导读:本文包含了毛细管等电聚焦论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:毛细管,电泳,电荷,异质,蛋白,梯度,荧光。
毛细管等电聚焦论文文献综述
刘让东,许歆瑶,王薇薇,王彦,闫超[1]（2019）在《固化pH梯度毛细管等电聚焦整体柱的制备及在蛋白质等电点分析中的应用》一文中研究指出通过聚合物原位聚合反应,制备了部分填充的毛细管整体柱。pH 3～10的载体两性电解质被固化在该毛细管整体柱上。在引入八通进样阀、叁通阀和四通连接单元的基础上,构建了适用于固化pH梯度毛细管等电聚焦整体柱(M-IPG)的平台。在蛋白质药物测定过程中,用M-IPG柱和羟丙基纤维素(HPC)涂层毛细管柱同时对曲托珠单抗和依那西谱的等电点进行了测定。结果表明,两种等电聚焦柱都能够同时分离混合蛋白质样品并测定蛋白质类药物中单抗和融合蛋白质的等电点(pI), M-IPG柱所测的pI值与HPC涂层毛细管柱测定的结果基本一致,表明了该柱在进一步构建多维分离平台进行蛋白质组学研究方面的潜力。(本文来源于《色谱》期刊2019年10期）
武刚,于传飞,王文波,李萌,王兰[2]（2019）在《成像毛细管等电聚焦电泳分析单克隆抗体电荷异质性的方法学验证及系统适用性对照品的制备》一文中研究指出目的:采用成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary electrofocusing electrophoresis,iCIEF)分析单抗的电荷异质性,组织国内多家质控实验室对该方法进行验证;制备用于iCIEF法的系统适用性对照品。方法:邀请19个质控实验室,应用3种品牌(4种型号)的iCIEF设备进行方法学的预验证,确定该方法的关键试剂、仪器参数设置、数据分析要点等;依据ICH_Q2_R1指导原则、2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)通则9101制定方法学验证方案,邀请11个质控实验室参加验证;制备基于iCIEF法的系统适用性对照品并利用SEC-HPLC、IEC-HPLC、非还原CE-SDS进行稳定性评价。结果:预验证结果显示:等电点标记物(pI Marker)为关键试剂;不同品牌、型号的iCIEF检测设备参数设置无需统一;数据处理可采用自动积分、手动积分相结合的形式。验证结果:完成了该方法的特异性、准确度、精密度、线性及其范围、耐用性、定量下限的评价;制备了iCIEF法的系统适用性对照品,并进行了加速及长期稳定性评价,制定了相应的合格标准。结论:首次组织了iCIEF的方法学验证,为《中国药典》标准提高提供方法学验证依据,为该方法制备了系统适用性对照品。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2019年01期）
武刚,于传飞,王文波,王兰[3]（2018）在《成像毛细管等电聚焦电泳测定单抗等电点的若干影响因素》一文中研究指出目的:评价尿素、聚焦时间、pI标记物3个因素对成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)测定抗HER2单抗、抗VEGF单抗主峰等电点结果的影响。方法:应用iCIEF技术,通过添加尿素(2 mol·L~(-1)),改变聚焦时间(6、8、10 min)和pI标记物的数量(2个/6个),对2种单抗制品主峰等电点进行测定。结果:抗HER2单抗使用6个pI标记物,添加终浓度2 mol·L~(-1)的尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为9.01±0.00、9.02±0.01、9.06±0.01;使用6个pI标记物,不添加尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为9.07±0.01、9.08±0.01、9.09±0.01;使用2个pI标记物,主峰等电点范围为9.00～9.14(含尿素)、9.04～9.17(不含尿素)。抗VEGF单抗使用6个pI标记物,添加终浓度2 mol·L~(-1)的尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为8.32±0.00、8.35±0.00、8.35±0.07;使用6个pI标记物,不添加尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为8.39±0.01、8.39±0.02、8.41±0.01;使用2个pI标记物,主峰等电点范围为8.26～8.48(含尿素)、8.34～8.49(不含尿素)。结论:使用iCIEF评价所选单抗等电点时,尿素、聚焦时间两因素对等电点的计算结果影响较小,pI标记物的选择对等电点的计算结果影响明显。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2018年10期）
