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产耐热β-半乳糖苷酶蜜源芽孢杆菌的鉴定及酶学性质

2020-12-02阅读(564)

产耐热β-半乳糖苷酶蜜源芽孢杆菌的鉴定及酶学性质

论文摘要

从分离自蜂蜜的芽孢杆菌中筛选到一株高产β-半乳糖苷酶的菌株,鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）,并命名为Bacillus licheniformis SYBC hb15。纯化该酶并研究其酶学性质,以邻硝基酚-β-D-半乳糖苷（ONPG）为底物,B. licheniformis SYBC hb15所产β-半乳糖苷酶的最适水解反应温度是60℃;70℃放置60 min后酶活力仍保留65%,具有较高的热稳定性;与嗜热菌Talaromyces thermophilus来源的β-半乳糖苷酶相比,葡萄糖对其水解活性的抑制较弱。因此,B. licheniformis SYBC hb15所产的β-半乳糖苷酶具有较高的热稳定性和葡萄糖耐受性,有很好的工业应用潜力。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 菌种
  •     1.1.2 试剂
  •     1.1.3 仪器与设备
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 菌种鉴定
  •     1.2.2 β-半乳糖苷酶活力的测定
  •     1.2.3 酶的纯化和酶学性质的测定
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 菌种鉴定
  •     2.1.1 形态学和生理生化特征鉴定
  •     2.1.2 16S rRNA基因克隆及其序列分析
  •   2.2 β-半乳糖苷酶的分离纯化
  •     2.2.1 硫酸铵饱和度的确定
  •     2.2.2 HiPrepTM26/10 Desalting对蛋白质进行脱盐
  •     2.2.3 离子交换柱层析
  •     2.2.4 凝胶过滤层析
  •     2.2.5 β-半乳糖苷酶分离纯化各步骤的总结
  •   2.3 β-半乳糖苷酶的酶学性质
  •     2.3.1 β-半乳糖苷酶的最适反应温度
  •     2.3.2 β-半乳糖苷酶的热稳定性
  •     2.3.3 β-半乳糖苷酶的最适反应pH
  •     2.3.4 β-半乳糖苷酶的pH稳定性
  •     2.3.5 金属离子对β-半乳糖苷酶酶活的影响
  •     2.3.6 单糖对β-半乳糖苷酶酶活的影响
  •     2.3.7 β-半乳糖苷酶的反应动力学常数
  • 3 结语

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李云,朱少华,管政兵,蔡宇杰,廖祥儒

    关键词: 半乳糖苷酶,酶学性质,地衣芽孢杆菌

    来源: 食品与生物技术学报 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,轻工业手工业

    单位: 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院

    基金: 江苏省产学研前瞻项目（BY2014023-28）,无锡市科技发展农业支撑项目（CLE01N1310）

    分类号: Q93;TS201.3

    页码: 49-57

    总页数: 9

    文件大小: 2248K

    下载量: 144

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