导读:本文包含了脂质体转染论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:转染,细胞,脂质体,阳离子,细胞系,病毒,效率。
脂质体转染论文文献综述
白圣凯,野庆松,张芳婷,盖厦梦,李文娜[1]（2019）在《脂质体介导基因编辑载体质粒转染条件的优化》一文中研究指出[目的]探讨脂质体介导基因编辑载体质粒转染人食管癌Eca-109细胞的最佳条件。[方法]以基于Cre/Lox P系统的p GT-A1B1和基于CRISPR/Cas9系统的p X458-sgRNA8两种基因编辑载体质粒为实验材料,将环状和线性质粒以不同DNA用量(0. 2、0. 4、0. 6和0. 8μg)和不同DNA与脂质体比例(1∶1、1∶1. 5、1∶2、1∶2. 5和1∶3)转染Eca-109细胞,计算转染效率。[结果]不同DNA用量条件下,p GT-A1B1在0. 4μg和0. 6μg时转染效率较高,p X458-sgRNA8在0. 6μg时转染效率较高,与其它DNA用量比较均有显着性差异(P <0. 05)。不同DNA与脂质体比例条件下,p GT-A1B1在比例为1∶1. 5和1∶2时转染效率较高,p X458-sgRNA8在比例为1∶2. 5时转染效率较高,与其它比例比较均有显着性差异(P <0. 05)。同一种质粒的环状和线性结构形态,在DNA用量或DNA与脂质体比例相同时,转染效率差异不显着(P> 0. 05)。[结论]建立了脂质体介导基因编辑载体质粒转染Eca-109细胞的最佳转染条件,质粒p GT-A1B1和p X458-sgRNA8的DNA用量分别为0. 4～0. 6μg和0. 6μg,DNA与脂质体比例分别为1∶1. 5～1∶2和1∶2. 5。(本文来源于《生物技术》期刊2019年03期）
何芳丽,程健琳,李俐娟,李亚林,苏泽红[2]（2019）在《氨基酸类阳离子脂质体在基因转染中的应用》一文中研究指出通过化工程序合成阳离子脂质TMA-C2-Glu-C12,经双蒸水超声分散后制得相应的氨基酸类阳离子脂质体,实验共合成了八种氨基酸类阳离子脂质,经过二次整流后分散成对应的质体。实验结果表明,在HBL100、HT1080和GC-1细胞系中,TMA-C2-Glu-C12的转染效率与Lipofectamine 2000相当,在HEK293、Ges-1、Huvce、HeLa和SW480细胞系中进行结果对比,实验表明TMA-C2-Glu-C12的细胞毒性不强,是一种高效的基因转载体。(本文来源于《化工设计通讯》期刊2019年05期）
朱伦井,贝朝涌,段江涛,彭称飞,马跃刚[3]（2019）在《脂质体和慢病毒介导P75神经生长因子受体及神经生长因子转染骨髓间充质干细胞的效果比较》一文中研究指出背景:P75神经生长因子受体(P75 neurotrophin receptor,P75~(NTR))在不同细胞中可以介导截然不同的信号通路,但是在骨髓间充质干细胞中所传导的调节作用还尚未研究;脂质体和慢病毒介导单基因转染细胞技术已趋向成熟,但是其介导双基因转染的差异比较还未见报道。目的:构建大鼠P75~(NTR)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的过表达质粒及慢病毒载体,比较脂质体和慢病毒介导2种基因转染骨髓间充质干细胞的效果和实用性,以便于今后根据不同实验要求选择实验最优方案。方法:设计大鼠P75~(NTR)及NGF的基因引物,提取基因组DNA进行PCR扩增、与质粒载体重组构建表达增强绿色荧光的GV358-P75~(NTR)、表达增强红色荧光的GV492-NGF过表达质粒,转染293T细胞,加入慢病毒载体超速离心,收集目的基因过表达慢病毒,测定病毒样品滴度;选取体外培养的大鼠原代骨髓间充质干细胞,一组用脂质体Lipo3000共转染质粒GV358-P75~(NTR)、GV492-NGF,另一组用慢病毒共感染,同时设置阴性对照组和空白对照组,对转染后的骨髓间充质干细胞常规培养,第3,5,7,9,12天用荧光显微镜观察红绿荧光的表达,Westernblot检测P75~(NTR)及NGF蛋白表达,对转染后培养至7d的骨髓间充质干细胞进行消化传代培养,培养第3,5,7,9,12天用荧光显微镜观察红绿荧光的表达以及Western blot检测P75~(NTR)、NGF蛋白的表达。