导读:本文包含了免疫电镜论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:受体,电镜,免疫,感受器,细胞,电位,香草。
免疫电镜论文文献综述
石佼玉,张志刚[1]（2019）在《免疫胶体金电镜技术在医学研究中的应用》一文中研究指出免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是通过标记的抗体与特定的抗原结合来观察和研究超微结构水平组织细胞形态和功能。根据标记方法的不同,分为免疫铁蛋白技术、免疫酶标技术和免疫胶体金技术,其中应用较多的是胶体金技术。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨,因此利用胶体金标记的二抗,与相应一抗结合,从而将目标抗原标记。免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于医学生物学的各个方面,并取得了长足的进展,为解决一些医学上的微观结构问题提供了很好的帮助。(本文来源于《临床与病理杂志》期刊2019年09期）
汪逵,邓民强,魏文,周晗,李元红[2]（2019）在《脑转移癌患者免疫组化与电镜特征及局部血脑屏障变化的临床意义》一文中研究指出目的探讨脑转移癌患者免疫组化与电镜特征及局部血脑屏障变化的临床意义。方法选取16例脑转移癌患者的标本蜡块,同时随机选取16例同时期接受治疗的脑胶质瘤患者术后标本蜡块作为对照,对其做CD34、FV-Ⅲ、GFAP、S-100、NSE、NF、MBP和SYN染色,观察各标志物在2组中的表达情况。选取同期接受脑肿瘤手术切除的患者新鲜标本,其中,脑胶质瘤2例,脑转移癌4例,对其做电镜观察,了解血脑屏障连接的变化。结果脑转移癌组和脑胶质瘤组中,CD34和FV-Ⅲ均有丰富表达,其阳性数相比较,差异无统计学意义(P> 0. 05),在脑胶质瘤组织中,GFAP、S-100、NSE、NF、MBP和SYN均强烈表达,但是在脑转移癌组中,几乎不表达,提示脑转移癌中没有胶质膜成分,即没有形成血脑屏障的最基本的结构。电镜扫描表明,脑转移癌患者内皮细胞连结松紧不一,纤细疏松,部分间隙扩大,常见空泡变性,基膜不均一且较薄,与胶质瘤相比毛细血管密度略少,毛细血管周围无胶质细胞终足,瘤细胞之间出现淋巴细胞浸润。结论在脑转移癌组织中,构成血脑屏障的基本物质神经胶质膜缺乏,血管内皮连接不紧密,即其组织中无完整的血脑屏障。(本文来源于《实用癌症杂志》期刊2019年05期）
史璐,白书锋,李凌云,冯海玲[3]（2018）在《窖蛋白-1在小鼠不同发育时期成釉细胞中的免疫电镜观察》一文中研究指出目的:观察窖蛋白-1(Caveolin-1)在小鼠不同发育时期成釉细胞中的超微结构定位。方法:取胚胎发育第16.5天、第18.5天和出生第2.0天的C57BL/6小鼠下颌第一磨牙牙胚,HE染色、透射电镜观察不同发育时期成釉细胞的组织学形态及超微结构变化,免疫电镜技术观察Caveolin-1在成釉细胞中的超微结构定位。结果:在各个发育阶段的成釉细胞细胞膜上均可见形态类似于胞膜窖的凹陷状结构,随着成釉细胞逐渐发育成熟,细胞器数量逐渐增多;在不同发育阶段的成釉细胞中均可见Caveolin-1免疫阳性颗粒,在成熟成釉细胞的内质网腔中也可检测到Caveolin-1免疫阳性颗粒。结论:在小鼠下颌第一磨牙牙胚成釉细胞中,Caveolin-1定位于成釉细胞的细胞膜及成熟成釉细胞的内质网中。(本文来源于《郑州大学学报(医学版)》期刊2018年05期）
