3水平比较有显着统计学意义（P<0.01）;在甲状腺激素水平改善程度上,两组比较有统计学差异（P<0.05）。（3）甲状腺抗体滴度改善情况:隔药灸脐组治疗前后TPOAb、TGAb组内比较有显着统计学意义（P<0.01）,隔淀粉灸脐组患者治疗前后TPOAb、TGAb组内比有统计学意义（0.01<P<0.05）,两组患者治疗后TPOAb、TGAb组间比较无统计学意义（P>0.05）。（4）甲状腺形态方面:隔药灸脐组治疗前后甲状腺结节最大直径、甲状腺峡部厚度、左叶厚度、右叶厚度比较有显着统计学意义（P<0.01）,隔淀粉灸脐组各项指标治疗前后无统计学意义（P>0.05）;两组组间比较有统计学意义（P<0.05）。（5）健康状况评分方面:隔药灸脐组患者治疗后在一般健康状况、躯体疼痛、生理职能、社会功能、情感职能方面均有改善（P<0.05）;隔淀粉灸脐组患者仅在在一般健康状况方面有改善（P<0.05）。组间比较:在一般健康状况、健康变化方面两组差值比较有显着统计学意义（P<0.01）;在生理机能方面两组差值比较有统计学意义（P<0.05）。结论:1.现阶段临床证据表明,与常规西药相比,灸法在治疗桥本甲状腺炎方面可能存在优势。2.隔药灸脐法可以明显改善桥本甲状腺炎患者中医临床症状,改善甲状腺激素水平（FT3、FT4、TSH）以及甲状腺抗体滴度水平（TPOAb、TGAb）,提高患者生活质量,部分改善甲状腺肿大程度,且疗效优于隔淀粉灸脐法。
黄盛[5]（2020）在《基于NIM网络探索清肝健脾理气法治疗桥本氏病临床疗效及机制研究》文中提出1研究目的本研究以肝郁脾虚型桥本氏甲状腺炎患者为目标人群,以清肝健脾理气方为治疗方案,以甲状腺激素水平、甲状腺相关抗体滴度、中医证候量表、甲状腺体积、血常规、肝功能、肾功能为观察指标,系统评估该疗法的临床有效性及安全性;同时,通过检测ACTH评价清肝健脾理气法对HPA轴和自身炎症免疫调节平衡的影响,初步阐明清肝健脾理气法治疗肝郁脾虚型桥本氏甲状腺炎的作用机制。2研究方法依据纳入、排除标准,纳入桥本氏甲状腺炎受试者共84例,脱落2例。全部受试者予清肝健脾理气法治疗,周期为3个月;治疗前后监测甲状腺激素水平、甲状腺相关抗体滴度、中医证候量表、甲状腺体积、血常规、肝功能、肾功能、ACTH滴度。3研究结果3.1治疗前后TPOAb、TGAb滴度水平分析82例受试者治疗后TPOAb、TGAb滴度水平较前下降,差异有统计学意义（p<0.05）。亚组分析:（1）甲状腺功能正常组、甲状腺功能减退组受试者的TPOAb滴度水平治疗后较前下降,均具有统计学差异（p<0.05）;（2）甲状腺功能亢进组受试者TPOAb滴度水平治疗后较前无统计学差异（p>0.05）;（3）甲状腺功能正常组、甲状腺功能减退组、甲状腺功能亢进组受试者TGAb滴度水平治疗后较前下降,均具有统计学差异（p<0.05）。3.2治疗前后ACTH滴度水平分析82例受试者治疗后ACTH滴度水平较前下降,差异有统计学意义（p<0.05）。亚组分析:（1）甲状腺功能亢进组治疗后ACTH滴度水平较前下降,具有显着性统计学差异（p<0.01）;（2）甲状腺功能正常组、甲状腺功能减退组受试者治疗前后ACTH滴度水平无统计学差异（p>0.05）。3.3 ACTH滴度水平与甲状腺自身抗体水平之间的相关性分析82例受试者经相关性分析显示:ACTH滴度水平与TPOAb呈正相关,与TGAb无明显相关性。3.4治疗前后甲状腺激素水平分析（1）甲状腺功能减退组受试者经清肝健脾理气法治疗后,TT3、TT4、FT3、FT4均较前升高,TSH下降（p<0.05）;（2）甲状腺功能亢进组受试者经清肝健脾理气法治疗后,TT3、TT4、FT3、FT4均较前下降,TSH升高（p<0.05）。3.5中医证候积分和中医证候疗效分析（1）全部受试者治疗后中医证候积分较前下降,具有显着性统计学差异（p<0.01）;（2）全部受试者中医证候疗效分析:总有效率为94%。3.6治疗前后甲状腺体积分析受试者经清肝健脾理气方治疗后,甲状腺右叶体积、左叶体积呈减小趋势,具有显着性统计学差异（p<0.01）。峡部无明显改变。3.7安全指标分析依据安全性评价标准,1级共80例,3级共2例,安全性为97.56%,无明显不良事件的发生。4研究结论4.1临床研究清肝健脾理气法治疗桥本氏甲状腺炎,可降低甲状腺抗体水平、改善甲状腺功能、减低甲状腺肿大、降低中医证候积分,临床应用安全有效。4.2机制研究NIM网络（如ACTH）可能是清肝健脾理气方治疗桥本氏甲状腺炎的潜在多靶点之一。
刘佳[6]（2020）在《实验性自身免疫性甲状腺炎肝郁脾虚证大鼠模型研究》文中认为目的:观察实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）肝郁脾虚病证结合模型构建过程中甲状腺功能的变化及高碘水对模型大鼠甲状腺功能的影响,并对EAT病证结合模型进行评价。材料与方法:本部分研究选取SPF级SD雌性大鼠,体重为180-220g,购买后适应性喂养1周,将大鼠随机分为正常组和模型组,正常组大鼠自然饲养,不予任何刺激。模型组大鼠采用“免疫介导+高碘水诱导联合慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节法”造模,从第8天开始除正常组大鼠喂养蒸馏水外,其余大鼠均饮用浓度为500mg/L的高碘水,第22天对大鼠进行初次免疫,背部多点皮下注射被完全弗氏佐剂（CFA）充分乳化的猪甲状腺球蛋白（Tg）,每只注射100μg Tg,每周注射两次。第29-56天进行加强免疫,背部多点皮下注射被不完全弗氏佐剂（IFA）充分乳化的Tg,每只注射100μg Tg,每周注射一次,同时每天上午8:00将大鼠放入束缚筒内束缚3小时,并于下午1:00将大鼠放入盛有温水的大塑料桶中游泳至力竭,且隔日禁食,隔日给足量食物。第57-84天予12只大鼠浓度为500mg/L的高碘水继续喂养,剩余大鼠予非高碘水进行喂养。造模过程中,分别于造模4周、6周、8周、10周、12周处死大鼠,检测以下指标:（1）甲状腺重量指数;（2）甲功五项;（3）肝郁脾虚相关指标。结果:1.血清甲功五项（FT3、FT4、TSH、TG-Ab、TPO-Ab）的变化:模型组大鼠血清TPOAb、TGAb水平在第4周、6周、8周、10周、12周高于正常组,差异有统计学意义（P<0.05）,且在第8周、10周、12周模型组大鼠血清TPOAb、TGAb水平明显高于正常组2倍以上,差异具有统计学意义（P<0.05）;模型组大鼠血清FT3、FT4水平在第4周时与正常组比较有升高趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）;第6周时模型组大鼠FT3、FT4水平高于正常组,差异具有统计学意义（P<0.05）;第8周、10周、12周时模型组大鼠FT3、FT4水平明显高于正常组2倍以上,差异具有统计学意义（P<0.05）;模型组大鼠血清TSH水平在4周、6周、8周、10周、12周低于正常组,差异具有统计学意义（P<0.05）;EAT成模后第4周高碘水组大鼠血清FT3、FT4、TPOAb、TGAb水平明显高于非高碘水组,差异具有统计学意义（P<0.05）;而高碘水组大鼠血清TSH水平明显低于非高碘水组,差异具有统计学意义（P<0.05）。2.甲状腺重量指数的变化:模型组大鼠甲状腺重量指数持续升高,第4周高于正常组,但差异无统计学意义（P>0.05）,第6周、8周、10周、12周明显高于正常组,差异具有统计学意义（P<0.05）;EAT成模后第4周高碘水组大鼠甲状腺重量指数指数明显高于非高碘水组,差异有统计学意义（P<0.05）。3.肝郁脾虚相关指标:与正常组大鼠相比,模型组大鼠5min运动总距离和中央区穿格数、体重、摄食量、胃排空率明显小于正常组,差异具有统计学意义（P<0.05）;而粪便含水量明显大于正常组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.采用免疫介导+高碘水诱导联合慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节法造模第8周成功建立了EAT病证结合模型。2.EAT造模过程中第4周出现亚临床甲亢,持续到第8周时出现临床甲亢。3.成模之后继续喂养高碘水4周的大鼠与未继续喂养高碘水的大鼠比较,甲状腺功能损伤加重。
