王凌云[1]2003年在《羊栖菜多糖的提取工艺、化学结构及部分生物活性研究》文中研究指明本文对采自广东汕头南澳海藻养殖场的羊栖菜Sargassum fusiforme进行了粗多糖提取工艺的优化研究。并通过对羊栖菜粗多糖进行分离、纯化和水解获得10个样品，对其中部分样品进行了较为深入的生物活性研究。 以多糖提取率为指标，分别讨论了温度、提取时间、加水量及pH值对羊栖菜粗多糖提取率的影响程度，并根据L_9(3~4)正交表确定最佳提取工艺条件为温度80℃，加水量50倍，pH值5及时间5h。 采用乙醇、CaCl_2分级沉淀法与DEAE C-52离子交换柱、Sephadex G-100凝胶柱层析相结合，对羊栖菜粗多糖进行了分离纯化，共得到7个样品。通过控制不同的水解条件，获得3个多糖样品。并检测了上述样品的部分理化指标。 采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)，测定了6个多糖样品对人肝癌细胞的生长抑制率(细胞毒性)。结果显示各样品在体外对肝癌细胞具有一定的生长抑制作用，但其抑制作用较弱。 采用细胞病变(CPE)抑制法和MTT比色法，研究了羊栖菜多糖及其水解样品对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和柯萨奇病毒(CVB_3)的抗病毒活性和对非洲绿猴肾细胞(Vero)的细胞毒性。结果显示，除两个水解样品外，其他样品均表现出了较强的抗病毒活性，且对Vero细胞无明显的毒副作用。研究发现，羊栖菜多糖不仅具有直接杀灭病毒的作用，而且还可进入细胞或吸附在细胞表面，达到抑制或杀伤病毒的效果。初步认为羊栖菜多糖的抗病毒活性与多糖的类型、多糖的水解程度以及硫酸基的含量等因素有关。
陈冰洁[2]2017年在《羊栖菜多糖的化学修饰及生物活性研究》文中提出羊栖菜是褐藻中的一种,广泛分布于中国、韩国、日本,作为治疗剂使用已有千年历史。从羊栖菜中提取的多糖具有多种功能,如抗肿瘤、抗弧菌病、增强免疫力和抗高血脂等。国内外有关研究表明,多糖的生物活性与多糖的分子量、空间结构、以及取代基种类、数目和位置有关。羊栖菜多糖已阐明具有的抗氧化、抗菌、抑制酪氨酸活性均较低,难以满足需求,且羊栖菜多糖化学修饰大多集中在硫化和硒化。为进一步提高多糖的抗氧化活性、酪氨酸酶抑制活性和抑菌活性,本文将羊栖菜多糖先降解,再制备其羧甲基化和异羟肟酸化衍生物,并研究他们的抗氧化活性、酪氨酸酶抑制作用和抑菌活性。主要研究结果如下:1.用热水浸提法从羊栖菜中提取粗多糖(PSF),并用H2O2-Vc联合法对其进行降解得到降解多糖,对降解条件进行响应面优化,结果显示最佳工艺条件为:过氧化氢(H2O2)和维生素C(Vc)为17.26 mM,降解温度51℃,降解时间1.6h。2.采用氯乙酸对在优化条件下得到的降解多糖(DPSF)进行羧甲基化修饰,得到的羧甲基衍生物(CDPSF),在1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)存在下与羟胺偶联,得到多糖的异羟肟酸衍生物(HCDPSF)。对降解前后多糖的化学组分分析,结果表明各组分相差不大。HPGPC测得其降解前后的分子量分别为987、407 kDa。GC-MS分析结果表明PSF、DPSF和CDPSF的单糖组成均主要为岩藻糖和半乳糖,以及少量的甘露糖、木糖和葡萄糖。IR、1H NMR和13C NMR结果表明羧甲基化和异羟肟化修饰成功。3.通过 PSF、DPSF、CDPSF、HCDPSF-2 对自由基(DPPH、·OH、O2-·)清除活性及铁还原能力的研究,对样品抗氧化活性进行评价。