论文摘要
目的本研究旨在探究婴儿肠道来源双歧杆菌巨噬细胞RAW264.7分泌IL-10及其相关信号通路激活情况。方法使用婴儿肠道来源双歧杆菌与小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞共培养,以PGN与空白培养基分别作为阳性与阴性对照,共设置4个实验组;第一组共培养24小时后收集细胞上清液与细胞总RNA,通过RT-PCR和ELISA方法测定IL-10的基因表达水平及其分泌量;第二组分别共培养5分钟、1小时、12小时;使用Western Blot的方法分别检测髓样分化因子（MyD88）、细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）、p38蛋白、核转录因子κB（NF-κB）的磷酸化激活程度;第三组分为TLR2受体抑制剂干预与正常培养,以相同的方法与菌株以及对照共培养,30分钟后收集细胞总蛋白,第四组同样分为TLR2受体抑制剂干预与正常培养,24小时后收集细胞上清液、细胞总RNA,使用相同的方法对样品进行检测。结果第一组RT-PCR和ELISA实验结果显示,与阳性对照、阴性对照组相比,婴儿肠道来源双歧杆菌能刺激RAW264.7诱导IL-10的大量分泌（P<0.05）,且IL-10基因转录水平较阴性对照组也有明显的升高（P<0.05）,但阳性对照PGN对IL-10转录水平的提升强于婴儿肠道来源的乳酸双岐（P<0.05）;第二组Western Blot的结果显示,婴儿肠道来源的双歧杆菌能够激活显著地激活由TLR2-MyD88所介导的下游三条通路最主要的通路蛋白ERK1/2、p38以及NF-κB蛋白的表达,p38在早期就有较高的磷酸化水平而其余两者则在1小时达到活化的高峰。第三组RT-PCR与ELISA实验结果显示,加入了TLR2受体抑制剂的组别IL-10不论在基因表达水平上还是蛋白分泌水平上与无抑制剂干预组相比都有明显的降低（P<0.05, P<0.05）;第四组结果表明婴儿肠道来源双歧杆菌对ERK1/2的激活程度明显低于无抑制剂干预组。结论婴儿肠道来源双歧杆菌具有活化巨噬细胞,诱导其大量分泌IL-10的能力,其信号通路的机制主要是对三条由TLR2-MyD88介导的下游通路均有不同程度的激活,从而影响IL-10的分泌。
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文章来源
类型: 国际会议
作者: 罗子豪,梁惠菁,蒋丰岭,沈曦,王茂林,周青青,陈琦伟,张旭光,陈洁华,李鸣,何方
关键词: 双歧杆菌,巨噬细胞,信号通路
来源: 营养研究与临床实践——第十四届全国营养科学大会暨第十一届亚太临床营养大会、第二届全球华人营养科学家大会 2019-09-20
年度: 2019
分类: 基础科学,医药卫生科技
专业: 生物学,基础医学
单位: 四川大学华西公共卫生学院四川大学华西基础医学与法医学院汤臣倍健股份有限公司
分类号: R37
DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.010747
页码: 475-476
总页数: 2
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