丁彧涵[7]（2020）在《疏肝健脾养血法治疗桥本氏甲状腺炎的临床疗效及对IL-6、TNF-α的影响》文中研究说明目的:以疏肝健脾养血立法,对肝郁脾虚证型的桥本氏甲状腺炎（Hashimoto’s Thyroiditis,HT）（早期）患者进行中药干预治疗,观察甲状腺过氧化物酶抗体（TPo-Ab）,甲状腺球蛋白抗体（Tg-Ab）的指标变化。同时,对患者血中辅助T细胞分泌的白细胞介素-6（Inter Leukin-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量进行监测,从细胞因子学角度探讨传统经方化裁对HT的治疗效果,为祖国医学治疗HT提供免疫细胞因子层面见解。方法:临床取40例已确诊为HT（甲功尚未受损）、辨属肝郁脾虚证型的患者,以随机对照法将其分为对照组、治疗组各20例。对照组以健康宣教及生活方式干预为主,动态观诊;治疗组以生活方式干预配合疏肝健脾养血方口服,对照组、治疗组疗程均历时3个月。观察疗程前后2组患者的甲状腺功能（TSH、FT3、FT4）,细胞因子（IL-6、TNF-α）水平,甲状腺自身抗体（TPo-Ab、Tg-Ab）滴度,并对比疗程前后2组患者中医证候评分,全程监测患者安全性指标,综合所得数据指标,以统计学软件SPSS24.0进行统计学处理。结果:研究前期将2组患者基本数据进行基线统计分析,提示P值均>0.05,该研究具备统计学意义。①疗程前后2组病例的甲状腺激素（FT3、FT4、TSH）水平均无明显变化（P>0.05）,疗程前后组间甲状腺激素水平均无明显差异（P>0.05）。疏肝健脾养血法不会影响HT早期患者的甲状腺激素水平。②治疗组疗程前TGAb水平为:387.07±102.96疗程后TGAb水平为:304.12±42.81;对照组疗程前的TGAb水平为:352.81±88.51、疗程后的TGAb水平为:375.00±84.69。疏肝健脾养血法可有效降低HT早期患者TGAb水平（P<0.01）。治疗组疗程前TPOAb水平为:862.35（707.19,1300.00）、治疗组疗程后TPOAb水平为:410.47（260.22,593.94）;对照组疗程前的 TPOAb 水平为:828.64（697.48,1187.30）、对照组疗程后TPOAb水平为:948.80（806.71,1191.42）。疏肝健脾养血法可有效降低HT早期患者TPOAb水平（P<0.01）。③治疗组疗程前IL-6水平为:9.32±2.32、治疗组疗程后IL-6水平为:5.73±0.97;对照组疗程前IL-6水平为:8.48±2.30、对照组疗程后IL-6水平为:9.63±2.28。疏肝健脾养血法可降低Th2型细胞因子IL-6的表达,平衡体内免疫反应（P<0.01）。④TNF-α水平:治疗组疗程前TNF-α水平为:103.81±15.03、治疗组疗程后TNF-α水平为:75.77±11.18;对照组疗程前TNF-α水平为:99.53±16.33、对照组疗程后TNF-α水平为:110.36±12.01。疏肝健脾养血法可降低Th1型细胞因子TNF-α的表达,平衡体内免疫反应（P<0.01）。同时,研究发现两组患者IL-6水平与甲状腺自身抗体 TGAb、TPOAb 均无明显相关性（r=0.071,P=0.663;r=0.074,P=0.649）,TNF-α 水平与甲状腺自身抗体TGAb、TPOAb均呈显着正相关（r=0.601,P<0.01;r=0.927,P<0.01）。TNF-α属Th1型细胞因子,表明HT患者体内免疫反应仍以Th1型占优势。⑤治疗组疗程后总体有效率为90.0%,对照组疗程后总体有效率为15.0%,治疗组的临床总体治疗效果明显优于对照组（P<0.01）。⑥治疗组疗程前中医证候总积分为:35.05±8.53、治疗组疗程后中医证候总积分为:14.05±6.05;对照组治疗前中医证候总积分为:32.15±6.08、对照组治疗后中医证候总积分为:30.30±4.50。疏肝健脾养血法可有效改善HT早期患者临床证候（P<0.01）。统计中医证候总体疗效积分,治疗组的中医证候疗效总有效率为70.0%,对照组的中医证候疗效总有效率为25.0%,治疗组的中医证候改善程度较显（P<0.01）。就单项证候改善程度而言,治疗组除纳呆、面色萎黄、肠鸣嗳气症状外,其余临床体征均显着改善（P<0.01）,对照组在疗程后仅改善了情志异常变化、善太息症状（P<0.05）。⑦安全性指标:本研究过程中40例患者在治疗前后血常规、肝肾功能检查值均在正常范围内,服药患者均未出现不适感,无病例因不良反应中途退出研究。结论:对于临床早期HT患者,疏肝健脾养血法可有效改善其临床症状、体征,降低甲状腺自身抗体滴度水平,同时,IL-6、TNF-α细胞因子表达也有所下降,表明该法可调节HT早期患者体内免疫紊乱状态,对甲状腺激素水平无明显影响。整体疗效确切,作用安全。
杨雯晴[8]（2020）在《组蛋白乙酰化和甲基化在自身免疫性甲状腺炎中的作用研究》文中研究表明背景:自身免疫性甲状腺炎（Autoimmune thyroiditis,AIT）又称桥本甲状腺炎（Hashimoto thyroiditis,HT）,是一种典型的器官特异性自身免疫性甲状腺疾病。患者通常以血清抗甲状腺过氧化物酶抗体（Thyroid peroxidase antibody,TPOAb）和抗甲状腺球蛋白抗体（Thyroglobulin antibody,TgAb）滴度的显着升高为主要特征。桥本甲状腺炎的发病机制尚不完全清楚,目前认为是遗传易感性和环境因素的相互作用导致对甲状腺自身抗原的免疫耐受破坏,从而导致疾病的发生。表观遗传学为环境因素和遗传背景之间的联系提供了合理解释。表观遗传修饰是不伴原始DNA序列改变的稳定可遗传的基因表达改变,主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰（主要为乙酰化和甲基化）和microRNA（miRNA）,对于维持正常的生长发育、分化以及基因组稳定意义重大。组蛋白乙酰化是基因转录激活的重要标识,而组蛋白甲基化的氨基酸残基和数量共同决定其对基因调控的作用。组蛋白H3赖氨酸4甲基化（histone H3lysine 4 methylation,H3K4me）被认为是基因活化的标志,而组蛋白H3赖氨酸27三甲基化（histone H3 lysine 27 trimethylation,H3K27me3）被认为与染色质沉默有关。组蛋白乙酰化和甲基化广泛参与细胞凋亡、代谢、炎症反应及免疫应答等生物学进程。研究报道组蛋白修饰水平及其调控酶的异常表达与多种自身免疫性疾病的发生发展密切相关,如类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）、系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus,SLE）、一型糖尿病（Type 1 diabetic mellitus,T1DM）等。而目前关于自身免疫性甲状腺疾病的相关研究主要集中于Graves’患者的外周血方面。研究发现Graves’病患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）中组蛋白H4整体乙酰化水平较对照组显着降低,组蛋白去乙酰化酶HDAC1和HDAC2的mRNA表达水平较对照组显着升高。Graves’病患者CD4+T细胞和CD8+T细胞中T细胞信号转导及活化的基因启动子区域H3K4me3、H3K27ac水平降低。最新的一项研究发现,HT患者CD4+T细胞中SIRT1表达水平较对照组显着升高。而目前缺乏组蛋白乙酰化和甲基化与HT的系统研究。本研究通过临床HT患者和自发性自身免疫性甲状腺炎（Spontaneous autoimmune thyroiditis,SAT）动物模型两部分探究组蛋白乙酰化和甲基化在HT中的作用。研究方法:第一部分:收集结节性甲状腺肿或甲状腺微小乳头状癌手术患者的病灶旁或对侧叶甲状腺组织,根据术后病理报告和甲状腺功能分为桥本病组（HT组,n=30）和对照组（Control组,n=30）。