禽腺病毒-Ⅰ群PCR-RFLP分型方法的建立

禽腺病毒-Ⅰ群PCR-RFLP分型方法的建立

论文摘要

为快速确定临床禽腺病毒-Ⅰ群(FAdVs)的血清型,本研究根据FAdVs的Hexon基因设计引物,对12个血清型FAdVs标准毒株进行PCR扩增,并根据扩增目的片段进行酶切位点分析和相应酶切反应研究,建立聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法。结果显示,利用该引物可同时扩增12个血清型FAdVs标准毒株,扩增片段大小为894 bp;扩增片段酶切位点分析显示,Eco130 Ⅰ、Pf123Ⅱ、Mlu Ⅰ、Psy Ⅰ和BgⅡ为主要酶切位点,这5种酶切反应结果显示12个血清型FAdVs标准毒株可以得到不同的酶切图谱,且能区分12种血清型FAdVs;应用该酶切方法对本实验室保存的2株已知血清型的分离株进行分析,其结果与已确定的血清型一致。表明本试验建立的PCR-RFLP方法简便、特异性和区分度好,可用于12个血清型FAdVs的分型。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 毒株、载体与细胞
  •   1.2 主要试剂与仪器
  •   1.3 限制性内切酶
  •   1.4 引物设计与合成
  •   1.5 病毒核酸提取与PCR扩增
  •   1.6 目的基因的酶切及图谱分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 毒株扩增和测序结果
  •   2.2 PCR产物的酶切电泳结果与分析
  •   2.3 临床样本测定
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 江之瑶,王守春,栾庆东,尹燕博,王建琳

    关键词: 禽腺病毒群,限制性内切酶,分型

    来源: 中国兽医杂志 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 青岛农业大学动物医学院

    基金: 国家重点研发计划项目(2016YFD0500800)

    分类号: S852.65

    页码: 22-24+27

    总页数: 4

    文件大小: 554K

    下载量: 61

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