导读:本文包含了核糖核酸酶抑制因子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:核糖核酸,因子,抑制,细胞,血管,激酶,膀胱癌。
核糖核酸酶抑制因子论文文献综述
舒静,姜源,庄翔,陈俊霞[1]（2018）在《核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶对膀胱癌上皮-间质转化与转移的影响》一文中研究指出目的研究核糖核酸酶抑制因子(RI)与整合素连接激酶(ILK)相互作用对膀胱癌上皮-间质转化(EMT)与转移的影响。方法构建过表达RI或ILK的膀胱癌EJ细胞系,免疫荧光检测RI与ILK在EJ细胞中的表达及共定位,倒置相差显微镜下观察细胞形态,Western blot检测细胞中RI、ILK及EMT标志物的表达,复制膀胱癌裸鼠移植瘤模型,免疫组织化学分析瘤组织中RI、ILK及EMT标志物的表达,HE染色观察裸鼠肺转移。结果 EJ细胞中RI与ILK存在共定位的现象,RI与ILK存在相互作用。Western blot结果显示,EJ-RI组E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达高于EJ组(P<0.05),EJ-ILK组基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、扭转蛋白(Twist)、核转录因子(Snail)与重组人S100钙结合蛋白A4(S100A4)表达高于EJ组(P<0.05)。过表达RI抑制膀胱癌体内外EMT及移植瘤自发性肺转移,而过表达ILK促进EMT发生及膀胱癌转移。结论 RI与ILK相互作用调节膀胱癌EMT与转移。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2018年18期）
邢雷,庄翔,陈俊霞[2]（2018）在《核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶相互作用通过ILK/AKT/mTOR通路抑制膀胱癌体内外生长》一文中研究指出背景与目的:蛋白质相互作用控制着细胞信号转导、跨膜转运、DNA合成及转录调控等生命过程,在生命活动中发挥重要作用。前期运用GST蛋白沉降技术与免疫共沉淀等已证明核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)与整合素连接激酶(intergrin-linked kinase,ILK)在体内外直接结合。该研究旨在探讨RI与ILK相互作用对ILK/AKT/m TOR通路与膀胱癌体内外生长的影响。方法:采用免疫荧光观察RI与ILK在膀胱癌EJ细胞中的共定位。采用荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer,FRET)验证RI与ILK的相互作用。构建过表达RI或ILK的EJ细胞系。采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞中RI、ILK及ILK/AKT/m TOR通路相关蛋白的表达。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)与流式细胞术分析细胞增殖与细胞周期。构建膀胱癌裸鼠移植瘤模型,观察过表达RI或ILK对移植瘤生长的影响。采用免疫组织化学与免疫荧光分析瘤组织中RI、ILK及ILK/AKT/m TOR通路相关蛋白的表达。结果:EJ细胞中RI与ILK存在共定位的现象且RI与ILK存在相互作用。过表达RI抑制EJ细胞增殖并导致细胞周期阻滞于S期(P<0.05),阻碍膀胱癌移植瘤的生长(P<0.05),并抑制体内外ILK/AKT/m TOR通路的活化(P<0.05)。而过表达ILK促进细胞增殖与移植瘤的生长(P<0.05),促进体内外ILK/AKT/m TOR信号通路的激活(P<0.05)。结论:RI通过与ILK相互作用阻碍ILK/AKT/m TOR通路激活并抑制膀胱癌体内外的增殖生长。(本文来源于《中国癌症杂志》期刊2018年01期）