电化学免疫发光法测定血清游离T3、游离T4、促甲状腺激素、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）和甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）。提取甲状腺组织的总RNA,应用Real-time PCR检测几种组蛋白修饰酶HDAC1-6、SIRT1、P300、CREBBP、KMT2A-D以及JMJD3的相对m RNA表达水平。免疫组织化学染色法探究HDAC2、HDAC5、CREBBP及JMJD3在甲状腺组织中的蛋白表达水平及细胞定位。提取甲状腺组织的总组蛋白,应用ELISA法检测甲状腺组织中组蛋白H3整体乙酰化水平（histone H3 acetylation,H3ac）、H3K4me1/3水平和H3K27me3水平。第二部分:将5周龄的NOD.H-2h4小鼠随机分为SAT组、Control组、GSK J4（JMJD3选择性抑制剂）组、GSK J4对照组、PF CBP1（CREBBP选择性抑制剂）组和PF CBP1对照组。六组小鼠分别给予0.05%碘化钠（NAI）饮水、无菌去离子水、0.05%NAI饮水+GSK J4腹腔注射、0.05%NAI饮水+0.9%生理盐水（NS）腹腔注射、0.05%NAI饮水+PF CBP1腹腔注射以及0.05%NAI饮水+含4%dmso的NS腹腔注射。实验开始后8周处死小鼠,留取血清、脾脏及甲状腺组织。通过甲状腺组织冰冻切片HE染色和血清TGAb水平评估小鼠炎症状态。提取SAT和Control组小鼠甲状腺组织的总RNA,利用Real-time PCR检测甲状腺组织中HDAC2、HDAC5、CREBBP和JMJD3的相对mRNA表达水平。甲状腺冰冻切片免疫组化染色检测小鼠甲状腺组织中组蛋白H3赖氨酸9和14乙酰化（histone H3 lysine 9 and 14 acetylation,H3K9-14ac）和H3K27me3表达水平。脾脏细胞流式染色检测GSK J4和PF CBP1治疗后的Th1和Th17淋巴细胞比例改变。结果:1.与对照组相比,HT患者甲状腺组织中HDAC2和HDAC5的表达水平显着降低,CREBBP的表达水平显着升高,整体H3ac水平显着升高。KMT2A-D的相对mRNA表达水平在组间无显着统计学差异,但HT患者中H3K4me1和H3K4me3水平较对照组显着升高。HT患者甲状腺组织中JMJD3的表达水平显着高于对照组,H3K27me3水平显着低于对照组。双变量相关性分析结果显示:HDAC2、HDAC5 mRNA水平以及H3K27me3水平与血清TPOAb和TgAb呈显着负相关,CREBBP、JMJD3 mRNA水平以及H3ac水平与TPOAb和TgAb呈显着正相关。2.与SAT-control组小鼠相比,SAT小鼠甲状腺组织中CREBBP mRNA水平、H3K9-14ac水平以及JMJD3 mRNA水平显着升高,H3K27me3水平显着降低。与PF CBP1对照组相比,SAT+PF CBP1组小鼠的甲状腺相对重量显着降低,炎症评分有下降趋势,血清TgAb滴度显着降低,甲状腺组织中H3K9-14ac水平显着下降,脾脏Th1细胞比例显着降低,Th17细胞比例无统计学差异。与GSK J4对照组相比,SAT+GSK J4小鼠甲状腺相对重量显着降低,炎症评分有下降趋势,血清TgAb滴度显着降低,甲状腺组织中H3K27me3水平显着升高,脾脏Th1细胞比例显着降低,Th17细胞比例无显着变化。结论:1.HT患者甲状腺组织中H3ac水平和H3K4me1/3水平显着升高,H3K27me3水平显着降低,且差异组蛋白修饰及其调控酶的水平与血清TPOAb和TGAb抗体水平显着相关。H3ac、H3K4me1/3以及H3K27me3调控下的染色质整体转录激活与HT的发生发展密切相关。2.SAT小鼠甲状腺组织中CREBBP、H3K9-14ac水平以及JMJD3水平显着升高,H3K27me3水平显着下降。PF CBP1和GSK J4干预可显着降低高碘诱导下NOD.H-2h4小鼠甲状腺内H3K9-14ac水平,升高H3K27me3水平,减轻小鼠SAT的病情程度,降低血清TgAb滴度和脾脏Th1淋巴细胞比例。
杨晓娟[9]（2019）在《益气解毒消瘿方调节实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠Th17/Treg免疫失衡的机制研究》文中指出目的:观察益气解毒消瘿方对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠（EAT）甲状腺自身抗体（TGAb、TPOAb）水平,脾脏单个核细胞（PMBC）Th17、Treg 比率,Th17、Treg 调控基因 RORyt、Foxp3 表达,细胞因子（TGF-β、IL-6、IL-10、IL-17）水平的调节作用,初步探讨益气解毒消瘿方调节EAT大鼠Th17/Treg免疫失衡的作用机制,为中医药治疗自身免疫性甲状腺炎（AIT）提供可靠的实验依据。方法:选用SPF级Wistar大鼠60只,取10只作为正常组,其余50只（采用猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂混合,多点皮下注射的方法）造模成EAT。造模成功的48只大鼠随机分为模型组、亚硒酸钠对照组、益气解毒消瘿方低剂量治疗组、益气解毒消瘿方高剂量治疗组,每组12只。分别给予双蒸水、亚硒酸钠、相应剂量的益气解毒消瘿方合剂灌胃8周。实验结束,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠血清甲状腺自身抗体（TGAb、TPOAb）水平、大鼠脾脏IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β细胞因子水平,流式细胞技术检测大鼠脾脏调节性T细胞（Treg）和辅助T细胞17（Th17）比率,HE染色法观察EAT大鼠甲状腺细胞形态学变化,实时定量RT-PCR法检测大鼠甲状腺组织中RORγt、Foxp3、stat3、stat5 mRNA的表达。统计方法:数据均采用SPSS 22.0进行统计分析。计量资料以均数±标准差表示,组间比较采用方差分析,计数资料采用卡方分析。P<0.05有统计学意义。结果:1.EAT大鼠模型组血清甲状腺抗体水平明显高于正常组大鼠。治疗8周后,高、低剂量中药组、西药组大鼠血清甲状腺抗体水平均有所下降。高、低剂量中药组优于西药组,高、低剂量中药组具有剂量效应关系。2.在正常组的大鼠中,甲状腺滤泡形态完整,滤泡内充满胶质,滤泡上皮呈立方状。未见炎性细胞浸润。模型组甲状腺滤泡被广泛破坏,结构不完整。甲状腺内可见大量淋巴细胞浸润。西药组甲状腺较模型组好转,部分滤泡结构恢复,淋巴细胞浸润减少。高、低剂量中药组大部分滤泡结构恢复,淋巴细胞浸润减少,高剂量组优于低剂量组。3.与正常组相比,EAT大鼠脾脏PMBC中Treg明显降低,Th17明显升高,Th17/Treg比值升高。亚硒酸钠西药组和中药高低剂量组能显着升高Treg,降低Th17比率,降低Th17/Treg 比值。中药组优于西药组,具有量效关系。4.EAT大鼠模型组甲状腺与正常组比较,Foxp3表达减低,RORγt表达增高。治疗后,西药组和中药高低剂量组Foxp3表达升高,RORyt表达降低。中药组优于西药组,具有量效关系。5.EAT大鼠模型组血清与正常组比较IL-17、IL-6、TGF-β水平升高,IL-10水平降低。治疗后,西药组和中药高低剂量组IL-17、IL-6水平降低,IL-10、TGF-β水平升高。中药高剂量组优于西药组、中药低剂量组。6.模型组大鼠脾脏组织stat5、Foxp3 mRNA与正常对照组相比明显下调;与模型组相比,中药高剂量组与中药低剂量组stat5、Foxp3 mRNA均明显上调,西药组stat5、Foxp3 mRNA表达上调不明显,无统计学差异;中药组与西药组相比差异有统计学意义。模型组大鼠脾脏组织RORyt、stat3 mRNA与对照组相比明显上调,与模型组相比,中药高剂量组、中药低剂量组RORyt、stat3 mRNA表达均明显下调;中药组与西药组相比,差异有统计学意义。结论:益气解毒消瘿方能降低EAT大鼠甲状腺自身抗体（TGAb、TPOAb）水平,改善EAT大鼠的甲状腺病理改变,调节EAT大鼠的Th17/Treg免疫失衡。其机制可能是通过调控EAT大鼠甲状腺基因RORγt、Foxp3的表达、调节细胞因子（TGF-β、IL-6、IL-10、IL-17）的水平来实现的。