结果表明,与PSF相比,DPSF的抗氧化活性有显着的提高,而衍生化多糖CDPSF、HCDPSF-2的抗氧化活性则比DPSF得到进一步的改善。同时,我们还测定了 PSF和DPSF对酪氨酸酶的抑制作用,结果表明:PSF和DPSF对酪氨酸酶的均有抑制作用且DPSF抑制作用高于PSF,并且得出DPSF是酪氨酸酶的可逆混合型抑制剂的结论。4.以枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌、绿脓杆菌及沙门氏菌作为供试菌种,通过样品对受试菌种的抑菌圈和最低抑菌浓度(MIC)的测定,进行体外抗菌活性研究,结果表明:CDPSF和HCDPSF对五种菌有明显的抑制作用,PSF、DPSF没有抑菌活性。
刘洪超[3]2017年在《羊栖菜多糖的提取分离、生物活性及结构鉴定》文中进行了进一步梳理论文主要采用微波辅助处理和优化羊栖菜多糖提取工艺,通过超滤膜技术对羊栖菜多糖进行分离,并对不同分子量段的羊栖菜多糖(SFPS)进行体外抗氧化活性分析,在此基础上选取体外抗氧化活性较高的分子量段多糖进行体内抗疲劳及小鼠水迷宫实验,并对该分子量段多糖进行纯化和结构分析。论文以羊栖菜为原料,微波辅助萃取技术提取羊栖菜多糖,在单因素实验基础上,采用响应面设计方法研究羊栖菜多糖提取的最优工艺条件。微波辅助水提法提取羊栖菜多糖的最佳工艺条件为:液料比34mL/g,微波时间8min,水提温度95℃,提取时间2.1h。此优化条件下,羊栖菜多糖得率为11.51%±0.12%。通过超滤膜技术(分别为10万,5万,1万,5千)将羊栖菜多糖进行分离,并对不同分子量段羊栖菜多糖进行体外抗氧化活性分析,结果表明:不同分子量段羊栖菜多糖均具有较强抗氧化能力,其中对羟自由基、DPPH·自由基清除效果更明显,对超氧阴离子的清除作用相对较弱,自由基清除率均随多糖浓度的增加而增加,呈现量效关系,相对分子量越小其自由基清除能力相对越强。对不同分子量段羊栖菜多糖(SFPSⅤ、SFPSⅣ、粗多糖)进行小鼠学习记忆能力试验,采用120只昆明小鼠(雌雄各半),并随机分为12组:正常对照组、消旋山莨菪碱所致记忆获得性障碍模型组、吡拉西坦(脑复康)阳性对照组和实验组,实验组为不同分子量段羊栖菜多糖高剂量组(0.4 g/kg)、中剂量组(0.3 g/kg)、低剂量组(0.2g/kg)。连续灌胃15 d,进行Morris水迷宫试验测试各组的学习记忆能力;测试前20 min,除正常对照组腹腔注射生理盐水外,其余各组均注射消旋山莨菪碱,以此建立消旋山莨菪碱记忆获得性障碍模型,测试结束后检测各组血清T-AOC、SOD活性和MDA含量。结果表明:羊栖菜多糖对记忆障碍小鼠学习记忆能力具有一定的改善作用,中剂量SFPSⅤ与模型组相比,小鼠平均逃避潜伏期明显缩短,穿越次数明显增加(P<0.05);不同分子量段羊栖菜多糖对小鼠的学习记忆能力改善程度不同,低分子量段多糖效果最佳,且优于脑复康的效果(P<0.05);羊栖菜多糖改善消旋山莨菪碱记忆获得性障碍模型小鼠的学习记忆能力,其机制可能与羊栖菜多糖的抗氧化能力有关;研究结果对羊栖菜多糖的利用及活性研究具有一定的指导作用。对不同分子量段羊栖菜多糖(SFPSⅤ、SFPSⅣ、粗多糖)进行小鼠抗疲劳作用试验。采用100只昆明小鼠(雌雄各半),并随机分为10组:正常对照组、不同分子量段羊栖菜多糖高剂量组(0.3 g/kg)、中剂量组(0.2 g/kg)、低剂量组(0.1 g/kg)。连续灌胃15 d后,进行小鼠负重游泳实验,记录小鼠体重、负重游泳力竭时间、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肝糖原、肌乳酸及血清尿素的含量。