结果与结论:①构建的GV358-P75~(NTR)、GV492-NGF过表达质粒及慢病毒符合实验设计;②显微镜视野中红绿色荧光的丰度:脂质体共转染组先增加后降低,慢病毒共感染组持续增多;各时间点慢病毒组均多于脂质体组;脂质体转染组传代培养细胞的荧光表达相比于未传代前降低,而慢病毒转染组未见明显变化;③各时间点慢病毒感染组的P75~(NTR)及NGF蛋白表达量明显高于脂质体组,目的基因转染组的P75~(NTR)及NGF蛋白表达量均高于阴性对照组及空白对照组,差异有显着性意义(P<0.05);④P75~(NTR)、NGF双基因均能通过脂质体和慢病毒共转染方法在大鼠骨髓间充质干细胞中过表达;脂质体双基因转染操作相对简便,实验设备依赖性低,费用相对低廉,但感染效率明显低于慢病毒,而慢病毒双基因共感染后目的基因存在着持续表达,传代后基因丢失现象不明显。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年21期）
柴百惠,绳秀珍,唐小千,邢婧,战文斌[4]（2018）在《脂质体介导转染犬肾上皮细胞的方法改进与优化》一文中研究指出本文使用带绿色荧光蛋白报告基因的真核质粒pCI-neo-EGFP作为外源DNA,将脂质体介导转染犬肾上皮细胞(MDCK)的常规转染法改进为悬浮法,并比较了二者在转染36h后的转染效果,结果显示悬浮法的转染效率显着优于常规法。研究了悬浮转染法不同DNA用量、脂质体/DNA比例和悬浮孵育时间对转染效率和细胞活力的影响。流式细胞术检测结果显示,转染效率与DNA用量呈正相关依赖关系;在DNA用量相同时,转染效率随着脂质体/DNA比例升高呈先上升后下降的趋势;DNA用量为1μg、脂质体/DNA比例为4∶1、悬浮孵育时间为20 min时转染效率最高(21.07%±0.76%)。利用CCK-8细胞毒性试剂盒测定不同条件下的细胞活力,结果表明细胞活力随DNA用量和脂质体/DNA比例的升高及悬浮孵育时间的延长而降低,当DNA用量(0.25μg)和脂质体/DNA比例(2∶1)最低、悬浮孵育20min时,细胞活力最高(95.67%±3.72%),而转染效率最高时细胞活力为69.95%±3.01%。研究结果为进一步建立稳定转染细胞研究模型提供了基础资料。(本文来源于《中国海洋大学学报(自然科学版)》期刊2018年S2期）
翁炳焕,徐威,苏岚,沈敏,李蓉[5]（2018）在《脂质体介导SV40LT基因转染构建羊水染色体核型分析质控细胞系研究》一文中研究指出目的:研究羊水染色体核型分析质控细胞系的构建方法。方法:以T4DNA连接经BamHⅠ单酶切的SV40LTag-pcDNA和pcDNA3.1 (-) DNA,重组SV40LTag-pcDNA3.1(-)克隆,以脂质体介导法将重组克隆转染至染色体结构异常的羊水细胞,以G418筛选阳性克隆,观察细胞系的传代生长特性及其作为染色体核型分析质量评估的可行性。结果:构建了染色体核型为46,XY,t(8; 19)(q24.3;q13.1)的羊水细胞系,传至第15代的细胞系经染色体核型分析,其核型与原代细胞一致。结论:染色体结构异常的羊水细胞转染SV40LT基因后可转化为无限扩增且染色体核型稳定的细胞系,从而制成羊水细胞染色体核型分析的质控细胞系。(本文来源于《浙江大学学报(医学版)》期刊2018年05期）
张怡,潘敏,邓志婷,李文娟,方义杰[6]（2018）在《聚焦超声介导阳离子脂质体携带HSV-TK增强基因转染及联合更昔洛韦对大鼠胶质瘤C6细胞的影响》一文中研究指出目的探讨聚焦超声对载单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)基因阳离子脂质体体外基因转染的影响,及其联合更昔洛韦(ganciclovir,GCV)对大鼠脑胶质瘤C6细胞的影响。方法制备含HSV-TK基因质粒,利用阳离子脂质体转染至对数期大鼠胶质瘤C6细胞,并随机分为脂质体组和超声1、2、3、4min组,脂质体组加入含9μg阳离子脂质体-HSV-TK基因质粒的100μL培养液;超声1、2、3、4min组在脂质体组基础上分别给予体外超声(1 MHz,功率3W/cm2,电压150mvPP)辐照1、2、3、4min。5组C6细胞均于37℃、体积分数5%CO2培养箱,含体积分数10%胎牛血清的高糖DMEM完全培养液,继续培养48h。转染48h后,荧光显微镜下观察载HSV-TK基因阳离子脂质体转染效率。