刘雅楠[10]（2019）在《隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠microRNA表达谱的影响及免疫调节机制研究》文中认为目的:本研究拟观察隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎（Experimental autoimmune thyroiditis,EAT）大鼠甲状腺组织mi RNA表达谱的影响,并探讨隔药饼灸对EAT大鼠的免疫调节机制。拟阐明隔药饼灸可能通过影响EAT大鼠甲状腺mi RNA表达谱,抑制免疫细胞因子的表达和炎症信号通路的激活,减少炎症介质的释放,起到改善甲状腺自身免疫炎症的作用,以期为隔药饼灸治疗HT的临床应用提供更多的理论依据。方法:将体重100±20g的雌性清洁级SD大鼠随机分成正常组和造模组。采用完全和不完全弗氏佐剂乳化的猪甲状腺球蛋白和碘剂联合免疫的方法制备EAT大鼠模型。确定造模成功后,再将造模大鼠随机分为三个组:模型组、隔药饼灸组和西药组。隔药饼灸组大鼠取“大椎、命门”及“天突、关元”2组穴位进行相应的治疗,每日取1组穴位,两组穴位交替使用,每天灸1次,每穴2壮,连续30天;西药组用优甲乐悬浊液（1μg/2ml）灌胃,每天1次,连续30天。干预结束后,取各组大鼠血清和甲状腺组织。HE染色法观察各组大鼠甲状腺组织病理学变化;酶联免疫吸附法（ELISA）法检测血清中TGAb、TPOAb、TSH、FT3、FT4以及IL-6、TNF-α蛋白的浓度;mi RNA高通量测序（RNA-seq）检测大鼠甲状腺组织mi RNA表达谱的变化,预测差异表达mi RNA的靶基因,并进行功能注释和KEGG通路等生物信息学分析,并对隔药饼灸可调控的差异表达mi RNAs进行验证;实时定量PCR（RT-q PCR）法检测各组大鼠甲状腺组织中免疫相关细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-6、Foxp3、GATA3、IL-17、IL-23、IL-23R m RNA的表达;免疫组化法检测各组大鼠甲状腺组织中TLR受体信号通路相关蛋白TLR3、TLR4、HMGB1、RAGE、HSP60、My D88、TRIF、IRAK1、TRAF6、NF-κBp65的表达。结果:1.甲状腺组织病理学观察:光镜下显示正常组大鼠甲状腺滤泡结构清晰,呈圆形或椭圆形,滤泡腔内充满胶质,未见有淋巴细胞浸润。模型组大鼠甲状腺滤泡结构广泛破坏、萎缩,可见大量淋巴细胞浸润,间质有纤维组织增生。隔药饼灸组大鼠甲状腺组织形态较模型组有一定改善,甲状腺滤泡形状稍规则,可见少量甲状腺滤泡破坏,间质有少量淋巴细胞浸润和纤维组织增生。西药组大鼠部分甲状腺滤泡破坏,可见少量淋巴细胞浸润和纤维组织增生。2.隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺抗体和功能的影响:甲状腺抗体:与正常组比,模型组大鼠血清TPOAb、TGAb的浓度均升高（均P<0.01）;与模型组比,隔药饼灸组大鼠的血清TPOAb、TGAb浓度均显着降低（均P<0.05）。甲状腺功能:与正常组比,模型组大鼠的血清TSH浓度升高,FT3、FT4的浓度降低,差异有统计学意义（均P<0.01）;与模型组比,隔药饼灸组与西药组大鼠血清TSH的浓度均显着降低（分别P<0.05,P<0.01）,西药组大鼠血清FT3、FT4的浓度显着升高（分别P<0.01,P<0.05）。3.隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺组织mi RNA表达谱的影响:与正常组比,EAT模型大鼠甲状腺组织有多种mi RNAs表达的变化,其中mi R-133a-3p、mi R-3084b-3p、mi R-3084d、mi R-133b-3p、mi R-3084a-3p、mi R-1249、mi R-365-3p、mi R-133a-5p、mi R-1b、mi R-129-2-3p、mi R-346、mi R-1-3p、mi R-664-3p、mi R-326-3p、mi R-149-5p、mi R-206-3p、mi R-328b-3p表达显着上调,mi R-547-3p、mi R-298-5p、mi R-296-3p、mi R-331-5p表达显着下调。经隔药饼灸干预后,上述中mi R-346表达显着下调,mi R-331-5p表达显着上调;而西药组mi R-133b-3p、mi R-133a-3p、mi R-1b、mi R-1-3p、mi R-3084d、mi R-3084a-3p、mi R-3084b-3p表达显着下调,mi R-331-5p表达显着上调。隔药饼灸可调控的mi RNAs的靶基因包括多种已知的HT发病相关的基因,如转录因子、免疫细胞因子、炎症信号通路相关分子,并具有蛋白质结合、细胞过程、细胞及物质代谢过程、生物调节等多种生物功能;涉及的KEGG通路中,除了富集较多的代谢通路、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路、内分泌抵抗等,还包括趋化因子信号通路、甲状腺激素信号通路、Toll-like receptor信号通路、NF-kappa B信号通路等。4.隔药饼灸可调控的差异表达mi RNAs验证:与正常组比,模型组大鼠甲状腺组织mi RNA-346的表达显着升高（P<0.01）,mi RNA-331-5p的表达显着降低（P<0.05）;与模型组比,隔药饼灸组大鼠甲状腺组织mi RNA-346的表达降低（P<0.05）,mi RNA-331-5p的表达升高（P<0.05）,西药组大鼠甲状腺组织mi RNA-346的表达也明显降低（P<0.01）。5.隔药饼灸对EAT大鼠血清炎症因子浓度及甲状腺免疫细胞因子m RNA表达的影响:与正常组比,模型组大鼠血清IL-6、TNF-α的浓度及甲状腺组织IFN-γ、IL-4、IL-6、TGF-β1、IL-17、IL-23、IL-23R m RNA的表达显着升高（P<0.01或P<0.05）,Foxp3 m RNA的表达则显着降低（P<0.01）;与模型组比,隔药饼灸组大鼠血清IL-6、TNF-α的浓度及甲状腺组织IFN-γ、IL-4、IL-6、TGF-β1、IL-17、IL-23、IL-23R m RNA的表达降低（P<0.01或P<0.05）,Foxp3 m RNA的表达升高（P<0.05）,西药组大鼠血清IL-6的浓度及甲状腺组织IL-4、IL-6、TGF-β1、IL-17、IL-23、IL-23R m RNA的表达也显着降低（P<0.01或P<0.05）。6.隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺TLR信号通路相关蛋白表达的影响:与正常组比,模型组大鼠甲状腺组织TLR3、HMGB1、RAGE、HSP60、My D88、TRIF、IRAK1、TRAF6、NF-κBp65蛋白的表达均显着升高（均P<0.01）;与模型组比,隔药饼灸组大鼠甲状腺组织TLR3、HMGB1、HSP60、My D88、TRIF、IRAK1、TRAF6、NF-κBp65蛋白的表达降低（P<0.01或P<0.05）,西药组大鼠甲状腺组织TLR3、HMGB1、My D88、IRAK1、NF-κBp65蛋白的表达也明显降低（P<0.01或P<0.05）。结论:1.隔药饼灸能改善EAT大鼠的甲状腺组织形态,降低EAT大鼠血清甲状腺自身抗体TPOAb、TGAb及TSH的浓度,减轻甲状腺组织炎症反应。2.隔药饼灸能影响EAT大鼠甲状腺组织mi RNA表达谱,并可下调mi RNA-346的表达,上调mi R-331-5p的表达,差异表达mi RNAs的一些靶基因及其涉及的Toll-like receptor信号通路等与免疫密切相关,可能是隔药饼灸减轻EAT甲状腺炎症反应的效应机制之一。3.隔药饼灸能显着降低EAT大鼠甲状腺组织免疫细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-6、TGF-β1、IL-17、IL-23、IL-23R m RNA的表达,升高转录因子Foxp3 m RNA的表达,调节免疫细胞因子的失衡,并能抑制EAT中TLR信号通路的异常激活,减少血清炎症因子IL-6、TNF-α的释放,这可能是隔药饼灸缓解和/或抑制甲状腺自身免疫炎症的重要机制。