结果表明,羊栖菜多糖具有抗疲劳作用,羊栖菜多糖抗疲劳活性主要作用组分为低分子量段多糖,这为进一步研究羊栖菜多糖活性机制奠定基础,为羊栖菜多糖抗疲劳保健食品的开发与利用中提供新途径。羊栖菜多糖SFPSⅤ采用阴离子交换柱层析法经不同浓度NaCl梯度洗脱,得到叁种电荷性质相同的单一多糖组分0.1M SFPSⅤ、0.3M SFPSⅤ、0.5M SFPSⅤ,经透析脱盐,浓缩后分别过葡聚糖凝胶G-100层析柱进一步洗脱,得到叁种电荷性质及分子量含量分布均一多糖纯品0.1M SFPSⅤG-2、0.3M SFPSⅤG-1、0.5M SFPSⅤG-2。通过红外光谱分析,叁种纯品均具有多糖特征吸收峰,存在糖环羟基伸缩振动峰,-CH3、-CH2伸缩振动峰,多糖水合振动峰,糖苷键(C-O-C)非对称振动峰(3,6-内醚桥),S=O伸缩振动峰(说明存在硫酸基取代);通过离子色谱分析,结果表明0.1M SFPSⅤG-2中主要存在葡萄糖组分,0.3M SFPSⅤG-1、0.5M SFPSⅤG-2均存在5种单糖,分别为葡萄糖、岩藻糖、半乳糖、木糖、甘露糖,前者出现两组杂峰,后者出现一组杂峰;通过一维NMR光谱分析,证明SFPSⅤ存在五种单糖,其中0.1M SFPSⅤG-2存在3种α型吡喃糖、2种β吡喃糖,0.3M SFPSⅤG-1、0.5M SFPSⅤG-2均存在1种α型吡喃糖和1种β吡喃糖。
周峙苗[4]2003年在《羊栖菜多糖的提取和纯化研究》文中进行了进一步梳理羊栖菜多糖(简称SFP)是从马尾藻科植物羊栖菜(Sargassum fusiforme(Harv.)Setchel)中提取得到的，具有抗肿瘤、抗凝血、降血糖、提高肌体免疫功能等生理活性。本文研究用水提法、酸提法、酶法提取羊栖菜多糖，考虑到提取温度、时间、加水量、加酶量等因素的影响，用正交试验优化酶法提取条件。酶法提取的最适温度为50℃，最适pH值为3.0，提取时间为3hr，加酶量为纤维素酶(16000 U／g)8％，果胶酶(20000 U／g)4％。为适应工业化生产需要，确定水提法为煮沸提取时间3hr，提取液pH值为3.0，固液比为1：40。用酶法结合高温浸提多糖提取的工艺条件是：加纤维素酶量为(16000U／g)8％，加果胶酶量为(20000 U／g)4％，pH3.0，酶解时间为3hr，酶解温度为50℃；浸提温度120℃，浸提时间3hr，固液比1：40。采用该工艺的粗多糖提取得率达14.88％，比热水浸提工艺的粗多糖得率提高了117.23％，比资料介绍的四次浸提法提高了75.06％。 本文系统地研究了羊栖菜粗多糖中蛋白质的分离方法，先后选用了Sevag法、酶法结合Sevag法、叁氯乙酸法、1万分子截留量膜超滤、阴阳离子交换树脂法。发现用弱碱性阴和弱酸性阳离子交换树脂串联脱除粗多糖中蛋白质，效果理想，蛋白脱去除率可达91.76％，多糖回收率为92.56％，其中(多糖含量／蛋白含量)值高达42.27，经1万截留分子量透析膜透析，最后冷冻干燥后，得到淡黄色的羊栖菜多糖精粉，其中多糖含量达90.27％，蛋白质含量仅为浙江工业大学硕士学位论文羊栖菜多糖的提取和纯化研究3.巧%。该方法还起到部分脱色效果。 将脱蛋白后的多糖精粉用SePhadexG一200葡聚糖凝胶分离成大分子量多糖部分和小分子量多糖两部分。大分子量多糖部分用SePhacy1S一400共聚糖凝胶分离，得到一个分子量相当大的组分，经凝胶HPLC纯度鉴定为均一性物质，命名组分Fl，该组分含量占多糖精粉的28.45%;小分子量多糖部分进行SePhadexG一1 00葡聚糖凝胶柱层析，结果表明主要有叁个组分fl、几、。，经凝胶HPLC标准分子量对照分析，叁个组分分子量分别为8.2万、5.6万和1.4万;经计算，比例为:37.4%:15.1%:475%。 本实验研究有效地分离了羊栖菜粗多糖中蛋白质，制得羊栖菜多糖精粉，为羊栖菜在保健食品和药物研究和开发方面提供了良好的基础，同时为羊栖菜多糖提取和分离的工业化研究和生产提供了理论依据。