刘慧敏[4]（2018）在《伪狂犬病毒pUL37、VP16、VP22单抗制备及免疫电镜方法的建立》一文中研究指出伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的可感染多种哺乳动物的急性传染病。猪是PRV的自然宿主,感染可造成怀孕母猪发生流产、死胎、木乃伊胎,新生仔猪急性死亡。PRV属于疱疹病毒科,具有疱疹病毒粒子的典型结构,其中,被膜层是一个复杂的蛋白网络,位于衣壳和囊膜之间。由UL37、UL48、UL49基因分别编码的被膜蛋白pUL37、VP16、VP22在病毒复制及装配中执行着不同的生物学功能,研究这些蛋白的功能对新的抗病毒靶点筛选具有重要意义。然而,对这些蛋白进行检测和定位的方法还没有建立起来。本研究,首先将UL49、UL48、UL37基因分别克隆到真核表达载体pCAGGS,并采用KCl染色切胶法纯化原核表达的蛋白。分别用真核质粒和纯化的蛋白作为抗原,对Balb/c小鼠进行3次免疫。通过细胞融合及单抗特性鉴定试验获得1株稳定分泌VP22蛋白单抗的杂交瘤细胞株3D6;2株稳定分泌VP16蛋白单抗的杂交瘤细胞株1D4、4B6;3株稳定分泌pUL37蛋白单抗的杂交瘤细胞株1E2、2G2、11C3。间接免疫荧光(IFA)和Western-blot试验表明,抗体株均可与相应蛋白特异性结合;经抗体亚类试剂盒鉴定,单抗亚类均为IgMκ;ELISA检测单抗的效价,1D4为1:8000,11C3为1:6000,3D6为1:3000,4B6为1:4000,1E2、2G2为1:32000。测定PRV分离株HLJ-2013的病毒滴度,并将其(0.1 MOI)接种于易感性细胞PK15,16 h后收集细胞并制备免疫标记用超薄切片。将以上实验获得的单克隆抗体进行1:50,1:100,1:200稀释作为一抗,商品化抗鼠金标抗体1:100倍稀释作为二抗,进行感染细胞内伪狂犬病毒VP22、VP16、pUL37蛋白免疫标记和电镜检测。通过对免疫电镜结果的分析,筛选出在亚细胞水平结合特异性强的单克隆抗体株:3D6、1D4、1E2,其最佳稀释比例分别为:1:100、1:100、1:200。综上所述,本研究成功制备出针对PRV被膜蛋白pUL37、VP16、VP22的单克隆抗体,为PRV结构研究提供了生物材料;利用单克隆抗体建立了在PRV感染细胞内pUL37、VP16、VP22蛋白的免疫胶体金标记方法,为这几种蛋白的功能及被膜装配机制的研究提供了技术手段。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2018-06-01）
闻雯[5]（2018）在《人成牙本质样细胞表达叁种温度感觉相关TRPV通道蛋白的免疫电镜研究》一文中研究指出目的牙本质敏感(dentin hypersensitivity,DH)是目前临床上最常见的引起患者不适感的病变之一,它是指暴露的牙本质对外界刺激产生短而尖锐的疼痛,并且不能归因于其它特定原因引起的牙体缺损或者病变。关于牙本质的感觉传导机制目前有3种学说:神经末端传导学说(the neural theory)、牙本质细胞传导学说(odontoblastic transduction theory)以及流体动力学说(hydrodynamic theory),近些年在流体动力学说的基础上发展形成了成牙本质细胞流体动力受体学说(odontoblast hydrodynamic receptor theory)。认为外界刺激到达牙本质以后引起牙本质小管内的液体流动不仅能传导到周围的神经末梢,人成牙本质细胞(human odontoblast cells,HODs)位于牙髓最外层,其突起深入牙本质小管内,表达瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)等离子通道蛋白而扮演感觉受体细胞的角色可以直接感知外界伤害性刺激。TRP家族已经被证实参与人感受外界的各种刺激包括机械刺激、化学刺激、温度、酸和渗透压的过程。