二、Immune Intervention Effects on the Induction of Experimental Autoimmune Thyroiditis（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Immune Intervention Effects on the Induction of Experimental Autoimmune Thyroiditis（论文提纲范文）
（1）基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨芪箭消瘿方对AIT大鼠肠道菌群及肠黏膜屏障的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 芪箭消瘿方研究基础 |
| 1 芪箭消瘿方的历史源流 |
| 参考文献 |
| 2 芪箭消瘿方的组方分析 |
| 参考文献 |
| 3 芪箭消瘿方的各药研究 |
| 参考文献 |
| 4 芪箭消瘿方的药效依据 |
| 参考文献 |
| 第二章 实验研究 |
| 实验一 芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺炎症损伤的影响 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 6.参考文献 |
| 实验二 芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 6.参考文献 |
| 实验三 芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠肠道菌群的影响 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 6.参考文献 |
| 实验四 芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠肠黏膜屏障的影响 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 6.参考文献 |
| 结语 |
| 1.结论 |
| 2.创新点 |
| 3.不足之处 |
| 附录 |
| 附录一 文献综述 肠道菌群与自身免疫性甲状腺疾病 |
| 参考文献 |
| 附录二 攻读学位期间发表的论文及科研成果 |
| 附录三 中药配方颗粒检验报告单 |
| 附录四 甲状腺冰冻切片组织评分标准 |
| 致谢 |
（2）中西医协同治疗视神经脊髓炎相关性视神经炎的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 视神经脊髓炎相关性视神经炎实验模型的建立及应用研究进展 |
| 1 前言 |
| 2 动物实验模型 |
| 3 离体组织实验模型 |
| 4 细胞实验模型 |
| 5 结语 |
| 参考文献 |
| 综述二 视神经脊髓炎谱系疾病发病相关抗体的研究进展 |
| 1 NMO概述 |
| 2 AQP4-IgG |
| 3 MOG-IgG |
| 4 GFAP抗体 |
| 5 AQP1-IgG |
| 6 其他相关性抗体 |
| 7 结语 |
| 参考文献 |
| 综述三 细胞因子与视神经脊髓炎谱系疾病 |
| 1 前言 |
| 2 Th17细胞相关的细胞因子 |
| 3 Th2细胞相关细胞因子 |
| 4 Treg细胞相关细胞因子 |
| 5 其他细胞因子 |
| 6 结语 |
| 参考文献 |
| 综述四 非侵入性电刺激在眼科应用的研究进展 |
| 1 前言 |
| 2 经角膜电刺激 |
| 3 经眼眶电刺激 |
| 4 经眼睑电刺激 |
| 5 结语 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究视神经脊髓炎相关性视神经炎患者临床特点及疗效分析 |
| 研究背景 |
| (一) 视神经脊髓炎相关性视神经炎患者的临床特点分析 |
| 1 研究方案 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 临床评估 |
| 1.6 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.2 临床特点 |
| 2.3 实验室检查 |
| 2.4 影像学特点 |
| (二) 针刺联合中药治疗NMO所致视神经萎缩的临床疗效 |
| 1 临床资料 |
| 1.1 视神经萎缩诊断标准 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 2 治疗方案 |
| 3 疗效指标 |
| 3.1 最佳矫正视力 |
| 3.2 动态视野 |
| 3.3 统计学分析 |
| 4 结果 |
| 4.1 NMO视神经萎缩患者一般资料 |
| 4.2 临床表现 |
| 4.3 治疗前后最佳矫正视力比较 |
| 4.4 针刺治疗前后动态视野变化 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 视神经脊髓炎相关视神经炎大鼠模型的构建与评价 |
| 研究背景 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验用动物及患者血清 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 实验方案 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 模型诱导后视神经内AQP4-IgG的沉积 |
| 2.2 大鼠视神经功能学变化 |
| 2.3 视神经光镜观察结果 |
| 2.4 视神经LFB染色结果 |
| 2.5 脊髓光镜观察结果 |
| 2.6 脊髓组织形态LFB染色结果 |
| 2.7 大脑光镜及HE染色观察结果 |
| 2.8 视网膜的光镜观察结果 |
| 2.9 视神经电镜超微结构观察 |
| 2.10 视神经NFL免疫荧光结果 |
| 2.11 视神经内CD68免疫荧光结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 NMO-ON动物模型构建国内外进展 |
| 3.2 本研究的主要结果与未来展望 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 实验研究 调肝活络法治疗视神经脊髓炎相关性视神经炎的疗效及机制探究 |
| 研究背景 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验用动物及血清 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 大鼠视神经F-VEP变化 |
| 2.2 大鼠视神经PLR变化 |
| 2.3 大鼠视网膜Brn3a变化 |
| 2.4 大鼠视神经形态学变化(HE染色) |
| 2.5 大鼠视神经超微结构变化(电镜) |
| 2.6 大鼠视神经组织免疫荧光染色结果 |