季德胜[5]2017年在《羊栖菜多糖分离纯化、结构鉴定及拮抗UVB辐射造成的皮肤光老化损伤研究》文中进行了进一步梳理羊栖菜属马尾藻科,是一种广泛分布于亚洲沿海地区的褐藻。在中国被作为中药使用已有千年;而在华南地区,人们又常将羊栖菜作为一种健康食品。现代药理学研究表明:羊栖菜含有多种活性成分,其中多糖是其最主要的活性成分之一。本论文对羊栖菜多糖的分离纯化、结构特征及抗光老化活性进行了研究,此外,从细胞水平和动物水平上研究了羊栖菜多糖拮抗UVB辐射造成的皮肤光老化损伤的作用机理,为羊栖菜多糖的开发利用提供一定理论依据。主要研究结果如下:1.采用不同方法提取的羊栖菜多糖,结果表明水提法的羊栖菜多糖抗氧化能力最好,提取率为6.59%。此外,羊栖菜水提多糖(SFP)中总糖、蛋白质、硫酸基及糖醛酸含量分别为58.10%、1.01%、13.18%、15.35%;平均分子量为224 kDa;SFP主要由岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖和甘露糖7种单糖组成,摩尔百分比分别为43.20%、3.50%、18.40%、1.50%、18.50%、5.90%、9.00%。2.采用水提法获得羊栖菜多糖(SFP),再通过DEAE-Sepharose fast-flow凝胶柱层析分离获得4个组分,其中羊栖菜多糖P1组分得率最高为16.61%。P1组分多糖中总多糖、蛋白质、硫酸基及糖醛酸含量分别为87.24%、0.88%、9.85%、17.66%;平均分子量为113 kDa;羊栖菜多糖P1组分由岩藻糖、半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖五种单糖组成,摩尔百分比分别为13.17%、4.28%、1.95%、5.50%、75.10%;羊栖菜多糖P1组分含有的(1→)或(1→6)、(1→2)或(1→4)、(1→3)位糖苷键,百分含量分别为1.62%、60.69%和37.69%。糖苷键链接有→3,6)-α-D-Manp(1→,→4)-α-D-GalAp(1→,→4)-β-D-Xylp(1→和→3,4)-α-D-GlcAp(1→;且羊栖菜多糖P1组分没有叁股螺旋结构。3.通过体内动物实验研究羊栖菜多糖(SFP)抗UVB辐射昆明小鼠皮肤光老化氧化损伤活性,结果表明:SFP能够提高小鼠皮肤中抗氧化酶(SOD和CAT)的活性,降低小鼠皮肤中活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的含量;此外,SFP能够提高小鼠脾指数、胸腺指数及皮肤中水分含量;SFP能够减轻UVB辐射对皮肤造成的损伤。SFP能够降低小鼠皮肤中MMP-1及MMP-9的含量,从而抑制UVB辐射小鼠皮肤造成的光老化氧化损伤。进一步证明了羊栖菜多糖(SFP)具有较好的抗UVB辐射无毛小鼠皮肤光老化损伤的活性。4.通过体外细胞实验研究羊栖菜P1多糖组分体外拮抗UVB辐射HaCaT细胞造成的光老化损伤,结果表明:羊栖菜P1多糖组分能够显着提高了HaCaT中抗氧化酶(SOD和GSH-PX)的活性;同时降低HaCaT细胞中活性氧(ROS)含量。此外,羊栖菜P1多糖组分显着降低间质胶原酶(MMP-1)及92KDa明胶酶(MMP-9)的含量,从而抑制UVB辐射HaCaT细胞引起的光老化氧化损伤。这些结果表明:羊栖菜P1多糖组分具有较好的体外抗UVB辐射引起的光老化氧化损伤功效。