李响,于雷,郭莹,周勇,饶春明[4]（2018）在《全柱成像毛细管等电聚焦电泳法评价IL-15融和蛋白的电荷异质性》一文中研究指出目的:建立全柱成像毛细管等电聚焦电泳(capillary isoelectric focusing-whole column imaging detection,c IEF-WCID)方法评价白细胞介素-15(IL-15)融和蛋白的电荷异质性。方法:通过比较5种不同的两性电解质,以及不同尿素浓度(0,3,6和8 mol·L-1)对实验结果的影响,优化建立了IL-15融和蛋白的全柱成像毛细管等电聚焦电泳方法。具体方法为采用3 mol·L-1尿素、0.35%甲基纤维素、4%两性电解质混合溶液作为样品缓冲液,聚焦电压为3 k V,预聚焦时间1 min,聚焦时间7 min。结果:利用新建方法测定了IL-15融和蛋白的等电点范围为6.00～6.71,分离检测到12个异构体,重复性实验中各异构体的峰面积百分比RSD为0.7%～7.4%,等电点RSD为0.0%～0.1%;稳定性实验中各异构体峰面积百分比的RSD为1.5%～10.5%,等电点RSD为0.0%～0.3%;3个不同批次IL-15融和蛋白的各异构体峰面积百分比和等电点基本一致。去N-糖基化及去唾液酸化实验结果表明,IL-15融和蛋白的电荷异构体主要是由N-糖基化不同产生,而酸性端异构体是由于唾液酸化程度不同产生的。结论:研究建立的全柱成像毛细管等电聚焦电泳方法可以有效分离IL-15融和蛋白的12种异构体,糖基化尤其是唾液酸化是引起电荷异质性的主要原因,新建方法对IL-15融和蛋白的质量控制有重要意义。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2018年19期）
刘振东,韩国华,杨勇,王庆民[5]（2018）在《全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgG VEGFR:Fc-融合蛋白电荷异质性》一文中研究指出目的:建立全柱成像毛细管等电聚焦法(iCIEF)分析重组人IgG VEGFR:Fc-融合蛋白(血管内皮生长因子受体-抗体Fc融合蛋白)的电荷异质性。方法:首先对全柱成像毛细管等电聚焦方法在蛋白浓度、助溶剂、两性电解质、聚焦时间等方面进行了条件优化。并应用优化的方法进行Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点检测及重复性验证,并将结果与毛细管等电聚焦(cIEF)及平板胶等电聚焦(IEF)结果进行对比分析。结果:在优化的实验条件下,分析Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点具有良好的分离度和重复性,分离效果明显好于cIEF和IEF,且主成分的pI重复测定RSD均小于0.5%。结论:iCIEF作为一种新的技术手段,用于重组蛋白类药物电荷异质性及等电点分析,方法快速、准确,重复性好,能够较好地检测高度糖基化的重组VEGFR:Fc-融合蛋白产品的电荷异质性,为保障Fc-融合蛋白类产品生产工艺的稳定性及质量控制提供了一种快速、可靠的分析方法。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2018年03期）
刘振东,韩国华,杨勇,王庆民[6]（2017）在《全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgG Fc-融合蛋白电荷异质性》一文中研究指出目的:建立全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)法分析重组人IgG Fc-融合蛋白的电荷异质性。方法:首先对全柱成像毛细管等电聚焦方法在蛋白浓度、助溶剂、两性电解质、聚焦时间等方面进行了条件优化。并应用优化的方法进行Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点检测及重复性验证,并将结果与毛细管等电聚焦(cIEF)及平板胶等电聚焦(IEF)结果进行对比分析。结果:在优化的实验条件下,分析Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点具有良好的分离度和重复性,分离效果明显好于cIEF和IEF,且主成分的pI重复测定RSD均小于0.5%。结论:iCIEF作为一种新的技术手段用于重组蛋白类药物电荷异质性及等电点分析,方法快速、准确、重复性好,能够较好地检测高度糖基化的重组Fc-融合蛋白产品的电荷异质性,为保障Fc-融合蛋白类产品生产工艺的稳定性及质量控制提供了一种快速、可靠的分析方法。(本文来源于《第五届生物技术药物理化特性分析与质量研究技术研讨会资料汇编》期刊2017-07-18）
