唾液链球菌嗜热亚种论文-杨胜远,陆兆新,吕凤霞,别小妹

唾液链球菌嗜热亚种论文-杨胜远,陆兆新,吕凤霞,别小妹

导读:本文包含了唾液链球菌嗜热亚种论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:唾液链球菌嗜热亚种,谷氨酸脱羧酶,γ-氨基丁酸,生物转化

唾液链球菌嗜热亚种论文文献综述

杨胜远,陆兆新,吕凤霞,别小妹[1](2011)在《唾液链球菌嗜热亚种Y-2细胞转化法制备γ-氨基丁酸》一文中研究指出研究反应pH值、反应温度、重金属盐、表面活性剂、底物浓度、菌体质量浓度和磷酸吡哆醛添加量对Streptococcus salivarius subsp.thermophilus Y-2细胞转化法生产γ-氨基丁酸的影响。获得反应体系的最佳组成为:湿菌体25g/L、BaCl2 40mmol/L、Triton X-100体积分数0.02%、L-谷氨酸单钠盐(L-monosodium glutamate,MSG)47.5g/L和L-谷氨酸(L-glutamic acid,L-Glu)90.0g/L。该体系在40℃、pH 4.5和搅拌速度100r/min的最适转化条件下进行反应72h,转化液GABA产量达到了(87.16±4.33)g/L,细胞平均生产力为(48.42±2.41)mg/(h.g),摩尔转化率为(97.60±4.71)%。(本文来源于《食品科学》期刊2011年01期)

杨胜远,陆兆新,余勃,林谦,焦阳[2](2008)在《唾液链球菌嗜热亚种Y-2产谷氨酸脱羧酶的影响因子确立》一文中研究指出从产酶和细胞生长较好的MRS培养基出发,对Streptococcus salivarius ssp.thermophilus Y-2产谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)的影响因子进行探讨,结果当培养基组成和培养条件为蛋白胨15g/L、牛肉膏12.5g/L、蔗糖12.5g/L、柠檬酸二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、K2HPO42.0g/L、CaCl2 2.0g/L、Tween 80 1.0ml、pH7.0、接种量2%(V/V)、发酵温度37℃、发酵时间12h时,较有利于菌株Y-2产GAD。Plackett-Burman设计法研究表明培养基初始pH值和K2HPO4为影响菌株Y-2产GAD的主要影响因素。经对菌株Y-2产GAD影响因素的筛选,新获得的培养基在组成上与MRS培养基相比已发生显着变化,GAD活力提高了1.3倍。(本文来源于《食品科学》期刊2008年12期)

王伟军,李延华,张兰威,于俊林[3](2008)在《唾液链球菌嗜热亚种发酵乳风味成分分析》一文中研究指出本实验使用同时蒸馏萃取-气谱-质谱(SDE-GC-MS)技术对5株唾液链球菌嗜热亚种S.t-9、S.t-17YA、S.t-1703CA、S.t-1703D和S.t-03发酵乳中风味物质进行了定性及定量分析,分别鉴定出24种、20种、13种、20种、21种风味物质,共涉及6大类:酸类化合物、酯类化合物、醇类化合物、羰基化合物、芳环和杂环化合物,35种物质。另外,5株菌代谢主要风味物质2,3-丁二酮的能力大小为:S.t-1703D>S.t-1703CA>S.t-17YA>S.t-03>S.t-9,除S.t-9菌代谢2,3-丁二酮量较低外,其它4种菌代谢丁二酮的能力差异不大。(本文来源于《食品科学》期刊2008年04期)