丛熙,王爽,任凤,唐颖,樊建慧[3]（2017）在《Akt/mTOR/ULK1依赖性自噬介导核糖核酸酶抑制因子抑制人结肠癌细胞的恶性转化》一文中研究指出核糖核酸酶抑制因子(Ribonuc1ease inhibitor,RI)是一种存在于胞浆中的高度保守的酸性糖蛋白,作为一种核糖核酸酶活性抑制剂能够抑制核糖核酸酶A(RNaseA)的活性。同时,由于其具有强烈的抑制血管生成素(angiogenin,ANG)的作用,显着抑制新生血管生成,也被称为血管生成素抑制因子。已有的研究表明,RI除了抑制RNase A和ANG,还能够抑制整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)的表达及上皮间充质转化(Epithelial mesenchymal transition,EMT)过程,在细胞恶性转化过程中发挥重要的作用。然而,RI的表达与结肠癌发生、发展的详细机制目前尚不完全清楚。本研究发现,在人结肠癌细胞HT-29中过表达的RI明显增加LC3-II在细胞中的累积量,提示RI参与了HT-29细胞自噬活性的正调控。同时,RI过表达明显抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖及克隆形成能力,并增强化疗药物5-Fu的药物敏感性。进一步,本研究检测了RI表达不同的HT-29细胞中自噬相关蛋白的表达。结果表明,过表达RI明显提高BECN1和ATG13的表达,而对ATG5和ATG7的表达无影响。而下调RI的表达则结果相反。为了验证BECN1和ATG13参与RI介导的自噬过程,在RI过表达的HT-29细胞中分别下调BECN1和ATG13的表达,发现HT-29中LC3-II在细胞中的累积量明显减少。利用自噬相关信号通路研究,本研究发现,Akt/mTOR/ULK1信号通路参与了通过上调人结肠癌细胞中RI表达水平诱导的自噬。而下调mTOR或ULK1表达则可以显着抑制RI过表达介导的LC3-II表达升高。以上结果提示,RI可能通过Akt/mTOR/ULK1依赖的信号通路调节BECN1和ATG13的表达并诱导自噬,在人结肠癌细胞的恶性转化过程中起到关键作用。本研究为揭示RI在人结肠癌细胞中的具体作用机制奠定了实验基础。(本文来源于《2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集》期刊2017-08-21）
丁宁,邱景剑,王定友,李劭恒,张云[4]（2016）在《人核糖核酸酶抑制因子siRNA慢病毒载体的构建及鉴定》一文中研究指出本实验旨在构建人核糖核酸酶抑制因子稳定干涉载体pLKO.1-ds RI,为后续观测人核糖核酸酶抑制因子干涉载体的表达对肿瘤细胞的影响奠定基础。用亚克隆法,将针对人核糖核酸酶抑制因子的干涉片段从Simple T-ds RI质粒克隆到pLK-0.1-TRC质粒,用酶切法筛选得到阳性重组质粒pLKO.1-ds RI,用测序法鉴定克隆序列正确。转染时设干扰组、空载体组和空白组叁组,每组叁次重复。用脂质体Cellfectin~R将pLKO.1-ds RI(干扰组)、pLKO.1-TRC(空载体组)转染进人肝癌细胞HepG2细胞中,未处理的细胞作空白组。转染后72hr用Western blotting检测细胞中核糖核酸酶抑制因子表达的变化。双酶切鉴定及测序鉴定结果均正确;Western blotting结果表明,对比空白组(1.1578±0.015)和空载体组(1.1216±0.027),干扰组RI表达(0.6119±0.048)明显下调(P<0.05)。结果表明人核糖核酸酶抑制因子干涉载体pLKO.1-ds RNH1构建成功。(本文来源于《大连大学学报》期刊2016年06期）
庄翔,张潞渝,吕梦欣,陈俊霞[5]（2016）在《核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶的相互作用以及对体外血管生成的影响》一文中研究指出目的研究核糖核酸酶抑制因子(RI)与整合素连接激酶(ILK)的相互作用以及对体外血管生成的影响。方法用LV5-RNH1 homo、LV5NC、pCMV-3×flag-ILK和pCMV-3×flag分别转染EJ细胞后,筛选稳定转染细胞系,分为EJ-RI、EJ-LV5、EJ-ILK、EJ-FLAG和EJ组;构建ILK与红色荧光蛋白融合表达载体YFP-ILK,与CFP-RI质粒共转染293细胞和EJ细胞,用荧光显微镜观察RI和ILK蛋白在细胞内的共定位;构建真核表达质粒pCMV-3×flagILK,用GST蛋白沉降技术检测RI和ILK蛋白在体外的结合作用;用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测蛋白RI和ILK在真核细胞内的结合作用;用小管形成实验探索RI和ILK的相互作用对体外血管形成的影响。结果真核表达载体YFP-ILK和pCMV-3×flag-ILK构建成功;细胞内绿色荧光蛋白融合表达的RI和红色荧光蛋白融合表达的ILK在荧光显微镜下存在共定位现象;RI和ILK蛋白在原核细胞反应体系中存在相互作用;RI和ILK蛋白在真核细胞反应体系内也存在相互作用;RI和ILK的相互作用能抑制血管生成(P<0.05)。结论 RI和ILK蛋白在原核细胞防御体系和真核细胞反应体系中均存在相互结合作用,并对体外血管生成有抑制作用。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2016年08期）