康彩峰[6]2015年在《羊栖菜褐藻糖胶的分离纯化及其免疫活性的研究》文中提出褐藻糖胶是羊栖菜的重要活性成分之一,具有免疫调节等许多生物活性。由于褐藻糖胶分子组成复杂,极性接近,分子量分布范围较宽,分离纯化比较困难。目前对其系统的分级与活性筛选报道的不多,羊栖菜褐藻糖胶免疫调节活性的分子机理还不清楚。为了解决这一问题,需对羊栖菜褐藻糖胶进行系统的分级纯化及活性筛选工作。本文依次通过水提、醇沉及盐析的方法从羊栖菜中分离出褐藻糖胶SFPF,利用DEAE Sepharase CL-6B阴离子交换柱和SephacrylTMS-400凝胶色谱柱进行分级,得到SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3叁个级分。为了了解SFPF、SFPF-1、SFPF-2、SFPF-3四个级分的基本理化性质,对其总糖含量、糖醛酸含量、蛋白质含量、单糖组成、硫酸基团的含量和平均分子量的大小进行测定。通过研究不同剂量的褐藻糖胶及其纯化级分在体外细胞实验(多糖浓度为10μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml)和体内灌胃实验(多糖浓度为100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg)对小鼠脾淋巴细胞增殖能力、NK细胞和腹腔巨噬细胞功能的影响,进而研究褐藻糖胶的免疫调节活性。对SFPF、SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3的基本理化性质分析结果显示,SFPF-2的总糖含量最高为81.8%,其次是SFPF-1为77.8%,SFPF和SFPF-3的总糖含量分别为65.4%和68.4%;SFPF-1的糖醛酸最高,为17.0%,SFPF-3最低,为7.5%,SFPF和SFPF-2的糖醛酸含量分别为12.4%和14.7%;四种级分的蛋白含量分别为1.4%、1.6%、0.4%和0.3%;SFPF-3的硫酸根含量最高,为18.3%,其次是SFPF为9.3%,SFPF-1的硫酸根含量最低为2.9%,SFPF-2为5.6%;SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3分子量大小分别为4.4×104 Da、2.4×104 Da、6.0×104 Da。四种级分的单糖组成主要由Man、Gal、xyl和Fuc组成,还有少量的Gal A,其中四种主要单糖的比例分别为SFPF:2.1:10.2:5.6:81.0;SFPF-1为1.3:4.6:8.0:82.5;SFPF-2为2.4:13.3:3.1:80.6;SFPF-3为1.0:10.0:2.2:84.1。体外细胞实验的结果表明,SFPF、SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3既能够促进由Con A诱导的小鼠脾T淋巴细胞和LPS诱导的B淋巴细胞的增殖,也能够作为分裂原诱导小鼠脾淋巴细胞的增殖。也能够增强小鼠脾NK细胞的杀伤活性、腹腔巨噬细胞细胞毒活性,以及促进小鼠腹腔巨噬细胞对中性红的吞噬能力。通过体内灌胃SFPF和SFPF-2,发现二者都能够明显地促进由Con A和LPS诱导的淋巴细胞增殖,以及其可单独作为分裂原诱导淋巴细胞增殖,对NK细胞杀伤活性以及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力和巨噬细胞对L929细胞的细胞毒活性都有明显的影响。