杨胜远[4](2006)在《利用唾液链球菌嗜热亚种(Streptococcus salivarius subsp. thermophilus)Y-2生产γ-氨基丁酸的研究》一文中研究指出本文对利用唾液链球菌嗜热亚种生产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)进行了系统研究,主要在高活力谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)[EC4.1.1.15]菌株的筛选和鉴定、GAD的纯化和酶学特性、产酶条件的优化、细胞转化法生产GABA的条件优化、深层发酵生产GABA的条件优化以及GABA的纯化等方面进行了深入探讨,并建立了GAD产生菌快速筛选的pH指示剂法、高效液相色谱测定发酵醪中GABA的方法和GAD活力测定的Berthelot比色法,结果如下:1.通过已知种属的Streptococcus salivarius subsp.thermophilus STX2,Eccherichia coli As1.487和Micrococcus luteus cMCC28001建立了GAD产生菌快速筛选的pH指示剂法,并利用该方法成功从84株不同微生物菌株中筛选到了25株GAD产生菌,其中以菌株Y-2的GAD活性最高,当菌体(按干重计)与1%谷氨酸一钠(monosodium glutamate,MSG)溶液按1:10混合,于37℃反应12 h,转化液中GABA浓度为14.52±0.93 mmol·L~(-1)。通过形态特征、生理生化特征和16s rDNA序列分析,将菌株Y-2鉴定为唾液链球菌嗜热亚种(Streptococcus salivarius subsp.thermophilus)。S.salivarius subsp.thermophilus Y-2粗GAD的最适反应温度和pH分别为45℃和5.0,在4~40℃和pH 4.75~5.25范围内较稳定,在0~6 h呈现一级反应。2.建立了高效液相色谱测定发酵醪中GABA的方法。采用7%(V/V)乙酸水溶液对发酵醪进行预处理,以异硫氰酸苯酯作为衍生剂,用反相C_(18)柱为分离柱,柱温为27℃,阶段洗脱,在254nm下进行检测。结果发酵醪中的GABA获得了很好分离,GABA在0~1.5 mmol·L~(-1)范围内线性相关性好,其线性方程为y=14106.5713 x-258.24926(r=0.99928)。最小检测浓度为0.5μmol·L~(-1)(相对标准偏差≤10%)。组间样品测定相对误差为3.571%,加样平均回收率达到了99.038%。结果表明,所建方法稳定,灵敏,重现性好,可用于测定发酵醪中的GABA。3.基于Berthelot反应的原理,建立了测定GAD活力的Berthelot比色法。通过对影响Berthelot比色法主要因素—次氯酸钠溶液的使用量进行详细研究,并模拟GAD催化反应体系中底物和产物变化过程,以L-Glu和GABA的混合溶液建立工作曲线,GABA在0~10 mmol·L~(-1)的范围内具有良好的线性,线性方程为:y=0.0893x+0.0158(R~2=0.9992);精密度分析结果表明,测定相对误差和变异系数都<5%;平均回收率为99.64%。Berthelot比色法测定操作程序为:取酶反应液0.4 mL,加入Na_2Co_3(1mol·L~(-1))0.1 mL、pH10.0硼酸盐缓冲液(0.2 mol·L~(-1))0.5 mL、6%苯酚1 mL,混匀,于室温下(20℃)在5 min内加入5.2%NaClO溶液1 mL,混匀后放置4~8 min,然后沸水浴10 min,立即冰浴20 min,待溶液出现蓝绿色后,加入2.0 mL 60%乙醇溶液,混匀后于20℃水浴中放置30 min,测定640 nm处的吸收值。分别采用Berthelot比色法和高效液相色谱法对GAD活力进行测定,两种方法的测定结果相对误差为4.35%。4.首次通过(NH_4)_2SO_4分级沉淀、等电点沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析、HiPrep16/10 Phenyl FF疏水层析和Sephadex G-100凝胶层析对S.salivarius subsp。thermophilus Y-2 GAD进行了纯化,获得了电泳纯GAD,较粗酶液纯化了21.97倍,比酶活为103.92 U·mg~(-1),酶活力回收率为7.84%。GAD的亚基和全酶相对分子量分别为46.85 kDa和103.57 kDa,表明GAD由2个大小相等的亚基组成的二聚体。GAD等电点为pH 4.2,最适反应温度和pH分别为55℃和pH 4.0,在4~60℃和pH3.75~4.5范围内稳定。在测试的19种氨基酸中只以L-Glu为底物,而对D-Glu等18种氨基酸没有催化作用,具有很强的底物特异性和立体结构选择性,对L-Glu的K_m和V_(max)分别为2.348 mmol·L~(-1)和4.627 mmol·L~(-1)·h~(-1)。GAD的N-末端氨基酸序列为NH_2-Met-Asn-GlU-Lvs-Leu-Phe-Arg-Glu-Ile-。该序列与报道的其他蛋白质序列均不一致,结果显示该GAD为新的GAD。