将对数生长期C6细胞接种于96孔板,依据转染效率实验结果分为GCV组、超声3min+GCV组,超声3 min+GCV组加入9μg阳离子脂质体-HSV-TK基因质粒的100μL培养液,并超声辐照3min,GCV组转染空白阳离子脂质体;转染24h后,2组均分别加入0.1、1、10、50、100、1 000mg/L GCV作用48h,采用分光光度法检测C6细胞存活率。结果转染48h后,超声1、2、3、4min组C6细胞HSV-TK基因转染效率[(0.14±0.07)%、(1.39±0.11)%、(19.61±4.80)%、(18.81±7.92)%]均高于脂质体组[(0.05±0.01)%](P<0.05),且超声3、4min组转染效率高于超声1、2min组,超声2 min组转染效率高于超声1 min组(P<0.05),超声3 min组与超声4min组转染效率比较差异无统计学意义(P>0.05);随GCV浓度增加,GCV组和超声3min+GCV组C6细胞存活率均逐渐降低;GCV为50、100、1 000mg/L时,超声3min+GCV组C6细胞存活率[(85.88±1.80)%、(75.51±1.43)%、(68.17±5.26)%]均低于GCV组[(95.40±0.85)%、(92.62±4.50)%、(83.66±0.98)%](P<0.05);GCV为0.1、1、10mg/L时,超声3min+GCV组C6细胞存活率[(99.32±3.01)%、(97.01±1.53)%、(94.50±1.15)%]与GCV组[(99.56±5.14)%、(98.60±5.18)%、(97.39±8.06)%]比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论聚焦超声体外辐照可明显提高载HSV-TK基因阳离子脂质体转染效率,增强GCV的抗胶质瘤作用。(本文来源于《中华实用诊断与治疗杂志》期刊2018年05期）
夏盛源,王远航,朱蔚云,张岚[7]（2018）在《人支气管上皮细胞16HBE和其经硫化镍、反式-BPDE诱导的恶性转化细胞对脂质体转染效率的差异性比较》一文中研究指出目的:通过脂质体法转染不同荧光蛋白质粒到多种接种密度细胞的效率差异探讨恶性转化细胞的癌变过程。方法:以16HBE、结晶型NiS诱导的16HBE恶性转化细胞和反式-BPDE诱导的16HBE恶性转化细胞为实验对象,采用不同的细胞接种密度,用脂质体法对它们分别转染两种不同的表达荧光蛋白的质粒,通过荧光显微镜观察细胞的转染情况。结果:无论转染eGFP质粒还是GFP-LC3质粒,在多种细胞密度下,正常细胞16HBE都比恶性转化细胞的转染效率低。结论:恶性转化细胞在癌变过程中可能发生了细胞膜通透性的改变。(本文来源于《激光生物学报》期刊2018年02期）
周明,李浩,王子建,李登科,全正扬[8]（2018）在《常规脂质体介导shRNA转染建立CYP2E1表达沉默的人肝实质细胞模型》一文中研究指出目的:利用常规脂质体介导转染shRNA(short hairpin RNA)建立CYP2E1(cytochrome P450 2E1)表达沉默的人肝实质细胞模型。方法:采用文献报道的CYP2E1的高效干扰位点,构建CYP2E1的shRNA干扰载体(sh CYP2E1)以及同源无干扰作用的对照载体(sh NC,non-specific control),并通过阳离子脂质体Lipo Fiter TM介导转染人肝实质L02细胞,通过绿色荧光蛋白报告基因的表达指示及G418筛选阳性克隆,q RT-PCR(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction)测定稳定转染细胞系中CYP2E1的表达情况。结果:确定转染后G418最佳筛选浓度为400μg/m L,维持浓度为200μg/m L;获得了荧光表达率较高的L02-CYP2E1细胞(CYP2E1沉默组)和L02-NC细胞(转染对照组);q RT-PCR结果显示,所建细胞系L02-CYP2E1相对于L02-NC,其CYP2E1表达下调了近70%(P<0.05),表明CYP2E1干扰表达细胞模型构建成功。结论:利用常规脂质体转染法成功转染人肝实质L02细胞CYP2E1shRNA,建立了CYP2E1表达沉默的细胞系。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2018年01期）