瞬时受体电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid-1,TRPV1)是目前TRP家族中研究最为广泛的离子通道蛋白之一,又被叫做辣椒素受体,并已经被证实表达于体外培养的HODs-like细胞中,本课题组前期实验也已经证明瞬时受体电位香草酸受体2(transient receptor potential vanilloid-2,TRPV2)以及瞬时受体电位香草酸受体3(transient receptor potential vanilloid-3,TRPV3)在体外培养的HODs-like细胞的表达,TRPV2和TRPV3作为TRPV1的同源异构体,叁者具有相似的结构,也具有相似的温度感知区间[TRPV1(>43°C)、TRPV2(>52°C)、TRPV3(33-39°C)],但是叁者在HODs-like细胞内亚细胞结构层面上表达分布差异并不清楚。本实验在体外建立HODs-like细胞模型,通过免疫电镜(immunoelectron microscopy,IEM)以及定量IEM分析的方法观察比较研究TRPV1、TRPV2和TRPV3叁种温度感觉相关离子通道蛋白在HODs-like细胞层面及其亚细胞水平上的表达和分布差异,为研究TRP通道在牙齿感觉传导作用机制的研究奠定基础。方法选取本课题组前期参照S.Gronthos的方法体外诱导人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells HDPCs)得到的冻存HODs-like细胞,细胞复苏后,选取第叁代至第四代且生长状态良好的细胞作为实验对象,首先用免疫荧光(immunofluorescence,IF)以及逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法对体外诱导获得的HODs-like细胞进行鉴定,确定ODs内特征性蛋白质,巢蛋白(nestin)以及牙本质涎磷蛋白(Dentin sialophosphoproteins,DSPP)的基因以及蛋白质的表达。一部分细胞进行固定,利用IF的方法从细胞层面检测TRPV1,TRPV2和TRPV3叁种通道蛋白的表达;选取同一批细胞进行裂解,逆转录RNA获取HODs-like细胞的DNA进行RT-PCR检测;另取同一批细胞固定,制取超薄切片进行IEM研究,在透射电镜放大一万倍下比较观察胶体金颗粒标记TRPV1,TRPV2和TRPV3叁种通道蛋白抗原抗体复合物在HODs-like细胞亚细胞结构中的表达,并运用Mayhew提出的基于标记密度(labeling density,LD)与相对标记指数(relative labeling index,RLI)等数据的定量IEM方法,体视学估算以及统计学数据分析这叁种离子通道蛋白在HODs-like细胞内细胞器层面上的分布情况。结果(1)IF结果显示HODs-like细胞为核偏位,单侧长突起的细胞,RT-PCR以及IF结果确定HOD-like细胞表达HODs特征性蛋白质,DSPP以及nestin的基因以及蛋白质,验证体外培养的HODs-like细胞具有HODs特性。同时RT-PCR、IF结果从细胞以及基因的层面确定HODs-like细胞内TRPV1,TRPV2和TRPV3叁种通道基因以及蛋白的表达。(2)IEM结果证明在HODs-like细胞的亚细胞层面,如细胞质、细胞核、内质网(endoplasmic reticulum,ER)、线粒体、细胞突起和初级纤毛等细胞器内观察到胶体金颗粒标记的TRPV1,TRPV2和TRPV3叁种通道蛋白的抗原抗体复合物。(3)定量IEM分析结果显示在亚细胞层面胶体金颗粒标记的TRPV1、TRPV2和TRPV3抗体在初级纤毛、细胞核和细胞质内RLI值均小于1,ER、线粒体和细胞突起内RLI值均大于1,且部分c~2均大于总c~2值的10%,TRPV1、TRPV2和TRPV3通道在HODs-like细胞内线粒体、ER和细胞突起细胞器中优先标记(P<0.001)。结论本实验建立体外培养的HODs-like细胞模型,运用IEM和定量IEM分析方法,证明在HODs-like细胞的亚细胞层面TRPV1、TRPV2和TRPV3叁种通道蛋白在细胞核、细胞质、线粒体、ER、细胞突起和初级纤毛等细胞器中表达且表达存在差异,优先标记于内质网、线粒体以及细胞突起内,为TRPV通道在HODs内功能性研究奠定基础。TRPV1,TRPV2和TRPV3叁种离子通道蛋白在HODs-like细胞突起上明显优先表达,提示HODs-like细胞突起可能在牙齿感知外界刺激的过程中扮演重要角色。(本文来源于《天津医科大学》期刊2018-05-01）