表面活性剂十二烷基硫酸钠、Tween 20、Tween 40、Tween 80和Triton X-100对GAD都有不同程度的抑制作用,分别抑制了91.61%,11.32%、13.28%、16.21%和15.86%的GAD活力。当终浓度为5 mmol·L~(-1)时,BaCl_2对GAD活性具有显着的促进作用,酶活力提高了22.53%,但是当终浓度为50 mmol·L~(-1)时,却对GAD活性具有抑制作用;低浓度和高浓度的FeSO_4、FeCl_3、ZnSO_4、MnSO_4、Pb(Ac)_2、AgNO_3、CoCl_2、和CuSO_4对GAD活性都有强烈的抑制作用;5 mmol·L~(-1)CaCl_2对GAD的活性影响不大,但50 mmol·L~(-1)CaCl_2却抑制了18.74%GAD活性;5 mmol·L~(-1)和50 mmol·L~(-1)MgCl_2对GAD均没有影响。低浓度(5 mmol·L~(-1))NaCl、KCl和LiCl对GAD活性有轻微的抑制作用或没有影响,但在高浓度(50 mmol·L~(-1))时却对GAD活性呈现促进作用,其机制主要是通过弱抑制作用、降低CO_2溶解度和增加酶蛋白的溶解性共同作用而影响GAD活性。5.通过单次单因子实验法、Plackett-Burman设计法和Box-Behnken响应曲面法对S.salivarius subsp.thermophilus Y-2产GAD的适宜条件进行考察,结果表明最适产GAD的培养基组成为:蛋白胨15 g·L~(-1),牛肉膏12.5 g·L~(-1),蔗糖12.5 g·L~(-1),柠檬酸二铵2.0 g·L~(-1),乙酸钠5.0 g·L~(-1),K_2HPO_4 1.03 g·L~(-1),CaCl_2 2.12 g·L~(-1),Tween 80 1.0mL·L~(-1),pH 6.79;最适发酵条件为:接种量2%,发酵温度37℃,发酵时间12 h。在该优化条件下,200 mL发酵醪的菌体总GAD活力达到了257.46±5.12 U,较优化前(MRS培养基,177.31±9.33 U)提高了1.45倍。6.通过对反应pH、反应温度、重金属盐、表面活性剂、底物浓度、菌体浓度和磷酸吡哆醛(pyrodoxal-5′-phosphate,PLP)等因素对S.salivarius subsp.thermophilus Y-2细胞转化法生产GABA的影响进行考察和分析,获得了反应体系的最佳组成为:湿菌体25 g·L~(-1)、BaCl_2 40 mmol·L~(-1)、Triton X-100 0.02%(V/V)、MSG 47.5 g·L~(-1)和L-Glu90.0 g·L~(-1)。当该体系在40℃、pH 4.5和搅拌速度100 rpm的最适转化条件下进行反应72 h,转化液GABA浓度达到了87.16±4.33 g·L~(-1),细胞平均生产力为48.42±2.41mg_(GABA)·h~(-1)·g_(cells)~(-1),摩尔转化率为97.60±4.71%。7.通过对一步法发酵中S.salivarius subsp.thermophilus Y-2的生长情况、pH变化和细胞内外GABA的变化情况进行考察,首次发现S.salivarius subsp.thermophilus合成GABA的过程与GAD的生物化学性质有密切关系。基于GAD的性质,将S.salivarius subsp.thermophilus Y-2的最适产GAD条件与GABA的合成条件进行有机分离,建立了二步法发酵生产GABA,并对MSG的添加时间、MSG添加量、PLP的添加时间和不同中和剂对二步法发酵生产GABA的影响进行了考察,结果表明,S.salivarius subsp.thermophilus合成GABA的最适培养基为:MSG 12 g·L~(-1),蛋白胨15g·L~(-1),牛肉膏12.5 g·L~(-1),蔗糖12.5 g·L~(-1),柠檬酸二铵2.0 g·L~(-1),乙酸钠5.0 g·L~(-1),K_2HPO_41.03 g·L~(-1),CaCl_2 2.12 g·L~(-1),Tween 80 1.0 mL·L~(-1),pH 6.79。最适发酵条件为:接种量2%(V/V),在100 rpm搅拌和不通气的条件下于37℃发酵24 h,然后于40℃和pH4.5继续发酵48 h。在该条件下,通过75 L发酵罐进行发酵,发酵醪中GABA浓度达到了6271.79 mg·L~(-1),较一步法(4534.03 mg·L~(-1),84 h)提高了1.38倍,发酵时间缩短了12 h,摩尔转化率为85.75%。8.通过等电点沉淀和732强酸阳离子交换树脂对S.salivarius subsp.thermophilus Y-2细胞转化液中的GABA进行纯化,GABA的总回收率达到了84.13%。纯化的GABA产品质量较好,GABA的外观为白色粉末状固体,GABA含量为97.81±0.67%,灰分为0.449±0.002%,干燥失重为1.79±0.06%,铅、砷和汞分别为0.4093±0.0001、0.0511±0.0001和0.0950±0.0000 mg·kg~(-1),因此在食品行业中具有极好的应用前景。(本文来源于《南京农业大学》期刊2006-12-01)

