通用型H5亚型禽流感病毒亚单位疫苗抗原表达和免疫效力研究

通用型H5亚型禽流感病毒亚单位疫苗抗原表达和免疫效力研究

论文摘要

H5亚型高致病性禽流感病毒因其变异快、感染性和致病性强等特点严重威胁着家禽业和人类健康。为研制具有广谱保护性的H5亚型禽流感病毒通用型亚单位疫苗,本研究分析和对比各分支H5亚型禽流感病毒的HA蛋白基因,获得HA蛋白基因共有序列,采用杆状病毒表达系统构建和表达重组HA蛋白。经IFA、Western Blot、微量血凝试验等方法鉴定重组HA蛋白,结果显示重组HA蛋白在昆虫细胞中得到正确表达,血凝效价达13log2,且与禽流感Re6、Re7和Re8阳性血清均具有较好的交叉反应活性。免疫效力试验结果显示,重组HA蛋白疫苗组血清抗体能与H5亚型禽流感病毒Re6、Re7和Re8检测抗原反应,且能诱导机体产生较高水平IFN-γ和IL-4。该研究结果可为H5亚型禽流感通用型亚单位疫苗研发提供试验基础和科学依据。

论文目录

  • 材料与方法
  •   1基因、细胞、检测抗原与阳性血清
  •   2主要试剂
  •   3重组杆状病毒的制备和鉴定
  •   4间接免疫荧光试验(Indirect immunoinfluscent assay,IFA)鉴定重组杆状病毒
  •   5 SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组蛋白HA
  •   6电镜观察
  •   7微量血凝试验(Hemagglutination assay,HA)鉴定重组蛋白HA血凝活性
  •   8微量血凝抑制试验(Hemagglutination inhibition assay,HIA)鉴定重组蛋白HA交叉反应性
  •   9免疫
  •   10 HI检测血清抗体效价
  •   11细胞因子IL-4、IFN-γ检测
  •   12统计学分析
  • 结果
  •   1酶切鉴定重组转移载体
  •   2间接免疫荧光试验(IFA)鉴定重组杆状病毒
  •   3 SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组蛋白HA
  •   4电镜观察鉴定
  •   5重组蛋白HA血凝活性
  •   6重组HA蛋白交叉反应活性
  •   7免疫后血清中HI抗体效价
  •   8免疫后血清中IL-4、IFN-γ的含量检测
  • 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张雪花,陆吉虎,华涛,卢宇,侯继波,梅梅

    关键词: 亚型禽流感病毒,亚单位疫苗抗原,表达,免疫效力

    来源: 病毒学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 江苏省农业科学院动物免疫工程研究所,江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地,教育部禽类预防医学重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室扬州大学兽医院

    基金: 国家重点研发计划(项目号:2017YFD0500706),题目:禽用疫苗泡沫冻干和免疫增强剂技术研究,教育部禽类预防医学,江苏省动物预防医学重点实验室开放课题(项目号:YF201801),题目:广谱型H5亚型禽流感病毒亚单位疫苗的研制~~

    分类号: S852.65

    DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003600

    页码: 864-872

    总页数: 9

    文件大小: 1294K

    下载量: 198

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