| 2.7 Western Blotting法检测视神经内目标蛋白阳性表达结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 NMO-ON的中西医防治现状 |
| 3.2 NMO-ON发病机制研究进展 |
| 3.3 调肝活络防治NMO-ON的疗效及潜在机制 |
| 4 结论 |
| 5 本研究主要创新、局限及未来展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间主要研究成果 |
（3）Notch信号通路调控巨噬细胞极化参与自身免疫性甲状腺炎过程的分子机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分:自身免疫性甲状腺炎中存在巨噬细胞极化 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 主要实验试剂 |
| 2.2 主要实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 测定TgAb(抗原介入的间接酶联免疫吸附试验,ELISA法) |
| 2.3.2 甲状腺组织炎症情况的评估 |
| 2.3.3 采用流式细胞术对小鼠脾脏M1/M2 型巨噬细胞群检测分析 |
| 2.3.4 流式细胞术检测小鼠腹腔灌洗液M1/M2 型细胞群 |
| 2.4 统计学处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 甲状腺相对重量 |
| 3.2 血清TgAb滴度的变化 |
| 3.3 甲状腺炎症状态评估 |
| 3.4 NOD.H-2~(h4)小鼠脾脏M1/M2 型巨噬细胞的表达 |
| 3.5 NOD.H-2~(h4)小鼠腹腔M1/M2 型巨噬细胞的表达 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分:Notch信号通路调控在自身免疫性甲状腺炎中的作用及分子机制研究 |
| 1 前言 |
| 2 实验材料与方法 |
| 2.1 实验试剂 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 不同周龄NOD.H-2~(h4)小鼠骨髓巨噬细胞的分离提纯原代培养 |
| 2.3.2 实时定量RT-PCR分析 |
| 2.3.3 Western Blot测定骨髓巨噬细胞中蛋白Jagged_1、Hey_1和Hes_1的表达水平 |
| 2.3.4 16周NOD.H-2~(h4)小鼠骨髓巨噬细胞Notch信号通路的激活和抑制后,巨噬细胞群分布及Notch受体及其配体下游靶基因通路关键蛋白的表达 |
| 2.4 统计学处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 NOD.H-2~(h4)小鼠骨髓巨噬细胞中Notch信号通路相关的mRNA的表达 |
| 3.2 Notch信号传导通路蛋白的表达 |
| 3.3 体外实验通过激动与阻断Notch信号通路对巨噬细胞极化影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 巨噬细胞极化在自身免疫疾病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）隔药灸脐法治疗桥本甲状腺炎的临床研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 灸法为主治疗桥本甲状腺炎的Meta分析 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 纳入标准 |
| 1.2 排除标准 |
| 1.3 检索策略 |
| 1.4 文献筛选与数据提取 |
| 1.5 偏倚风险评估 |
| 1.6 软件与统计分析方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 文献检索结果 |
| 2.2 纳入研究基本信息 |
| 2.3 纳入研究的偏倚风险评估结果 |
| 2.4 Meta分析结果 |
| 2.5 安全性分析 |
| 3 小结 |
| 4 讨论 |
| 4.1 灸法治疗桥本甲状腺炎的立法依据 |
| 4.2 研究的局限性 |
| 4.3 对临床的启示 |
| 参考文献 |
| 第二部分 隔药灸脐法治疗桥本甲状腺炎的临床研究 |
| 1 一般资料 |
| 1.1 受试者来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除标准 |
| 1.6 脱落标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 随机分组及样本量 |
| 2.2 盲法实施 |
| 2.3 治疗方法 |
| 2.4 试验过程 |
| 2.5 观察指标 |
| 2.6 统计方法 |
| 2.7 评价标准 |
| 3 结果 |
| 3.1 病例剔除及脱落情况 |
| 3.2 两组基线情况比较 |
| 3.3 试验结果 |
| 讨论 |
| 1 中医学对桥本甲状腺炎的认识 |
| 1.1 病因病机 |
| 1.2 证型分析 |
| 1.3 中医对桥本甲状腺炎的治疗 |
| 1.4 中医治疗桥本甲状腺炎的机制研究 |
| 1.5 小结 |
| 2 西医学对桥本甲状腺炎的认识 |
| 2.1 桥本甲状腺炎的病因 |
| 2.2 桥本甲状腺炎的诊断 |
| 2.3 桥本甲状腺炎的治疗 |
| 2.4 小结 |
| 3 结果分析 |
| 3.1 试验结果分析 |
| 3.2 隔药灸脐法与隔淀粉灸脐法疗效差异分析 |
| 4 疗效机理分析 |
| 4.1 隔药灸脐法应用概述 |
| 4.2 灸法作用 |
| 4.3 药物作用 |
| 4.4 穴位作用 |
| 4.5 综合作用 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 近十年中医药治疗桥本甲状腺炎的临床研究 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
（5）基于NIM网络探索清肝健脾理气法治疗桥本氏病临床疗效及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 中西医治疗桥本氏甲状腺炎的研究概况 |
| 1 中医研究进展 |
| 2 西医研究进展 |
| 3 小结 |
| 参考文献 |
| 第二节 NIM网络与桥本氏甲状腺炎的相关性研究 |
| 1 HPA轴与桥本氏甲状腺炎关系 |
| 2 情志致病与NIM网络系统调节 |
| 3 NIM网络调控与中医肝脾功能密切相关 |
| 4 NIM网络的中医药研究 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二章 临床研究 |
| 第一节 清肝健脾理气法治疗桥本氏甲状腺炎的临床疗效及机制研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究设计 |
| 3 受试人群 |
| 4 治疗方法 |
| 5 观察指标 |
| 6 疗效评价标准 |
| 7 不良反应观察 |
| 8 质量控制 |
| 9 数据管理和统计分析 |
| 10 研究结果 |
| 11 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（6）实验性自身免疫性甲状腺炎肝郁脾虚证大鼠模型研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述一 桥本甲状腺炎的中西医研究进展 |
| 综述二 桥本甲状腺炎肝郁脾虚证动物模型的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（7）疏肝健脾养血法治疗桥本氏甲状腺炎的临床疗效及对IL-6、TNF-α的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1 桥本氏甲状腺炎的中医学概念 |
| 1.1 中医命名由来 |