舒静,姜源,姚雪,陈俊霞[6]（2015）在《过表达核糖核酸酶抑制因子对膀胱癌移植瘤侵袭转移及上皮细胞间质转化的影响》一文中研究指出目的研究过表达核糖核酸抑制因子(RI)对膀胱癌移植瘤侵袭转移及上皮细胞间质转化(EMT)的影响。方法将RI过表达质粒(pIRES2-EGFP-RI)和阴性对照质粒(pIRES2-EGFP)稳定转染膀胱癌T24细胞,稳定表达细胞株分别命名为:T24-RI组、T24vector组、T24组。将各组T24细胞分别接种至BALB/C裸鼠左腋皮下,观察移植瘤的生长、微血管密度及肺组织转移灶的变化;进一步分析RI、MMP-2、MMP-9、EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug、Twist蛋白)在肿瘤组织中的表达水平。结果 T24-RI组较T24组与T24vector组,瘤体质量显着降低(P<0.01),抑瘤率分别为26.67%和38.85%;与对照组比较,T24-RI组瘤组织微血管密度明显减少,肺组织未见明显转移灶,同时CD31在瘤组织中表达减少;免疫组织化学染色显示:T24-RI组瘤组织中RI、E-cadherin蛋白的表达明显升高,而MMP-2、MMP-9、N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug、Twist蛋白表达明显降低。结论过表达RI可能通过调节侵袭转移EMT关键蛋白的表达,显着抑制了膀胱癌移植瘤生长、侵袭和转移的潜能。(本文来源于《重庆医学》期刊2015年36期）
钟镇宇,陈俊霞[7]（2015）在《核糖核酸酶抑制因子对血管生成素功能的调控》一文中研究指出血管生成素(angiogenin,ANG)能有效促进血管生成和肿瘤细胞增殖,在肿瘤发生发展中起重要作用.其主要分子机制是通过核转位和激活PI3K/AKT/m TOR信号通路,刺激r RNA转录和核糖体生成.ANG也被发现在肌萎缩侧索硬化症(ALS)和帕金森病(PD)患者中存在基因编码区的功能突变,表明其在运动神经元生理方面发挥作用,其缺陷是神经退行性疾病的一个危险因素.核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)是胞内酸性蛋白质,由460个氨基酸残基组成,分子质量约为50 k D,当其与核糖核酸酶A(RNase A)结合形成复合物后,可抑制RNase A的90%以上活性,从而有效调节细胞内RNA水平.ANG具有低核糖核酸酶活性,是RNase超家族一员,与RNase A有着高度保守的同源顺序.序列、结构和酶学等分析表明,RI也能够与ANG紧密结合,且得到体外实验的证明.研究发现,RI具抑癌基因功能;RI与ANG在细胞内共定位;Co-IP和GST pull-down证实其相互作用,获取了RI与ANG在体内结合的直接证据;RI与AKT磷酸化表达负相关.在膀胱癌细胞及临床标本中证实了RI与ANG和PI3K/AKT通路分子表达的相关性及与肿瘤细胞生长与转移的关系.在细胞和动物模型研究表明,RI调节ANG活性的功能及其分子机制,即RI通过结合ANG而封锁其核转位和调控PI3K/AKT/m TOR信号通路及其相关通路交互应答(cross-talk)的能力,从而抑制肿瘤生长及转移.RI是一个有希望的抗肿瘤蛋白新药和血管生成抑制剂,可望成为基因治疗的靶基因.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2015年12期）
黄梦鸽,潘湘阳,陈俊霞,田强[8]（2015）在《过表达核糖核酸酶抑制因子通过调节ILK/PI3K/AKT信号途径抑制小鼠黑色素瘤B16-F10细胞体内外生长》一文中研究指出核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)是胞浆内的一种酸性蛋白质.已有研究证明,RI与核糖核酸酶A(RNase A)和血管生成素(angiogenin,ANG)结合可抑制其活性.本室前期实验证实,RI可有效抑制某些肿瘤的生长和转移.然而,RI抑制肿瘤的分子机制尚不清楚.本研究探讨RI对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞生长和凋亡的影响及其机制.MTT法结合流式细胞术分析结果证明,RI基因稳定转染导致B16-F10黑色素瘤细胞S期阻滞,抑制B16-F10黑色素瘤细胞增殖.Annexin V/PI结合流式细胞术结果显示,RI过表达引起细胞凋亡.