岑颖洲, 马夏军, 王凌云, 许少玉, 伍秋明[7]2004年在《羊栖菜多糖提取工艺及其单糖组成研究》文中认为采用正交试验结合方差分析 ,研究羊栖菜多糖 (Sargassumfusiformepolysaccharides ,SFPS)的最佳提取工艺 ;采用GC MS分析该多糖的单糖组成。结果表明 ,羊栖菜多糖最佳提取工艺条件为 :温度 80℃ ,加水量 5 0倍 ,pH值 5 ,提取时间 5h ,按此工艺提取羊栖菜多糖产率高并且不影响其生物活性 ;该多糖主要由L 山梨糖、D 木糖、D 艾杜糖、D 甘露糖及D 半乳糖 5种单糖组成 ,摩尔比为 5 .13∶2 .15∶1.99∶1∶4 .35
何丹[8]2016年在《羊栖菜多糖通过Nrf2/ARE信号通路发挥抗衰老作用的初步研究》文中认为衰老是极其复杂的系统性过程,衰老后的生物体抗氧化系统功能降低,内环境氧化还原反应失衡,并且诱发衰老相关疾病。Nrf2(nuclear factor erythroid2-related factor 2)是抗氧化反应元件的正调控因子,参与调控500多个基因的表达,包括抗氧化酶、解毒酶等基因。与老年个体相比,在长寿个体中有保护作用的Nrf2信号通路整体水平上调,提升了老年个体的防御能力,进而延缓衰老的进程。因此,科学家认为Nrf2是健康长寿的保护者。羊栖菜(Sargassum fusiforme)自古到今都有“长寿菜”的美誉,已有报道表明羊栖菜多糖具有抗氧化等多种生物学功能。但羊栖菜多糖发挥其抗氧化并延缓衰老作用的机制研究还未见报道。本文首先应用热水煮提和冷热水依次煮提的方法获得叁种羊栖菜多糖,测定它们的理化性质,并通过体外清除自由基实验对这些多糖的抗氧化活性进行筛选。其次筛选自然衰老小鼠模型,以浓度为100mg/kg/d的羊栖菜多糖溶液,对自然衰老小鼠进行灌胃。选取小鼠肝脏为材料,测定衰老小鼠抗氧化酶类和相关基因等衰老指标的变化和羊栖菜多糖对这些衰老指标的影响,研究羊栖菜多糖是否通过Nrf2/ARE(anti-oxidation response element)信号通路发挥抗衰老作用。通过冷热水依次处理羊栖菜,得到冷提羊栖菜多糖(SFCP)和热提羊栖菜多糖(SFHP);直接通过热水煮提羊栖菜,得到羊栖菜总多糖(SFPS)。根据清除自由基结果显示,叁者的糖浓度与清除率呈正相关。叁者相比较,SFPS比SFCP和SFHP有更好的清除DPPH自由基能力;然而,叁者对于羟自由基的清除能力没有明显区别。SFPS是主要由古洛糖醛酸和岩藻糖等9种单糖组成的硫酸化多糖,含有较多的糖醛酸(41.2%),总糖含量为77.2%。研究表明9月龄小鼠的Nrf2、相关抗氧化酶基因表达量和抗氧化酶活力等显着下降,可以作为自然衰老小鼠模型。羊栖菜多糖灌胃9月龄衰老小鼠,提升了小鼠肝脏Nrf2的表达量和抗氧化系统的功能,包括T-AOC、T-SOD、CAT等的酶活力和GCLC、GCLM、GPx1等抗氧化基因的表达。本研究证明羊栖菜多糖是一种很好的天然抗氧化剂,其通过上调Nrf2/ARE信号通路增强机体的抗氧化能力,进而延缓衰老。
安杨, 柴玉超, 赵统德, 宋淑亮, 吉爱国[9]2017年在《羊栖菜多糖的提取及其在化妆品中的应用》文中研究指明羊栖菜作为一种重要的海洋生物资源,含有丰富的营养成分,从羊栖菜中提取的水溶性多糖具有抗肿瘤、降血脂、降血糖、免疫调节等功效。采用水提、H_2O_2脱色、超滤浓缩等方法提取羊栖菜多糖并提出其相关化妆品的配方设计与制备方法。最后得到羊栖菜多糖提取液中的粗多糖质量浓度为3.67mg/mL,提取率为1.49%;羊栖菜多糖精华液、润肤水、润肤乳的感官评价和理化指标均达到化妆品行业标准的要求。