刘莉丹[7]（2015）在《毛细管等电聚焦分析蛋白质的方法研究》一文中研究指出等电点(Isoelectric point,pI)是蛋白质、多肽、微生物、细胞及细胞器等两性生物微粒的重要理化参数之一。毛细管等电聚焦(Capillary isoelectric focusing,cIEF)是基于毛细管电泳技术测定两性物质等电点的方法。利用cIEF不仅可以表征不同等电点的蛋白质和多肽,实现对样品各组分的分离检测,还可研究分子间的相互作用。激光诱导荧光检测是高灵敏检测技术,检出限低、检测时间短、样品用量少、可实现在线检测。毛细管等电聚焦结合激光诱导荧光检测具有高效、快速、高灵敏的优势。本论文主要包括以下工作:(1)比较了毛细管等电聚焦电泳一步法和两步法,并通过对样品溶液组成、进样量、聚焦电压、电极液pH等实验参数进行优化,改进了毛细管等电聚焦电泳一步法。结果表明改进后的一步法分离速度快、聚焦完全、步骤简单、适应性广。(2)将毛细管等电聚焦电泳一步法应用于多种融合蛋白的分析检测。结果表明方法的分离度、线性关系令人满意,实验测定的等电点值与蛋白的生产厂家估测的理论值基本一致。表明该方法可用于实际样品中蛋白质的分离纯化、质量控制、稳定性评价以及等电点测定。(3)将cIEF-LIF和毛细管区带电泳(CZE-LIF)方法用于绿色荧光蛋白的分析,优化了分离电压、缓冲液pH、电极液pH等实验参数,为进一步研究绿色荧光蛋白(以及其他荧光蛋白)与核酸的相互作用,以及筛选荧光蛋白的核酸适配体奠定了实验基础。(本文来源于《北京理工大学》期刊2015-06-01）
王丽,周勇,王军志[8]（2014）在《成像毛细管等电聚焦技术分析重组人促红素异质性》一文中研究指出目的:应用成像毛细管等电聚焦分析重组人促红素(rhEPO)的异构体和等电点。方法:首先对成像毛细管等电聚焦电泳技术进行了条件优化,并用优化的方法分析了rhEPO候选国家理化标准品和来自不同生产企业的10批rhEPO产品。根据成像毛细管等电聚焦电泳分析结果和体内生物学活性结果进一步分析了rhEPO糖链异构体与体内比活性的相关性。结果:优化的成像毛细管等电聚焦电泳技术可获得蛋白特异性图谱,可较好地分析重组人促红素的异构体和等电点。通过统计分析表明,成像毛细管等电聚焦电泳分析rhEPO的第2、3和4峰含量和体内生物学比活性之间存在正相关,第1和第6峰含量和体内比活性之间存在负相关。结论:成像毛细管等电聚焦技术能够分析重组人促红素的异构体和等电点,相关性分析显示异构体的组成与体内比活性相关,异质性分析在重组人促红素的质量控制中具有重要意义。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2014年06期）
刘洁欣,方均建,王心正,李海静,程建华[9]（2014）在《全柱成像毛细管等电聚焦电泳测定艾塞那肽等电点》一文中研究指出目的:采用新一代全柱成像毛细管等电聚焦电泳技术(CIEF-WCID)测定艾塞那肽等电点。方法:采用互补性金属氧化物半导体成像技术对样品等电聚焦过程进行实时记录,根据适宜的marker计算得到艾塞那肽的等电点,并对方法的准确度与重复性进行考察。结果:测得艾塞那肽等电点为5.46,与凝胶电泳结果基本一致,相对标准偏差为0.11%。CIEF-WCID方法快速准确,相对误差小于2.5%,重复性良好。结论:CIEF-WCID作为一种新的技术手段可用于艾塞那肽等电点的分析,方法快速、准确、重复性好,可为多肽的质量控制提供一种可靠的分析方法。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2014年03期）