黄丽金,陆兆新,袁勇军[5](2005)在《响应面法优化唾液链球菌嗜热亚种增殖培养基》一文中研究指出采用响应面方法对唾液链球菌嗜热亚种增殖培养基进行了优化。以MRS培养基作为基础培养基,采用Plackett-Burman(PB)设计法,对12种乳酸菌生长促进因子以及培养基的初始pH等13个因素对唾液链球菌嗜热亚种STX2生长的影响进行评价。筛选出CaCl2与豆粕水解液为STX2的生长强化因子,且培养基的初始pH值也是影响该菌体生长的关键因子,而其他物质对STX2增菌量的影响不显着。然后用旋转中心组合设计及响应面分析法确定强化因子的最佳浓度以及最佳的培养基初始pH值。在优化培养基中,STX2的菌体浓度达到6·8×108cfu/mL,比优化前的1·5×108cfu/mL提高了4·5倍。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2005年05期)

顾瑞霞,刘爱萍,骆承庠[6](2001)在《唾液链球菌嗜热亚种LCX2001胞外多糖分批发酵动力学》一文中研究指出对唾液链球菌嗜热亚种LCX2 0 0 1生物合成胞外多糖 (EPS)的动力学进行了研究 ,基于Logistic equation方程和Luedeking piret方程 ,得到了描述发酵过程的动力学模型和模型参数。该模型反映了细胞生长、乳酸生成、EPS生物合成和基质消耗之间的关系 ,模型的拟合结果与实验值吻合较好 ,误差小于 1 0 %。(本文来源于《微生物学通报》期刊2001年04期)