刘慧敏,陈利红,史智宾,刘春国,仇铮[6]（2018）在《伪狂犬病毒被膜蛋白VP22单克隆抗体的制备及免疫电镜方法的建立》一文中研究指出为了制备伪狂犬病毒(PRV)被膜蛋白VP22的单克隆抗体并建立免疫电镜方法,试验首先构建真核重组质粒pCAGGS-UL49,酶切及间接免疫荧光验证该质粒是否构建成功,然后用真核重组质粒以100μg/只的剂量免疫6周龄Balb/c雌性小鼠,经过4次免疫后进行细胞融合,采用间接ELISA法筛选阳性克隆,抗体亚类试剂盒鉴别抗体亚类,收集第5,10,20代次的杂交瘤细胞上清液用ELISA法检测其效价,Western-blot法鉴定其特异性,将该抗体分别稀释50,100,200倍并作为一抗,免疫电镜检测VP22蛋白的表达效果。结果表明:获得1株稳定分泌VP22蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞(3D6),该单克隆抗体的亚类为IgM,能与VP22蛋白发生特异性反应,100倍稀释的单克隆抗体可达到利用免疫电镜技术检测细胞内该蛋白表达的最佳效果。说明筛选得到的PRV被膜蛋白VP22单克隆抗体和建立的免疫电镜方法可用于该病毒的致病性及装配机制研究。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2018年11期）
亢君君,梁卫华,黄晓峰,刘莹莹[7]（2017）在《组织化学染色与免疫电镜双标记方法在检测大鼠脑干前包钦格复合体细胞色素氧化酶活性中的应用》一文中研究指出目的研究脑干前包钦格复合体(pre-B9t C)细胞色素氧化酶(COX)的活性变化。方法采用COX的组织化学染色与pre-B9t C的标记物神经激肽1受体(NK1R)纳米金-银加强免疫组织化学染色双标法,进行pre-B9t C特定神经核团尤其是不同亚细胞结构的COX活性检测,并进行COX活性的半定量分析。结果光镜下NK1R免疫反应性(NK1R-ir)产物主要分布于pre-B9t C神经细胞膜,清晰勾勒神经元轮廓,COX组织化学染色呈棕色,弥漫表达于NK1R-ir神经元胞质及突起内。电镜下NK1R-ir金颗粒主要分布于pre-B9t C神经元胞体和树突膜内表面,胞质内也可见金颗粒标记。pre-B9t C神经元不同亚细胞结构(胞体、轴突终末、树突)线粒体的形状和分布均有不同,在胞体和轴突终末线粒体多为圆形和椭圆形,在树突则以长杆状线粒体多见,胞体线粒体多为管泡状嵴,而板层嵴线粒体以轴突终末和树突多见。轴突终末内线粒体多聚集分布,树突内线粒体多近胞膜散在分布,但在突触部位,线粒体分布密集,且局部膨大接近突触后膜,这与突触的信息传递功能需要大量ATP产生密切相关。COX活性反应产物分布于线粒体嵴上,线粒体嵴电子密度不同表明COX活性不同。轴突终末和树突线粒体COX活性明显高于胞体。结论 pre-B9t C神经元不同亚细胞结构能量代谢不同,其中轴突终末和树突线粒体COX活性明显高于胞体,尤其突触部位线粒体分布密集,且表达高COX活性。将COX组织化学技术和免疫电镜技术相结合,为检测区域性COX活性,尤其是区域内不同亚细胞结构的COX活性提供了新方法。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2017年09期）