与此相一致,蛋白质印迹分析显示,过表达RI引起抗凋亡分子Bcl-2表达下调,而Bax上调,同时伴有Pro-casepase 3激活.C57BL/6小鼠移植成瘤实验显示,与对照相比,转染RI的B16-F10细胞形成的肿瘤重量显着减少,同时伴有肿瘤组织微血管密度降低.提示RI过表达能抑制微血管生成.此外,体内外组织/细胞免疫化学和蛋白质印迹结果揭示,过表达RI可显着抑制整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)下游靶分子Akt和GSK-3β的磷酸化,并降低β-联蛋白的表达.研究结果证明,过表达RI可通过抑制ILK/PI3K/AKT信号通路,促进细胞凋亡,引起S期阻滞,并抑制血管生成,从而显着抑制小鼠黑色素瘤B16-F10细胞在体内、外的生长.上述结果提示,RI可能是治疗黑色素瘤的有效分子靶点.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2015年04期）
潘湘阳,彭源,陈俊霞[9]（2015）在《上调核糖核酸酶抑制因子对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响》一文中研究指出目的研究核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因表达对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响。方法构建RI真核表达质粒p IRES2-EGFP-RI稳定转染B16细胞,未转染和空质粒作对照组(p IRES2-EGFP组),经G418筛选出阳性克隆。RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光检测RI的表达;MTT检测细胞的增殖;流式细胞术、TUNEL及Hochest33342检测细胞周期及凋亡;Western blot检测凋亡相关的蛋白及ILK/PI3K/AKT信号通路关键分子的表达;分别注射各组B16细胞到C57/BL小鼠建立移植瘤模型,观察肿瘤的生长及肿瘤微血管的变化,进一步分析ILK/PI3K/AKT信号通路蛋白在肿瘤组织中的表达。结果转染RI细胞组的RI mRNA和蛋白表达水平显着升高;MTT结果显示B16-RI细胞较对照组增殖能力明显降低,流式细胞结果显示B16-RI细胞的S期明显增加,表明RI表达上调后细胞生长停滞于S期(P<0.05);Hochest 33342、TUNEL及Annexin V和PI双染色流式法细胞凋亡检测结果证实,B16-RI细胞与对照组相比出现大量凋亡细胞(P<0.01)及典型凋亡形态特征:染色质凝集,核碎裂和明亮的蓝色荧光等;Western blot结果显示,与对照组相比,B16-RI细胞中ILK、p-Akt、p-GSK3β、Bcl-2及β-catenin的表达明显降低,而活化的Caspase-3和Bax蛋白的表达显着增加(P<0.01);动物的移植瘤实验结果显示,转RI组的小鼠的瘤重显着降低(P<0.01),瘤组织中的血管密度明显减少,同时ILK、p-Akt、p-GSK3β、β-catenin在瘤组织中表达减少。TUNEL肿瘤组织凋亡检测结果与体外细胞一致。结论过表达RI可能通过调节ILK/PI3K/AKT信号通路显着抑制了小鼠黑色素瘤B16细胞的生长并诱导了B16细胞的凋亡。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2015年13期）
刘玉林,庄翔,陈俊霞[10]（2015）在《血管生成素及其突变体与核糖核酸酶抑制因子蛋白的相互作用》一文中研究指出目的研究血管生成素(ANG)突变体与核糖核酸酶抑制因子(RI)的相互作用。方法构建p CMV-3×flagANGH13R和p CMV-3×flag-ANGH114R突变体质粒;用免疫荧光标记结合共聚焦显微镜技术来确立RI与ANG突变体蛋白在BIU-87细胞内的定位;用GST融合蛋白沉降技术检测RI与ANG突变体蛋白在细胞外的相互作用;用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测两蛋白在人膀胱癌BIU-87细胞内的相互作用。结果 p CMV-3×flag-ANGH13R和p CMV-3×flag-ANGH114R突变体质粒构建成功;RI和ANG突变体蛋白存在共定位现象;GST-RI融合蛋白诱导表达正确,RI和ANG突变体蛋白在原核反应体系中存在相互作用;RI与ANG突变体蛋白在真核细胞内存在相互作用。结论 RI和ANG突变体蛋白在原核反应体系和真核细胞中都存在相互作用,并且两突变型与RI相互作用存在一定的差异。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2015年03期）
