噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库的构建

论文摘要

构建T7噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库.首先,从Gene Bank中查找筛选禽流感病毒抗原变异性基因,将其截短、修饰、简并后得到禽流感病毒抗原变异性基因微阵列.其次,将合成的禽流感病毒抗原变异性基因片段文库扩增、酶切,链接到双酶切后的T7噬菌体载体基因上,构成重组噬菌体DNA.最后,重组噬菌体DNA经体外包装和扩增,得到T7噬菌体展示文库,并进行T7噬菌体展示文库滴度、重组率和免疫活性测定.实验结果表明,从Gene Bank中查找、筛选、剪切和修饰共获得96 258条序列构建T7噬菌体展示文库,原始文库滴度为3.6×107个菌落/mL,重组率大于90%.用禽流感病毒H5N1抗体进行捕获,经聚合酶链式反应(PCR)鉴定,得到理想目的条带,证明噬菌体表面展示蛋白具有抗原活性,可用于禽流感病毒感染患者的快速检测及抗原表位筛选.

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 田栢会,易乐,王习文,李颂,付世杰,王雨田,曲晗,李志萍,王丽萍,张淑华,夏志平

关键词: 噬菌体,噬菌体展示,禽流感病毒,抗原变异性基因,文库鉴定

来源: 吉林大学学报(理学版) 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 长春理工大学生命科学技术学院,中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林大学生命科学学院

基金: 国家重点研发计划项目(批准号:2016YFC1201602),吉林省教育厅科技发展计划项目(批准号:JJKH20181143KJ)

分类号: R373.13

DOI: 10.13413/j.cnki.jdxblxb.2018460

页码: 989-996

总页数: 8

文件大小: 3576K

下载量: 133

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