于兆衍[8]（2017）在《慢性扁桃体炎细菌感染状态电镜观察及免疫胶体金快速检测细菌技术临床应用的研究》一文中研究指出第一部分电子显微镜观察521例扁桃体炎患者细菌感染状态的研究目的:慢性扁桃体炎是困扰人类的重要疾病之一,它可以引起全身多种并发症。在传统治疗中,抗生素一直被视为药物治疗的主要组成,但仍有众多患者因不能有效控制感染而选择切除扁桃体,为了评估抗生素对扁桃体炎的影响,以及慢性扁桃体炎的细菌感染情况,我们选择在进行规范抗生素治疗无效后行手术治疗的患者的扁桃体样本进行电子显微镜多方面观察,评估常规应用抗生素后扁桃体细菌感染情况,找到一种可靠可行的扁桃体细菌检测手段,同时通过对细菌侵染深度及形成生物膜的程度评估,以求指导临床治疗。方法:纳入标准:扁桃体肥大超过Ⅱ度,并伴有睡眠呼吸暂停(AHI>5)或反复扁桃体发炎。所有患者均接受规范的临床抗生素治疗并停药观察一周无复发,在所有临床急性炎症症状消失,血液分析指标正常的情况下方可手术并收入本研究。排除标准:年龄<3岁或>60岁;病理检查发现肿瘤表现;仍有咽痛、咽部不适症状;口腔及咽腔有急性炎症;自身免疫缺陷患者。取材:常规等离子切除的扁桃体组织,离体扁桃体置于50ml无菌生理盐水中冲洗扁桃体表面,利用液体收集装置将冲洗液收集至50ml离心管内。备用。无菌生理盐水冲洗扁桃体隐窝,收集冲洗液至50ml。冲洗之后迅速于手术台上取扁桃体隐窝上皮组织3*3mm,2块,分别编号1、2号,取1号组织块常规扫描电镜制备,于sigma-300扫描电镜下观察拍照。取2号组织块常规透射电镜制备,JEOL-1200EX透射电镜观察,MORADA-G2记录。记录样本的性别、年龄、各观察部位有无细菌,有无生物膜等,采用spss19.0软件对现有数据进行统计分析,按照观察部位不同将数据分成四组,进行统计比较分析。分析不同性别、年龄患者扁桃体细菌感染及感染部位存在的差异,此处观察细菌感染不区分细菌种类,只计算是否有细菌存在。记录各观察部位组细菌阳性概率,并相互比较。把四种检查均没有检测出细菌的病例作为“无感染者”,将其他病例作为“感染者”,对四种检测部位进行分析。判断灵敏度、假阳性率等。并对四种检测部位进行一致性分析。统计不同情况下四组各自有无细菌的排列组合,并对排列组合得出的结果进行分析。统计方式计数资料采用卡方检验及一致性分析等。结果:形态学结果:透射电镜下观察到扁桃体隐窝内见大量细菌生长,见细菌有生物膜形成,细菌侵袭至上皮细胞内,并在隐窝上皮细胞下也可以见细菌侵入。扫描电镜下见到隐窝表面有细菌生长,散在分布于隐窝上皮表面,并根植于上皮内。周围上皮结构清晰可见。深部冲洗液中可见较多细菌聚集,细菌形态清晰可见,有脱落细胞散在其中。表面冲洗液中见细菌聚集,细菌形态清晰可见,数量较深部冲洗液少,有较多脱落细胞及分泌物或坏死物覆盖其上。透射电镜观察隐窝上皮不同深度,可见扁桃体隐窝至黏膜下层不同深度细菌表现,可见细菌于隐窝处最多,而进入黏膜后便不断减少。细菌侵袭的主要场所在隐窝内及黏膜下层。细菌自隐窝表面至深部逐渐减少,可见隐窝内细菌有生物膜形成。生物膜不仅环绕细菌表面还穿插于细菌之间,作为细菌在隐窝中排布的基质。较少细菌情况下,观察隐窝上皮,当较少的细菌存在下,未见到典型的生物膜形态存在,但当有较多的细菌侵入细胞内,并有大量巨噬细胞出现在隐窝中。扫描电镜下扁桃体外表面表现,扁桃体表面细胞排列紧密,有散在细菌分布其表面,嵌于细胞间。扫描电镜下放大12000倍见单个细菌位于细胞表面。数据结果:四种不同部位及观察方式的表现。四种部位不同细菌表现的排列组合,可见四种部位细菌之间是否存在相互依存的关系。基本数据分析,四种检查区域全部阴性的样本量为36例,细菌感染率为93.09%。其中透射电镜观察扁桃体实质内检出菌率为70.63%,扫描电镜观察扁桃体隐窝上皮表面检出菌率为61.04%,扫描电镜观察隐窝内冲洗液检出菌率为87.52%,扫描电镜观察扁桃体表面冲洗液检出菌率为58.73%。进行两两比较后得知,隐窝内冲洗液的检出率显着高于其他叁项。性别与年龄在不区分细菌种类的情况下,感染细菌率的比较,P>0.05,无统计学差异,年龄与性别对各部位的感染率无明显影响。对四种检测部位进行准确率分析,做“ROC曲线”,从曲线可知扫描深部冲洗液的诊断效果最好。