核糖核酸酶抑制因子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景与目的:蛋白质相互作用控制着细胞信号转导、跨膜转运、DNA合成及转录调控等生命过程,在生命活动中发挥重要作用。前期运用GST蛋白沉降技术与免疫共沉淀等已证明核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)与整合素连接激酶(intergrin-linked kinase,ILK)在体内外直接结合。该研究旨在探讨RI与ILK相互作用对ILK/AKT/m TOR通路与膀胱癌体内外生长的影响。方法:采用免疫荧光观察RI与ILK在膀胱癌EJ细胞中的共定位。采用荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer,FRET)验证RI与ILK的相互作用。构建过表达RI或ILK的EJ细胞系。采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞中RI、ILK及ILK/AKT/m TOR通路相关蛋白的表达。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)与流式细胞术分析细胞增殖与细胞周期。构建膀胱癌裸鼠移植瘤模型,观察过表达RI或ILK对移植瘤生长的影响。采用免疫组织化学与免疫荧光分析瘤组织中RI、ILK及ILK/AKT/m TOR通路相关蛋白的表达。结果:EJ细胞中RI与ILK存在共定位的现象且RI与ILK存在相互作用。过表达RI抑制EJ细胞增殖并导致细胞周期阻滞于S期(P<0.05),阻碍膀胱癌移植瘤的生长(P<0.05),并抑制体内外ILK/AKT/m TOR通路的活化(P<0.05)。而过表达ILK促进细胞增殖与移植瘤的生长(P<0.05),促进体内外ILK/AKT/m TOR信号通路的激活(P<0.05)。结论:RI通过与ILK相互作用阻碍ILK/AKT/m TOR通路激活并抑制膀胱癌体内外的增殖生长。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
核糖核酸酶抑制因子论文参考文献
[1].舒静,姜源,庄翔,陈俊霞.核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶对膀胱癌上皮-间质转化与转移的影响[J].中国现代医学杂志.2018
[2].邢雷,庄翔,陈俊霞.核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶相互作用通过ILK/AKT/mTOR通路抑制膀胱癌体内外生长[J].中国癌症杂志.2018
[3].丛熙,王爽,任凤,唐颖,樊建慧.Akt/mTOR/ULK1依赖性自噬介导核糖核酸酶抑制因子抑制人结肠癌细胞的恶性转化[C].2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集.2017
[4].丁宁,邱景剑,王定友,李劭恒,张云.人核糖核酸酶抑制因子siRNA慢病毒载体的构建及鉴定[J].大连大学学报.2016
[5].庄翔,张潞渝,吕梦欣,陈俊霞.核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶的相互作用以及对体外血管生成的影响[J].基础医学与临床.2016
[6].舒静,姜源,姚雪,陈俊霞.过表达核糖核酸酶抑制因子对膀胱癌移植瘤侵袭转移及上皮细胞间质转化的影响[J].重庆医学.2015
[7].钟镇宇,陈俊霞.核糖核酸酶抑制因子对血管生成素功能的调控[J].中国生物化学与分子生物学报.2015
[8].黄梦鸽,潘湘阳,陈俊霞,田强.过表达核糖核酸酶抑制因子通过调节ILK/PI3K/AKT信号途径抑制小鼠黑色素瘤B16-F10细胞体内外生长[J].中国生物化学与分子生物学报.2015
[9].潘湘阳,彭源,陈俊霞.上调核糖核酸酶抑制因子对小鼠黑色素瘤B16细胞生长和凋亡的影响[J].第叁军医大学学报.2015
[10].刘玉林,庄翔,陈俊霞.血管生成素及其突变体与核糖核酸酶抑制因子蛋白的相互作用[J].基础医学与临床.2015
论文知识图