宁亚净[10]2014年在《羊栖菜褐藻糖胶的结构分析》文中提出褐藻糖胶是羊栖菜的主要成分之一,含有岩藻糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、木糖和葡萄糖醛酸,部分单糖中的羟基发生硫酸酯化。由于结构复杂,分子量较大,给结构分析带来困难。近年来发现褐藻糖胶具有多种生物活性,但对其结构与生物活性之间的构效关系尚不清晰。要解决这一科学问题,必须对褐藻糖胶进行结构分析。本研究对羊栖菜进行热水煮提、80%乙醇沉淀,得水溶性总多糖WHFP,收率为20.4%。通过CaCl2沉淀除去其中的水溶性褐藻胶,得褐藻糖胶F,得率为3.7%。苯酚-硫酸法、间羟基联苯法和考马斯亮蓝法分析结果显示F的总糖含量、糖醛酸含量和蛋白质含量依次为52.1%、6.4%和1.2%。采用DEAE-Sepharose CL-6B和Sephacryl S-400HR柱对F进行分级纯化,得到纯化组分F1-2和F2-2,透析冻干,对两组分进行理化性质分析。采用上述同样方法测定总糖含量、糖醛酸含量和蛋白质含量,硫酸钡-浊度法测定硫酸基团含量,PMP衍生化和高效液相色谱法测定单糖组成,通过高效凝胶渗透色谱法使用TSK-gel G-5000PWXL柱测定纯化样品的平均分子量。紫外全波长扫描检测两组分是否含有蛋白质和核酸。结果显示F1-2和F2-2在Sephacryl S-400HR柱上呈现均一的对称峰,相对于F,两者的回收率分别为8.8%和32.6%。F1-2的糖含量、糖醛酸含量、蛋白质含量和硫酸基团含量分别为59.8%、6.0%、0.8%和24.0%。对于F2-2,各种含量依次为62.9%、5.2%、0.2%和19.5%。F1-2的单糖组成为Fuc:Gal:Xyl:GlcA:Man:Rha=67.9:15.8:8.2:3.7:2.6:1.8,F2-2的单糖组成为Fuc:Gal:Xyl:GlcA:Man:Rha=68.6:20.4:5.9:2.6:1.6:1.0。两个组分的数均分子量分别为1.7×104Da和2.4×104Da,重均分子量分别为3.9×104Da和5.O×104Da。紫外全波长扫描结果显示在260nm和280nm处的核酸和蛋白质吸收峰平坦,与考马斯亮蓝测定结果基本一致。通过甲基化分析联合红外光谱、核磁共振波谱、气相-质谱联用分析法对F2-2的化学结构进行分析。综合推测F2-2以→3)-a-L-Fucp-(1→为主链,2位或4位存在分支,而Gal为p-构型。
参考文献：
[1]. 羊栖菜多糖的提取工艺、化学结构及部分生物活性研究[D]. 王凌云. 暨南大学. 2003
[2]. 羊栖菜多糖的化学修饰及生物活性研究[D]. 陈冰洁. 浙江工商大学. 2017
[3]. 羊栖菜多糖的提取分离、生物活性及结构鉴定[D]. 刘洪超. 上海海洋大学. 2017
[4]. 羊栖菜多糖的提取和纯化研究[D]. 周峙苗. 浙江工业大学. 2003
[5]. 羊栖菜多糖分离纯化、结构鉴定及拮抗UVB辐射造成的皮肤光老化损伤研究[D]. 季德胜. 华南理工大学. 2017
[6]. 羊栖菜褐藻糖胶的分离纯化及其免疫活性的研究[D]. 康彩峰. 东北师范大学. 2015
[7]. 羊栖菜多糖提取工艺及其单糖组成研究[J]. 岑颖洲, 马夏军, 王凌云, 许少玉, 伍秋明. 药物生物技术. 2004
[8]. 羊栖菜多糖通过Nrf2/ARE信号通路发挥抗衰老作用的初步研究[D]. 何丹. 温州大学. 2016
[9]. 羊栖菜多糖的提取及其在化妆品中的应用[J]. 安杨, 柴玉超, 赵统德, 宋淑亮, 吉爱国. 香料香精化妆品. 2017
[10]. 羊栖菜褐藻糖胶的结构分析[D]. 宁亚净. 东北师范大学. 2014
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