各检查与金标准相比的灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率,四种检测手段的特异度均为100%,而灵敏度依次为扫描电镜观察深部冲洗液>透射电镜观察扁桃体实质>扫描电镜观察扁桃体实质>扫描电镜观察表面冲洗液。四种不同部位检测细菌方式的一致性分析。四种检查诊断细菌感染的结果具有一致性,但一致性不高。经过分析4个部位出现细菌的排列组合,有8种可能性样本为0,分别是D、只有表面冲洗液有菌而扁桃体隐窝或实质内无菌的情况不存在。F、实质与表面有菌,隐窝内无菌的情况不存在。G、只在隐窝表面有菌的情况不存在。J、除深部冲洗液以外均能检测到细菌的情况不存在。L、除实质内以外均能检测到菌的情况不存在。M、实质内和表面有菌,冲洗液无菌的情况不存在。N、冲洗液有菌,实质内或表面无菌的情况不存在。0、表面冲洗液有菌,实质表面有菌,但实质内和深部冲洗液无菌的情况不存在。存在必然联系情况的是1、当隐窝黏膜表面有菌时,深部冲洗液必然有菌,未检测到无菌情况。但是种情况下,透射电镜观察实质及表面冲洗液均有未检出菌的情况发生。2、表面冲洗液发现细菌时,深部冲洗液必然发现细菌,但是深部冲洗液有菌时表面冲洗液未必有菌。3、当深部冲洗液无菌的时候只有透射电镜下实质内有菌存在的情况。其余皆无细菌检出。结论:1、在抗生素经验用药后,即使临床症状消失,扁桃体仍然存在大量细菌生存的情况。2、四种部位在相应电镜下的表现各有特点,深部冲洗液可以有效的反应扁桃体细菌感染的程度。3、生物膜对扁桃体细菌侵袭的程度有重要影响。4、外部细菌感染是扁桃体细菌感染的最重要因素,细菌感染的过程存在由外及内的过程。5、细菌可以只存在于扁桃体上皮细胞内,从而可以躲过大多数常见抗生素的攻击。第二部分60nm免疫胶体金技术检测金黄色葡萄球菌及甲型溶血性链球菌的研究目的:上文我们已经证明深部冲洗可以很好的体现扁桃体细菌感染的情况,那么找寻一种能够更好更快的检测细菌种类且方便可靠的方式就显得尤为重要了。18nm胶体金标记技术已经比较成熟,但是由于体积小不易观察,双抗反应时间长、干扰因素多等问题,临床应用一直不理想,所以我们期望通过新的60nm免疫胶体金一抗标记技术实现临床对扁桃体冲洗液中细菌种类的快速诊断。方法:制备标准菌溶液。我们选取了扁桃体感染最常见的细菌金黄色葡萄球菌及危害最大的细菌甲型溶血性链球菌为实验对象。取BNCC186335,金黄色葡萄球菌,BNCC102663,甲型溶血性链球菌组,分别培养于细菌培养皿中,经培养,达对数生长后,超净工作台下,无菌取菌环取菌适量,共分15组样本,2%PFA溶液中,混匀,固定1小时,每组平均分成6份。制备60nm胶体金抗体溶液。胶体金原液(胶体金,稳定剂为乙二醇)1ml浓度约为40ug/ml,一抗(0.1mg/ml)=100ug/ml。分别取1ml胶体金原液与10ul的一抗反应。置于4°恒温冰箱中摇匀反应12小时,观察无沉淀后备用。18nm与60nm胶体金分别标记标准菌溶液。将标准菌液5000r/min离心,5分钟,去上清。置于BSA溶液中,37℃封闭1小时。然后PBS冲洗5分钟,5000r/min离心,5分钟,重复叁遍,去上清。6份离心沉淀随机分成两组,金黄色葡萄球菌组和甲型溶血性链球菌组,随机编号1、2、3号。将1号置于60nm胶体金结合好的相应抗体溶液中,而2号则放置于无胶体金结合的一抗溶液中,3号样本放入仅含金颗粒的溶液中。37℃孵育1小时,之后PBS冲洗,5000r/min离心,5分钟,去上清,重复叁遍。1、3号扫描电镜组织制备。2号样本,放入BSA溶液中,37℃孵育1小时。PBS冲洗,5000r/min离心,5分钟,去上清,重复叁遍。加入18nm胶体金颗粒结合的二抗溶液中,37℃孵育1小时,PBS冲洗,5000r/min离心,5分钟,去上清,重复叁遍。扫描电镜组织制备。15组样本,6个标准菌沉淀,常规扫描电镜制备,sigma-300扫描电镜下观察拍照。对电镜图片进行观察分析。