吴婷,吴江,金书欣,席晔斌,钮晓音[9]（2018）在《阳离子脂质体Lipofectamine 3000对贴壁细胞、悬浮细胞和原代细胞转染效率比较的研究》一文中研究指出为了比较阳离子脂质体Lipofectamine 3000(Lipo3000)在不同细胞类型中的转染效率,课题组分别在贴壁细胞NIH3T3、悬浮细胞EL4和原代细胞CD4+T细胞中,利用Lipo3000将不同浓度的miRNA mimics转染至细胞内,通过流式细胞术检测的方法,比较不同细胞之间以及同一细胞、不同浓度的miRNA mimics组之间转染效率的差异。结果显示,在NIH3T3细胞中,miRNA mimics为100nmol/L时,转染效率最高,可达(41.47±8.10)%;而在EL4和CD4+T细胞中,随着miRNA mimics浓度的增加,转染效率呈上升的趋势,最高分别可达(12.13±1.16)%和(3.80±0.60)%。可见,Lipo3000在贴壁细胞和悬浮细胞的转染效率明显高于原代细胞。(本文来源于《现代免疫学》期刊2018年02期）
张妍乐,顾玲[10]（2018）在《电穿孔与脂质体转染法对悬浮与贴壁细胞转染效率的影响》一文中研究指出目的比较电穿孔与脂质体转染法对悬浮细胞株K562与贴壁细胞株Hep G2转染率的检测效果。方法选取人髓系白血病细胞株K562及人肝癌细胞株Hep G2进行研究,分别应用电穿孔与脂质体转染法进行绿色荧光质粒(p EGFP-C1)基因转染,采用荧光显微镜对PEGFP-C1转染情况进行观察,并对不同方法的转染率及细胞转染后存活率进行计算和比较。结果电穿孔转染法转染率与细胞转染后存活率优于脂质体转染法(P<0.05)。结论相比脂质体转染法,电穿孔转染法的基因转染率更高,因此该种方式值得在科研实验中进行推广。(本文来源于《医疗装备》期刊2018年05期）
脂质体转染论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
通过化工程序合成阳离子脂质TMA-C2-Glu-C12,经双蒸水超声分散后制得相应的氨基酸类阳离子脂质体,实验共合成了八种氨基酸类阳离子脂质,经过二次整流后分散成对应的质体。实验结果表明,在HBL100、HT1080和GC-1细胞系中,TMA-C2-Glu-C12的转染效率与Lipofectamine 2000相当,在HEK293、Ges-1、Huvce、HeLa和SW480细胞系中进行结果对比,实验表明TMA-C2-Glu-C12的细胞毒性不强,是一种高效的基因转载体。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脂质体转染论文参考文献
[1].白圣凯,野庆松,张芳婷,盖厦梦,李文娜.脂质体介导基因编辑载体质粒转染条件的优化[J].生物技术.2019
[2].何芳丽,程健琳,李俐娟,李亚林,苏泽红.氨基酸类阳离子脂质体在基因转染中的应用[J].化工设计通讯.2019
[3].朱伦井,贝朝涌,段江涛,彭称飞,马跃刚.脂质体和慢病毒介导P75神经生长因子受体及神经生长因子转染骨髓间充质干细胞的效果比较[J].中国组织工程研究.2019
[4].柴百惠,绳秀珍,唐小千,邢婧,战文斌.脂质体介导转染犬肾上皮细胞的方法改进与优化[J].中国海洋大学学报(自然科学版).2018
[5].翁炳焕,徐威,苏岚,沈敏,李蓉.脂质体介导SV40LT基因转染构建羊水染色体核型分析质控细胞系研究[J].浙江大学学报(医学版).2018
[6].张怡,潘敏,邓志婷,李文娟,方义杰.聚焦超声介导阳离子脂质体携带HSV-TK增强基因转染及联合更昔洛韦对大鼠胶质瘤C6细胞的影响[J].中华实用诊断与治疗杂志.2018
[7].夏盛源,王远航,朱蔚云,张岚.人支气管上皮细胞16HBE和其经硫化镍、反式-BPDE诱导的恶性转化细胞对脂质体转染效率的差异性比较[J].激光生物学报.2018
[8].周明,李浩,王子建,李登科,全正扬.常规脂质体介导shRNA转染建立CYP2E1表达沉默的人肝实质细胞模型[J].现代生物医学进展.2018
[9].吴婷,吴江,金书欣,席晔斌,钮晓音.阳离子脂质体Lipofectamine3000对贴壁细胞、悬浮细胞和原代细胞转染效率比较的研究[J].现代免疫学.2018
[10].张妍乐,顾玲.电穿孔与脂质体转染法对悬浮与贴壁细胞转染效率的影响[J].医疗装备.2018
论文知识图