| 1.2 病因病机探讨 |
| 1.3 中医治法 |
| 2 桥本氏甲状腺炎的现代医学阐述 |
| 2.1 流行病学 |
| 2.2 病因与发病机制 |
| 2.3 治疗方法 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1 病例选择 |
| 1.1 诊断标准 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 病例剔除、脱落及处理 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 试验设计 |
| 2.2 病例数量及来源 |
| 3 治疗方法 |
| 4 观察指标 |
| 4.1 一般性指标 |
| 4.2 疗效性指标 |
| 4.3 安全性指标 |
| 5 疗效评定标准 |
| 5.1 中医证候疗效评定标准 |
| 5.2 疾病疗效评定标准 |
| 5.3 细胞因子指标疗效判定标准 |
| 5.4 安全性指标评估标准 |
| 6 统计学处理方法 |
| 7 临床结果分析 |
| 7.1 病例纳入及完成情况 |
| 7.2 基线比较 |
| 7.3 疗效性指标 |
| 7.4 不良事件及安全性评价 |
| 第三部分 分析与讨论 |
| 1 立论依据 |
| 1.1 病因病机 |
| 1.2 治则治法及对细胞因子IL-6的相关阐述 |
| 2 方药分析 |
| 2.1 方药组成及配伍意义 |
| 2.2 单药药理解析 |
| 3 实验室指标及细胞因子研究 |
| 3.1 实验室诊断依据 |
| 3.2 细胞因子IL-6、TNF- a与HT的关系 |
| 4 研究结果分析 |
| 4.1 年龄、性别、病程分布 |
| 4.2 临床总体疗效分析 |
| 4.3 中医证候改善情况分析 |
| 4.4 对甲状腺激素影响的分析 |
| 4.5 对甲状腺自身抗体影响的分析 |
| 4.6 对IL-6、TNF-a数值影响及相关性分析 |
| 4.7 思考与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附表1 中医证候评分表 |
| 附表2 病例观察表 |
| 主要英文缩写词表 |
| 致谢 |
（8）组蛋白乙酰化和甲基化在自身免疫性甲状腺炎中的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 :自身免疫甲状腺炎患者甲状腺组织中组蛋白修饰水平及调控酶的表达改变 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要试剂及仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.2 研究对象及分组 |
| 2.3 总RNA提取及Real-time PCR |
| 2.3.1 RNA提取 |
| 2.3.2 反转录 |
| 2.3.3 Real-time PCR |
| 2.4 人甲状腺石蜡切片免疫组织化学染色 |
| 2.4.1 甲状腺组织石蜡包埋及切片 |
| 2.4.2 甲状腺组织石蜡切片免疫组化染色 |
| 2.5 组蛋白提取及组蛋白H3整体乙酰化水平测定 |
| 2.5.1 甲状腺组织总体组蛋白提取 |
| 2.5.2 甲状腺组织总体组蛋白BSA定量 |
| 2.5.3 ELISA检测甲状腺组织组蛋白H3 总体乙酰化水平 |
| 2.5.4 ELISA检测甲状腺组织组蛋白H3K4me1、H3K4me3、H3K27me3 水平 |
| 2.6 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 研究对象基本情况 |
| 3.2 甲状腺组织组蛋白乙酰化 |
| 3.2.1 组蛋白去乙酰化酶在HT患者及对照组甲状腺组织中的m RNA表达水平 |
| 3.2.2 HDAC2和HDAC5在HT患者及对照组甲状腺组织中的蛋白表达水平及定位 |
| 3.2.3 P300和CREBBP在 HT患者及对照组甲状腺组织中的表达水平及定位 |
| 3.2.4 HT患者及对照组甲状腺组织中H3ac水平 |
| 3.2.5 组蛋白乙酰化的相关指标与甲状腺功能的相关性分析 |
| 3.3 甲状腺组织组蛋白甲基化 |
| 3.3.1 HT患者及对照组甲状腺组织中KMT2A-D的 m RNA表达水平 |
| 3.3.2 HT患者及对照组甲状腺组织中H3K4me1和H3K4me3 水平 |
| 3.3.3 HT患者及对照组甲状腺组织中JMJD3 表达水平及H3K27me3 水平 |
| 3.3.4 组蛋白甲基化的相关指标与甲状腺功能的相关性分析 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分 :组蛋白修饰在自发性自身免疫性甲状腺炎小鼠模型中的作用研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要试剂及仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.2 研究对象及分组 |
| 2.3 标本收集与处理 |
| 2.4 流式细胞术检测小鼠脾脏T淋巴细胞亚型 |
| 2.4.1 小鼠脾脏细胞单个核细胞制备 |
| 2.4.2 流式细胞术检测T淋巴细胞亚型 |
| 2.5 ELISA检测Tg Ab |
| 2.6 甲状腺冰冻切片HE染色 |
| 2.6.1 甲状腺组织冰冻切片制备 |
| 2.6.2 冰冻切片HE染色 |
| 2.7 总RNA提取及Real-time PCR |
| 2.8 小鼠甲状腺冰冻切片免疫组化染色 |
| 2.9 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 SAT小鼠模型建立评估 |
| 3.2 SAT小鼠甲状腺组织中组蛋白修饰酶的m RNA水平改变 |
| 3.3 PF CBP1和GSK J4 干预对小鼠体重及甲状腺相对重量的影响 |
| 3.4 PF CBP1和GSK J4 干预对小鼠甲状腺组织形态学影响 |
| 3.5 PF CBP1和GSK J4 干预对小鼠血清Tg Ab水平影响 |
| 3.6 PF CBP1和GSK J4 干预对小鼠脾脏Th1和Th17 细胞比例影响 |
| 3.7 PF CBP1和GSK J4 干预对小鼠甲状腺H3K9-14ac和H3K27me3 的水平影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）益气解毒消瘿方调节实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠Th17/Treg免疫失衡的机制研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Absract |
| 引言 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1 实验主要试剂和仪器 |
| 1.1 实验主要试剂 |
| 1.2 实验主要仪器 |
| 1.3 实验药品及来源 |
| 2 实验动物及自身免疫性甲状腺炎大鼠模型的建立 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 自身免疫性甲状腺炎大鼠模型的建立 |
| 2.3 分组 |
| 2.4 给药方法,灌胃剂量 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 酶联免疫吸附(ELISA)测定大鼠血清TGAb、TPOAb水平 |
| 3.2 流式细胞技术检测大鼠脾脏调节T细胞(Treg)和辅助T细胞17 (Th17)比率 |
| 3.2.1 大鼠脾脏PMBC(外周血单个核细胞)分离 |
| 3.2.2 检测大鼠脾脏调节T细胞(Treg)比率 |
| 3.2.3 检测辅助T细胞17 (Th17)比率 |
| 3.3 甲状腺组织形态学检查 |
| 3.3.1 制作腊块 |
| 3.3.2 切片 |