结果:15组样本,标准菌溶液样本中18nm和60nm两种胶体金溶液标记的细菌中均能见标记现象,而3号样本无抗体结合金颗粒并未特异性的附着于细菌上。标准菌溶液组实验过程自细菌溶液配好至镜下观察到清晰胶体金颗粒止,60nm与18nm胶体金颗粒标记平均耗时分别为6.25±0.15小时和8.23±0.19小时。观察胶体金免疫扫描电镜图片,可以观察到18nm胶体金颗粒在金黄色葡萄球菌及甲型溶血性链球菌中均有标记,呈散在分布,扫描电镜下可见细菌表面有较小亮点。放大倍数在100000倍,电压在10kv方能看清。而60nm胶体金颗粒在两种细菌表面也均有标记,放大50000倍,电压在3kv便清晰可见。结论:1、胶体金颗粒标记技术可以很好的标记金黄色葡萄球菌及甲型溶血性链球菌。2、一抗连接60nm胶体金较18nm胶体金双抗标记可以更清楚更快捷的标记两种细菌。3、60nm胶体金标记电镜技术可以作为诊断细菌感染的可靠稳定的技术。(本文来源于《山东大学》期刊2017-09-07）
张琪,孙异临[9]（2017）在《免疫组化和电镜诊断中枢神经系统疑难肿瘤的研究进展》一文中研究指出社会与时俱进的发展,推动了医疗技术水平的提高。伴随神经外科的迅速发展,中枢神经系统疑难肿瘤的诊断和治疗技术在日益提高。而原发性的中枢神经系统肿瘤的发病率也在逐年增长。诊治水平的提高,促使过往认为治疗疗效差的肿瘤,在当下也可以取得十分良好的治疗效果。本文将了解中枢神经系统疑难肿瘤,对其分类进行简要概述,从而探讨免疫组化和电镜诊断中中枢神经系统疑难肿瘤的发展与应用。(本文来源于《影像研究与医学应用》期刊2017年06期）
王萌,于红丽,张昊,孙滕,张中明[10]（2016）在《免疫金标记电镜技术观察PEDF-R在大鼠心肌细胞超微结构的分布》一文中研究指出目的观察大鼠心肌细胞超微结构中色素上皮衍生因子受体(PEDF-R)的分布。方法健康SD大鼠10只随机均分为实验组和对照组。取大鼠心脏,采用包埋后免疫金标记电镜技术制作心肌切片。实验组切片分别加入一抗(PEDF-R抗体)和胶体金颗粒标记的二抗;对照组切片分别加入未加一抗的抗体孵育液和胶体金颗粒标记的二抗。透射电子显微镜下观察切片中胶体金颗粒的分布。结果实验组胶体金颗粒在大鼠心肌细胞的细胞质、细胞核中散在分布,线粒体中较多,细胞膜处呈间隔分布。对照组大鼠心肌细胞均未见胶体金颗粒。结论 PEDF-R在大鼠心肌细胞广泛分布。(本文来源于《江苏医药》期刊2016年24期）
免疫电镜论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨脑转移癌患者免疫组化与电镜特征及局部血脑屏障变化的临床意义。方法选取16例脑转移癌患者的标本蜡块,同时随机选取16例同时期接受治疗的脑胶质瘤患者术后标本蜡块作为对照,对其做CD34、FV-Ⅲ、GFAP、S-100、NSE、NF、MBP和SYN染色,观察各标志物在2组中的表达情况。选取同期接受脑肿瘤手术切除的患者新鲜标本,其中,脑胶质瘤2例,脑转移癌4例,对其做电镜观察,了解血脑屏障连接的变化。结果脑转移癌组和脑胶质瘤组中,CD34和FV-Ⅲ均有丰富表达,其阳性数相比较,差异无统计学意义(P> 0. 05),在脑胶质瘤组织中,GFAP、S-100、NSE、NF、MBP和SYN均强烈表达,但是在脑转移癌组中,几乎不表达,提示脑转移癌中没有胶质膜成分,即没有形成血脑屏障的最基本的结构。电镜扫描表明,脑转移癌患者内皮细胞连结松紧不一,纤细疏松,部分间隙扩大,常见空泡变性,基膜不均一且较薄,与胶质瘤相比毛细血管密度略少,毛细血管周围无胶质细胞终足,瘤细胞之间出现淋巴细胞浸润。结论在脑转移癌组织中,构成血脑屏障的基本物质神经胶质膜缺乏,血管内皮连接不紧密,即其组织中无完整的血脑屏障。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫电镜论文参考文献
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