顾瑞霞,刘爱萍,程涛,骆承庠[7](2000)在《唾液链球菌嗜热亚种LCX2001胞外多糖合成条件的研究》一文中研究指出从众多的用于乳酸菌生长的合成和半合成培养基(MRS、M17、ATP、SL、Elliker、SDM),选择了ATP作为唾液链球菌嗜热亚种 LCX2001胞外多糖产生的基本培养基,在此基础上开发了 LCX合成培养基,并对碳源、培养基的初始pH、发酵温度和发酵时间进行了探讨。该菌生物合成EPS的工艺条件为:葡萄糖和/或乳精是该菌株合成EPS的合适的碳源,添加量为20g/L,培养基的初始pH值为6.5,发酵温度为35℃,发酵时间为20h。(本文来源于《食品科学》期刊2000年08期)

顾瑞霞,刘爱萍,程涛,骆承庠[8](2000)在《唾液链球菌嗜热亚种荚膜多糖生理功能特性研究》一文中研究指出通过对唾液链球菌嗜热亚种的研究发现 ,细胞固有发酵活性、抵抗外界不良环境能力与荚膜无关。破坏唾液链球菌嗜热亚种LCX2 0 0 1的荚膜 ,会使发酵速度加快 ,但同时对外界不良环境的抵抗力下降。这些研究结果表明 ,有无荚膜 ,或荚膜大小对同一亚种所表现出来的不同生理特性没有决定作用 ;破坏荚膜 ,会影响细胞体与外界物质交换能力 ,对细胞体许多生理功能有影响 ;荚膜起到阻止外界物质的进入细胞和细胞内产生的乳酸向外界释放的作用。(本文来源于《中国乳品工业》期刊2000年04期)

唾液链球菌嗜热亚种论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

从产酶和细胞生长较好的MRS培养基出发,对Streptococcus salivarius ssp.thermophilus Y-2产谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)的影响因子进行探讨,结果当培养基组成和培养条件为蛋白胨15g/L、牛肉膏12.5g/L、蔗糖12.5g/L、柠檬酸二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、K2HPO42.0g/L、CaCl2 2.0g/L、Tween 80 1.0ml、pH7.0、接种量2%(V/V)、发酵温度37℃、发酵时间12h时,较有利于菌株Y-2产GAD。Plackett-Burman设计法研究表明培养基初始pH值和K2HPO4为影响菌株Y-2产GAD的主要影响因素。经对菌株Y-2产GAD影响因素的筛选,新获得的培养基在组成上与MRS培养基相比已发生显着变化,GAD活力提高了1.3倍。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

唾液链球菌嗜热亚种论文参考文献

[1].杨胜远,陆兆新,吕凤霞,别小妹.唾液链球菌嗜热亚种Y-2细胞转化法制备γ-氨基丁酸[J].食品科学.2011

[2].杨胜远,陆兆新,余勃,林谦,焦阳.唾液链球菌嗜热亚种Y-2产谷氨酸脱羧酶的影响因子确立[J].食品科学.2008

[3].王伟军,李延华,张兰威,于俊林.唾液链球菌嗜热亚种发酵乳风味成分分析[J].食品科学.2008

[4].杨胜远.利用唾液链球菌嗜热亚种(Streptococcussalivariussubsp.thermophilus)Y-2生产γ-氨基丁酸的研究[D].南京农业大学.2006

[5].黄丽金,陆兆新,袁勇军.响应面法优化唾液链球菌嗜热亚种增殖培养基[J].食品与发酵工业.2005

[6].顾瑞霞,刘爱萍,骆承庠.唾液链球菌嗜热亚种LCX2001胞外多糖分批发酵动力学[J].微生物学通报.2001

[7].顾瑞霞,刘爱萍,程涛,骆承庠.唾液链球菌嗜热亚种LCX2001胞外多糖合成条件的研究[J].食品科学.2000

[8].顾瑞霞,刘爱萍,程涛,骆承庠.唾液链球菌嗜热亚种荚膜多糖生理功能特性研究[J].中国乳品工业.2000

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