| 3.3.3 HE染色 |
| 3.4 甲状腺组织的免疫组化 |
| 3.5 酶联免疫吸附(ELISA)测定大鼠血清IL-17、IL-6、TGF-β、IL-10细胞因子水平 |
| 3.6 实时定量RT-PCR法检测大鼠甲状腺组织中stat3、RORγt、Foxp3、stat5 mRNA的表达 |
| 4 统计方法统计学处理 |
| 第二章 结果 |
| 1.益气解毒消瘿方对EAT大鼠甲状腺抗体的影响 |
| 2.益气解毒消瘿方改善EAT大鼠的甲状腺病理改变 |
| 3.益气解毒消瘿方调节桥本甲状腺炎大鼠的Th17/Treg失衡 |
| 4.益气解毒消瘿方对EAT鼠的甲状腺RORyt、Foxp3表达的影响 |
| 5.益气解毒消瘿方对EAT鼠血清IL-17、IL-6、TGF-β、IL-10水平的影响 |
| 6.益气解毒消瘿方对EAT鼠mRNA表达的影响 |
| 第三章 讨论 |
| 1.Th17/Treg免疫失衡与桥本氏甲状腺炎的关系 |
| 2、祖国医学对桥本氏甲状腺炎的认识 |
| 2.1 祖国医学对桥本氏甲状腺炎病因病机的认识 |
| 2.2 中医学对桥本氏甲状腺炎的辨证治疗 |
| 3.导师对桥本甲状腺炎的认识及益气解毒消瘿方的提出与运用 |
| 3.1 牟淑敏教授对桥本甲状腺炎的认识 |
| 3.1.1 病因病机的总体认识 |
| 3.1.2 毒邪侵袭是HT发病的重要环节,毒邪贯穿本病始终 |
| 3.2 益气解毒消瘿方的提出与运用 |
| 3.2.1 益气扶正 |
| 3.2.2 清热解毒 |
| 3.2.3 组方及方药分析 |
| 3.2.4 化痰消瘿 |
| 4.探讨益气解毒消瘿方对EAT大鼠免疫调节的机理 |
| 4.1 降低EAT大鼠甲状腺TgAb、TPOAb滴度 |
| 4.2 改善EAT大鼠的甲状腺病理改变 |
| 4.3 调节EAT大鼠的Th17/Treg免疫失衡 |
| 4.4 对EAT大鼠血清IL-17、IL-6、TGF-β、IL-10水平的影响 |
| 4.5 对EAT大鼠甲状腺RORyt、Foxp3,大鼠脾脏组织stat3、stat5mRNA表达的调控 |
| 5.总结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 中医药治疗桥本氏甲状腺炎的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠microRNA表达谱的影响及免疫调节机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词一览表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺组织miRNA表达谱的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验主要试剂 |
| 1.3 实验主要仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 指标检测与方法 |
| 1.6 统计学方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 大鼠一般情况 |
| 2.2 大鼠甲状腺组织病理形态学观察 |
| 2.3 隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺自身抗体浓度的影响 |
| 2.4 隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺功能的影响 |
| 2.5 隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺组织mi RNA表达谱的影响 |
| 2.6 差异表达miRNAs验证 |
| 3.分析与讨论 |
| 3.1 现代医学对桥本甲状腺炎发病机制研究 |
| 3.2 中医对桥本甲状腺炎的病因病机认识 |
| 3.3 穴位选择 |
| 3.4 隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺组织形态、抗体和功能的影响 |
| 3.5 隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺组织mi RNA表达谱的影响 |
| 4.小结 |
| 第二部分 隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠的免疫调节作用 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验主要试剂 |
| 1.3 实验主要仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 观察指标与检测方法 |
| 1.6 统计学方法 |
| 2.实验结果 |
| 2.1 隔药饼灸对EAT大鼠血清IL-6、TNF-α浓度的影响 |
| 2.2 隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺组织免疫细胞因子m RNA表达的影响 |
| 2.3 隔药饼灸对EAT大鼠甲状腺TLR信号通路相关蛋白表达的影响 |
| 3.分析与讨论 |
| 3.1 隔药饼灸对EAT大鼠Th细胞相关免疫细胞因子的调节 |
| 3.2 隔药饼灸对EAT大鼠TLR信号通路相关蛋白的调节 |
| 4.小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录一 文献综述 MicroRNA及其基因多态性在桥本甲状腺炎中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录二 在校期间发表学术论文 |
| 附录三 参与学术会议情况 |
| 附录四 补充材料 |
四、Immune Intervention Effects on the Induction of Experimental Autoimmune Thyroiditis（论文参考文献）
- [1]基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨芪箭消瘿方对AIT大鼠肠道菌群及肠黏膜屏障的影响[D]. 牧亚峰. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [2]中西医协同治疗视神经脊髓炎相关性视神经炎的应用研究[D]. 韩梦雨. 北京中医药大学, 2021(01)
- [3]Notch信号通路调控巨噬细胞极化参与自身免疫性甲状腺炎过程的分子机制研究[D]. 连小月. 中国医科大学, 2021(02)
- [4]隔药灸脐法治疗桥本甲状腺炎的临床研究[D]. 白尹豪. 山东中医药大学, 2020(01)
- [5]基于NIM网络探索清肝健脾理气法治疗桥本氏病临床疗效及机制研究[D]. 黄盛. 北京中医药大学, 2020(04)
- [6]实验性自身免疫性甲状腺炎肝郁脾虚证大鼠模型研究[D]. 刘佳. 辽宁中医药大学, 2020(02)
- [7]疏肝健脾养血法治疗桥本氏甲状腺炎的临床疗效及对IL-6、TNF-α的影响[D]. 丁彧涵. 南京中医药大学, 2020(12)
- [8]组蛋白乙酰化和甲基化在自身免疫性甲状腺炎中的作用研究[D]. 杨雯晴. 中国医科大学, 2020(01)
- [9]益气解毒消瘿方调节实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠Th17/Treg免疫失衡的机制研究[D]. 杨晓娟. 山东中医药大学, 2019(01)
- [10]隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠microRNA表达谱的影响及免疫调节机制研究[D]. 刘雅楠. 上海中医药大学, 2019
标签：甲状腺论文; 对照组论文; 慢性淋巴细胞性甲状腺炎论文; 慢性甲状腺炎论文; 甲状腺球蛋白论文;