李伟华[10]（2014）在《间隙式毛细管蛋白质等电聚焦预分级装置的构建和应用》一文中研究指出蛋白质组结构复杂、种类繁多、含量动态范围宽。发展蛋白质预分级手段,可以降低蛋白质样品的复杂性,对于发展高灵敏度和高分离效率的检测手段有重要意义。基于固定化pH梯度毛细管等电聚焦整体(M-IPG-CIEF)柱构建的新型的间隙式毛细管蛋白质等电聚焦预分级装置,可对蛋白质样品进行预分级,促进分离。为构建该预分级装置,首先采用“原位聚合-聚焦一步法”合成了固定化pH梯度毛细管等电聚焦整体(M-IPG-CIEF)柱。以标准蛋白的混合物为样品对该柱的分离能力、线性和影响线性因素进行探讨。当流速为10μL/min时,蛋白质出峰时间和其等电点(pI)间线性关系良好,R2>0.997。将具有不同pH梯度范围的M-IPG-CIEF柱通过聚四氟乙烯管串联,构建间隙式毛细管蛋白质等电聚焦预分级装置。以标准蛋白质混合物为样品对该预分级系统的原理、分离能力和线性进行阐述和验证。结果表明,该柱保留了原M-IPG柱的聚焦能力和分离能力,通过控制等电聚焦材料的pH范围使目标蛋白保留在分离腔内。采用该分级装置,进行高丰度蛋白质的去除和低丰度蛋白质的富集的研究。通过将高浓度蛋白聚焦于分离腔内去除了卵清蛋白,清除率达77%。利用该预分级装置富集牛奶蛋白中的低丰度组分(pI4.7-5.1),有效促进检测灵敏度。将该预分级装置与μ-RPLC(C8填充柱)和聚丙烯酰胺涂层毛细管(CZE)柱串联,构建了CIEF-μ-RPLC和CIEF-CZE系统,并用于牛奶及牛奶胰蛋白酶酶解产物的分离分析。部分在CIEF中不能分开的蛋白质或多肽在串联系统中达到基线分离,证实串联系统分离能力较高,峰容量较大。(本文来源于《华东理工大学》期刊2014-04-19）
毛细管等电聚焦论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:采用成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary electrofocusing electrophoresis,iCIEF)分析单抗的电荷异质性,组织国内多家质控实验室对该方法进行验证;制备用于iCIEF法的系统适用性对照品。方法:邀请19个质控实验室,应用3种品牌(4种型号)的iCIEF设备进行方法学的预验证,确定该方法的关键试剂、仪器参数设置、数据分析要点等;依据ICH_Q2_R1指导原则、2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)通则9101制定方法学验证方案,邀请11个质控实验室参加验证;制备基于iCIEF法的系统适用性对照品并利用SEC-HPLC、IEC-HPLC、非还原CE-SDS进行稳定性评价。结果:预验证结果显示:等电点标记物(pI Marker)为关键试剂;不同品牌、型号的iCIEF检测设备参数设置无需统一;数据处理可采用自动积分、手动积分相结合的形式。验证结果:完成了该方法的特异性、准确度、精密度、线性及其范围、耐用性、定量下限的评价;制备了iCIEF法的系统适用性对照品,并进行了加速及长期稳定性评价,制定了相应的合格标准。结论:首次组织了iCIEF的方法学验证,为《中国药典》标准提高提供方法学验证依据,为该方法制备了系统适用性对照品。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
毛细管等电聚焦论文参考文献
[1].刘让东,许歆瑶,王薇薇,王彦,闫超.固化pH梯度毛细管等电聚焦整体柱的制备及在蛋白质等电点分析中的应用[J].色谱.2019
[2].武刚,于传飞,王文波,李萌,王兰.成像毛细管等电聚焦电泳分析单克隆抗体电荷异质性的方法学验证及系统适用性对照品的制备[J].药物分析杂志.2019
[3].武刚,于传飞,王文波,王兰.成像毛细管等电聚焦电泳测定单抗等电点的若干影响因素[J].药物分析杂志.2018
[4].李响,于雷,郭莹,周勇,饶春明.全柱成像毛细管等电聚焦电泳法评价IL-15融和蛋白的电荷异质性[J].中国新药杂志.2018
[5].刘振东,韩国华,杨勇,王庆民.全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgGVEGFR:Fc-融合蛋白电荷异质性[J].药物分析杂志.2018
[6].刘振东,韩国华,杨勇,王庆民.全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgGFc-融合蛋白电荷异质性[C].第五届生物技术药物理化特性分析与质量研究技术研讨会资料汇编.2017
[7].刘莉丹.毛细管等电聚焦分析蛋白质的方法研究[D].北京理工大学.2015
[8].王丽,周勇,王军志.成像毛细管等电聚焦技术分析重组人促红素异质性[J].药物分析杂志.2014
[9].刘洁欣,方均建,王心正,李海静,程建华.全柱成像毛细管等电聚焦电泳测定艾塞那肽等电点[J].生物技术通讯.2014
[10].李伟华.间隙式毛细管蛋白质等电聚焦预分级装置的构建和应用[D].华东理工大学.2014
论文知识图
